Poly(U) Polymerase
收藏
产品编号 R7072S
数量
¥ 398.00
产品包装:
100U 500U 2kU
产品简介
使用说明
相关文件下载
相关产品
相关论文
产品问答

碧云天生产的Poly(U) Polymerase,即Poly(U)聚合酶,也称PolyU Polymerase或PolyU聚合酶,简称PUP,是由碧云天自主研发的PerfectProtein™技术平台表达、纯化获得的重组聚合酶。Poly(U) Polymerase能以不依赖模板的方式将来自UTP的UMP整合到底物RNA的3'末端,形成poly(U)尾;也可以不依赖模板的方式将来自ATP的AMP整合到底物RNA的3'末端,形成poly(A)尾,但该酶形成poly(U)尾的能力比形成poly(A)尾的能力强得多。如果反应中使用生物素等标记的UTP,则可实现对RNA的3'末端的生物素标记等[1]。

碧云天Poly(U) Polymerase对RNA 3'末端加Poly(U)尾的效果参考图1。

图1.碧云天Poly(U) Polymerase (R7072)和国外N公司的同类产品(Competitor)对RNA 3'末端加Poly(U)尾的效果图。在25µl反应体系中加入图中指定量的本产品或N公司的Poly(U) Polymerase,37ºC孵育1小时进行反应,65ºC加热20分钟进行失活,反应完毕后加入2X RNA Loading Buffer (R0215),95ºC孵育3分钟进行变性,随后进行尿素变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。如图所示,本产品与N公司的产品相比,具有类似的对RNA 3'末端加Poly(U)尾的效果。反应体系(25μl):50mM NaCl, 10mM Tris-HCl, 10mM MgCl2, 1mM DTT, pH7.9 @ 25ºC, 0.5mM UTP,人工合成的80pmol的16nt长度的RNA以及不同浓度的Poly(U) Polymerase。实际检测效果会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。

用途:RNA 3'端加Poly(U)尾或Poly(A)尾,然后用于克隆;用生物素或荧光修饰的UTP标记RNA;放射性标记RNA;对3'末端为2'氧甲基的RNA进行Poly(A)加尾;对进入真核细胞的RNA加尾从而研究其对RNA稳定性和翻译的影响。

来源:由大肠杆菌表达,表达基因为来自Schizosaccharomyces pombe Poly(U) Polymerase基因。

活性单位定义:One unit is defined as the amount of enzyme that incorporates 1nmol of UMP into RNA in a 50μl volume in 10 minutes at 37ºC.

纯度:不含DNase、RNase和磷酸酯酶。

酶储存溶液:10mM Tris-HCl (pH7.5 @ 25ºC), 100mM NaCl, 0.1mM EDTA, 1mM DTT, 50% (v/v) Glycerol.

失活或抑制:65ºC加热20分钟可使Poly(U) Polymerase失活。

10X Poly(U) Reaction Buffer:500mM NaCl, 100mM Tris-HCl, 100mM MgCl2, 10mM DTT, pH7.9 @ 25ºC.

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
R7072S-1 Poly(U) Polymerase (2U/µl) 50µl
R7072S-2 10X Poly(U) Reaction Buffer 0.2ml
R7072S-3 UTP (10mM) 65μl
说明书 1份

产品编号 产品名称 包装
R7072M-1 Poly(U) Polymerase (2U/µl) 250µl
R7072M-2 10X Poly(U) Reaction Buffer 1ml
R7072M-3 UTP (10mM) 325μl
说明书 1份

产品编号 产品名称 包装
R7072L-1 Poly(U) Polymerase (2U/µl) 1ml
R7072L-2 10X Poly(U) Reaction Buffer 4ml
R7072L-3 UTP (10mM) 1.3ml
说明书 1份
保存条件:

-20ºC保存,至少两年有效。

注意事项:

10X Poly(U) Reaction Buffer中不包含UTP。

Poly(U) Polymerase的用量主要影响目的产物的长度,可以根据所需目的产物的长度适当调整酶的用量,如果想得到长度较长的产物可以适当加大酶的用量或延长反应时间。

本产品中在使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20ºC保存。

超纯水推荐使用BeyoPure™ Ultrapure Water (DNase/RNase-Free, Sterile) (ST876)。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1.使用Poly(U) Polymerase对RNA 3'端加Poly(U)尾。
a.参考下表在冰浴中配制反应体系。
Component Volume
Ultrapure Water 18.45µl
10X Poly(U) Reaction Buffer 2.5µl
Single-stranded RNA (100µM) 0.8µl
UTP (10mM) 1.25µl
RNase Inhibitor (R0102) 1µl
Poly(U) Polymerase (2U/µl) 1µl
注:请把除Poly(U) Polymerase以外的组分充分混匀后再加入Poly(U) Polymerase,加入Poly(U) Polymerase后可以用枪吹打或轻轻Vortex混匀。
b.反应条件:37ºC孵育1小时。
c.终止反应:65ºC孵育20分钟并加入2X RNA Loading Buffer (R0215)。
2.其它应用请参考相关文献进行。
参考文献:
1.Kwak J E, Wickens M. RNA. 2007. 13(6).
相关产品:
产品编号 产品名称 包装
D7378-250μl ATP (100mM, Nuclease free) 250μl
D7378-1ml ATP (100mM, Nuclease free) 1ml
D7378-5ml ATP (100mM, Nuclease free) 5ml
D7379-250μl CTP (100mM, Nuclease free) 250μl
D7379-1ml CTP (100mM, Nuclease free) 1ml
D7379-5ml CTP (100mM, Nuclease free) 5ml
D7380-250μl GTP (100mM, Nuclease free) 250μl
D7380-1ml GTP (100mM, Nuclease free) 1ml
D7380-5ml GTP (100mM, Nuclease free) 5ml
D7381-250μl UTP (100mM, Nuclease free) 250μl
D7381-1ml UTP (100mM, Nuclease free) 1ml
D7381-5ml UTP (100mM, Nuclease free) 5ml
D7383-1ml NTP set (100mM each, Nuclease free) 4×250μl
D7385-500μl NTP Mix (10mM each, Nuclease free) 500μl
D7385-2ml NTP Mix (10mM each, Nuclease free) 2ml
D7387-250μl NTP Mix (25mM each, Nuclease free) 250μl
D7387-1ml NTP Mix (25mM each, Nuclease free) 1ml
D7062 SP6 RNA Polymerase 500U
D7066 T3 RNA Polymerase 500U
D7069 T7 RNA Polymerase 1000U
D7089 RNase H 100U
D7098S T4 Polynucleotide Kinase 500U
D7098M T4 Polynucleotide Kinase 2000U
D7098L T4 Polynucleotide Kinase 10000U
D7100S T4 Polynucleotide Kinase (3' phosphatase minus) 500U
D7100M T4 Polynucleotide Kinase (3' phosphatase minus) 2000U
D7100L T4 Polynucleotide Kinase (3' phosphatase minus) 10000U
P0347S RNase活性荧光检测试剂盒 100次
P0347M RNase活性荧光检测试剂盒 500次
R0051 Annealing Buffer for RNA Oligos (5X) 1ml
R0056-2ml PEG8000 (50%, RNase free) 2ml
R0058-1ml MgCl2 (100mM, DEPC-treated) 1ml
R0621S T4 RNA Ligase 1 (ssRNA Ligase) 1000U
R0621M T4 RNA Ligase 1 (ssRNA Ligase) 5000U
R0632S T4 RNA Ligase 2 (dsRNA Ligase) 1000U
R0635S T4 RNA Ligase 2, truncated 5kU
R0635M T4 RNA Ligase 2, truncated 20kU
R0635L T4 RNA Ligase 2, truncated 100kU
R0637S T4 RNA Ligase 2, truncated KQ 5kU
R0637M T4 RNA Ligase 2, truncated KQ 20kU
R0637L T4 RNA Ligase 2, truncated KQ 100kU
R0639S AlkB (RNA/DNA去甲基化酶, Nuclease-free) 200U
R0639M AlkB (RNA/DNA去甲基化酶, Nuclease-free) 1000U
R0639L AlkB (RNA/DNA去甲基化酶, Nuclease-free) 5000U
R0700S 小RNA 3'接头(5'腺苷化, 3'封闭)及连接试剂盒 20次
R0702S Universal miRNA Cloning Linker (5´腺苷化3´封闭) 1μg
R0702M Universal miRNA Cloning Linker (5´腺苷化3´封闭) 5μg
R0716S 5' DNA Adenylation Kit 10次
R0716M 5' DNA Adenylation Kit 50次
R0719S 5' DNA/RNA Adenylase 3kU
R0719M 5' DNA/RNA Adenylase 15kU
R0722S Circular RNA Synthesis Kit 20次
R0722M Circular RNA Synthesis Kit 100次
R7006S SP6 RNA Polymerase 1KU
R7006M SP6 RNA Polymerase 5KU
R7006L SP6 RNA Polymerase 25KU
R7006XL SP6 RNA Polymerase 100KU
R7009S T3 RNA Polymerase 1KU
R7009M T3 RNA Polymerase 5KU
R7009L T3 RNA Polymerase 25KU
R7009XL T3 RNA Polymerase 100KU
R7012S T7 RNA Polymerase 1KU
R7012M T7 RNA Polymerase 5KU
R7012L T7 RNA Polymerase 25KU
R7012XL T7 RNA Polymerase 100KU
R7013S T7 RNA Polymerase (High Concentration) 25KU
R7013M T7 RNA Polymerase (High Concentration) 100KU
R7013L T7 RNA Polymerase (High Concentration) 500KU
R7016S T7 Quick High Yield RNA Transcription Kit 25次
R7016M T7 Quick High Yield RNA Transcription Kit 100次
R7018S T7 High Yield RNA Transcription Kit 25次
R7018M T7 High Yield RNA Transcription Kit 100次
R7020S SP6 High Yield RNA Transcription Kit 25次
R7020M SP6 High Yield RNA Transcription Kit 100次
R7070S E.coli Poly(A) Polymerase 100U
R7070M E.coli Poly(A) Polymerase 500U
R7070L E.coli Poly(A) Polymerase 2.5kU
R7070XL E.coli Poly(A) Polymerase 10kU
R7075S Poly(A) Polymerase Tailing Kit 50-250次
R7088S RNase H 250U
R7088M RNase H 1000U
R7088L RNase H 5000U
R7090S Thermostable RNase H 250U
R7090M Thermostable RNase H 1000U
R7090L Thermostable RNase H 5000U
R7090FT Thermostable RNase H 50U
R7092S RNase R 500U
R7092M RNase R 2KU
R7092L RNase R 10KU
R7096S RNase T1 100000U
R7096M RNase T1 500000U
R0081-1ml BeyoMag™ RNA Clean Magnetic Beads (RNA纯化磁珠) 1ml
R0081-5ml BeyoMag™ RNA Clean Magnetic Beads (RNA纯化磁珠) 5ml
R0081-20ml BeyoMag™ RNA Clean Magnetic Beads (RNA纯化磁珠) 20ml
R0081-100ml BeyoMag™ RNA Clean Magnetic Beads (RNA纯化磁珠) 100ml
R0301S BeyoClick™ EU-488 RNA合成检测试剂盒 50-500次
R0301L BeyoClick™ EU-488 RNA合成检测试剂盒 200-2000次
R0305S BeyoClick™ EU-555 RNA合成检测试剂盒 50-500次
R0305L BeyoClick™ EU-555 RNA合成检测试剂盒 200-2000次
R0309S BeyoClick™ EU-594 RNA合成检测试剂盒 50-500次
R0309L BeyoClick™ EU-594 RNA合成检测试剂盒 200-2000次
R0311S BeyoClick™ EU-647 RNA合成检测试剂盒 50-500次
R0311L BeyoClick™ EU-647 RNA合成检测试剂盒 200-2000次
R7061S Biotin RNA Labeling Kit (SP6/T7) 20次
R7061M Biotin RNA Labeling Kit (SP6/T7) 100次
ST040-1g DTT (DNase, RNase & Protease free) 1g
ST040-5g DTT (DNase, RNase & Protease free) 5g
ST040-25g DTT (DNase, RNase & Protease free) 25g
ST040-100g DTT (DNase, RNase & Protease free) 100g
ST041-2ml 0.5M DTT (DNase, RNase & Protease free) 2ml
ST041-10ml 0.5M DTT (DNase, RNase & Protease free) 10ml
ST576 RNase A (10mg/ml, DNase free) 1ml
ST577 RNase A (100mg/ml, DNase free) 0.5ml
ST578 RNase A (10mg/ml) 1ml
ST579 RNase A (100mg/ml) 0.5ml
ST876-100ml BeyoPure™ Ultrapure Water (DNase/RNase-Free, Sterile) 100ml
ST876-500ml BeyoPure™ Ultrapure Water (DNase/RNase-Free, Sterile) 500ml
相关产品请点击如下按钮:
使用本产品的文献: