碧云天生产的Poly(U) Polymerase，即Poly(U)聚合酶，也称PolyU Polymerase或PolyU聚合酶，简称PUP，是由碧云天自主研发的PerfectProtein™技术平台表达、纯化获得的重组聚合酶。Poly(U) Polymerase能以不依赖模板的方式将来自UTP的UMP整合到底物RNA的3'末端，形成poly(U)尾；也可以不依赖模板的方式将来自ATP的AMP整合到底物RNA的3'末端，形成poly(A)尾，但该酶形成poly(U)尾的能力比形成poly(A)尾的能力强得多。如果反应中使用生物素等标记的UTP，则可实现对RNA的3'末端的生物素标记等[1]。

碧云天Poly(U) Polymerase对RNA 3'末端加Poly(U)尾的效果参考图1。

图1.碧云天Poly(U) Polymerase (R7072)和国外N公司的同类产品(Competitor)对RNA 3'末端加Poly(U)尾的效果图。在25µl反应体系中加入图中指定量的本产品或N公司的Poly(U) Polymerase，37ºC孵育1小时进行反应，65ºC加热20分钟进行失活，反应完毕后加入2X RNA Loading Buffer (R0215)，95ºC孵育3分钟进行变性，随后进行尿素变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。如图所示，本产品与N公司的产品相比，具有类似的对RNA 3'末端加Poly(U)尾的效果。反应体系(25μl)：50mM NaCl, 10mM Tris-HCl, 10mM MgCl2, 1mM DTT, pH7.9 @ 25ºC, 0.5mM UTP，人工合成的80pmol的16nt长度的RNA以及不同浓度的Poly(U) Polymerase。实际检测效果会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。

用途：RNA 3'端加Poly(U)尾或Poly(A)尾，然后用于克隆；用生物素或荧光修饰的UTP标记RNA；放射性标记RNA；对3'末端为2'氧甲基的RNA进行Poly(A)加尾；对进入真核细胞的RNA加尾从而研究其对RNA稳定性和翻译的影响。

来源：由大肠杆菌表达，表达基因为来自Schizosaccharomyces pombe Poly(U) Polymerase基因。

活性单位定义：One unit is defined as the amount of enzyme that incorporates 1nmol of UMP into RNA in a 50μl volume in 10 minutes at 37ºC.

纯度：不含DNase、RNase和磷酸酯酶。

酶储存溶液：10mM Tris-HCl (pH7.5 @ 25ºC), 100mM NaCl, 0.1mM EDTA, 1mM DTT, 50% (v/v) Glycerol.

失活或抑制：65ºC加热20分钟可使Poly(U) Polymerase失活。

10X Poly(U) Reaction Buffer：500mM NaCl, 100mM Tris-HCl, 100mM MgCl2, 10mM DTT, pH7.9 @ 25ºC.

-20ºC保存，至少两年有效。

10X Poly(U) Reaction Buffer中不包含UTP。

Poly(U) Polymerase的用量主要影响目的产物的长度，可以根据所需目的产物的长度适当调整酶的用量，如果想得到长度较长的产物可以适当加大酶的用量或延长反应时间。

本产品中在使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20ºC保存。

超纯水推荐使用BeyoPure™ Ultrapure Water (DNase/RNase-Free, Sterile) (ST876)。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。