Annealing Buffer for RNA Oligos (5X)
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产品编号 R0051
数量
¥ 117.00
产品包装:
1ml
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使用说明
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碧云天生产的Annealing Buffer for RNA Oligos(5X),即RNA寡核苷酸退火缓冲液,是一种经过我们多次实验证实、可以用于RNA oligo退火的缓冲液。用于siRNA而合成的互补的RNA oligo可以用该退火缓冲液进行退火,以形成双链RNA。使用碧云天生产的Annealing Buffer for RNA Oligos(5X),可以有效避免RNA oligo自身形成发夹结构,有利于退火的正确进行。
使用本试剂盒操作非常简单,只需把待退火的RNA oligo和Annealing Buffer for RNA Oligos(5X)按照一定比例混合后,置于PCR仪上,约60分钟即可完成。
Annealing Buffer for RNA Oligos(5X)经过特殊处理,不含RNase,可避免RNA的降解。
如果一次退火反应体积为100微升,一个包装的退火缓冲液可以进行50次退火反应。
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
R0051 Annealing Buffer for RNA Oligos(5X) 1ml
说明书 1份

保存条件:
-20℃保存,一年有效。
注意事项:
Annealing Buffer for RNA Oligos(5X)只适合于RNA oligo的退火,不适合用于DNA oligo 的退火。
由于RNA非常容易被降解,一定要严格遵守RNA的操作规范,防止RNase污染。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. 把待退火的RNA oligo用DEPC水配制成200μM。溶解Annealing Buffer for RNA Oligos(5X),混匀备用。
2. 如下设置退火反应体系:

DEPC水 30μl
Annealing Buffer for RNA Oligos(5X) 20μl
RNA oligo A(200μM) 25μl
RNA oligo B(200μM) 25μl
总体积 100μl

按照上述顺序依次加入各种试剂,混匀。如果用的PCR仪没有热盖,在反应体系上加入一滴矿物油(mineral oil)以防止蒸发。
3. 如下设置PCR仪进行退火反应:

步骤 温度 时间 说明
1 90℃ 1分钟 让oligo充分变性
2 每5秒下降0.1℃,降至25℃ 约60分钟 退火
3 4℃ 长时间保持 暂时存放

注1:每5秒下降0.1℃,降至25℃的程序设置,以Bio-Rad的T100为例为:1. 90℃, 2:00; 2. 90º, 0.05, -0.1℃ per cycle; 3. GOTO step 2, 650X; 4. 4℃, ∞。
注2:如果所用的PCR仪不具备下降0.1℃的功能,也可以设置为每60秒下降1℃。程序设置以Bio-Rad的T100为例为:1. 90℃, 1:00; 2. 90℃, 1:00, -1℃ per cycle; 3. GOTO step 2, 65X; 4. 4℃, ∞。
注3:如果条件有限,也可以将水浴锅加热至90℃,把PCR管放在水浴锅中,或者把煮沸的热水加入到保温杯或保温瓶中,待水温降到90℃时放入PCR管。所用水量控制在1-2小时内自然降温至25℃左右。此方法的退火效果可能会比使用PCR仪略差一些。
4. 退火结束后可以直接用于转染细胞,也可以-20℃冻存备用。

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使用本产品的文献:
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