BeyoMag™ RNA Clean Magnetic Beads (RNA纯化磁珠)
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产品编号 R0081-5ml
数量
¥ 508.00
产品包装:
1ml 5ml 20ml 100ml
产品简介
使用说明
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碧云天研发生产的BeyoMag™ RNA Clean Magnetic Beads (RNA纯化磁珠)是基于固相载体可逆化固定(Solid phase reverse immobilization, SPRI)技术,使用新型核酸纯化介质包被的磁珠,配合优化的缓冲体系,用于稳定、高效、便捷地从常见酶反应体系中纯化RNA或cDNA。本产品不仅适合手工实验操作,还可用于高通量的自动化移液工作站。

RNA纯化和杂质的去除对于RNA相关的实验是非常重要的,包括RNA-seq、qPCR、微阵列(Microarray)等[1]。本产品可广泛应用于基因测序以及分子诊断等领域,尤其适用于rRNA去除后或DNase I酶处理后的RNA纯化、体外转录产物纯化及二代测序(Next generation sequencing, NGS)文库构建过程中的RNA纯化[2]。本产品和目前广泛使用的RNAClean XP (Beckman Coulter公司产品)的使用方式和效果基本一致。RNA纯化磁珠,也被称为DNA/RNA提取纯化磁珠、RNA Cleanup & Concentration、NGS Cleanup Magnetic Beads、RNA Clean & Concentrator、RNA Clean-Up、RNA Cleaner等。

本RNA纯化磁珠既适用于RNA的纯化,也适用于cDNA或其它DNA的纯化,即本产品不能特异性区分RNA或DNA,但可以通过相应的DNA酶或RNA酶处理后再进行RNA或DNA纯化。本产品也不适用于从细胞或组织中直接提取RNA。

本产品的主要操作流程图如1所示。样品中的RNA与磁珠结合,在外界磁场(如磁分离架)的作用下,磁珠与相应溶液可以快速而高效地分离,经洗涤充分去除杂质,最后用洗脱液将RNA从磁珠上洗脱下来,即可获得高度纯化的RNA样品。

图1. 碧云天BeyoMag™ RNA Clean Magnetic Beads (RNA纯化磁珠)的实验流程示意图。

本产品操作便捷,回收效率高。本产品使用非常便捷,通常15分钟内即可完成RNA样品的纯化。本产品通常回收率可以达到90%以上,也适用于低浓度RNA的浓缩。

本产品特异性强、RNA结合量高。本产品结合量高,对不同体系的RNA可以快速进行分离纯化,不易产生非特异吸附,可以快速有效去除未掺入的dNTP或NTP、引物、引物二聚体、盐和其它杂质。不同长度的体外转录的RNA经本产品的纯化效果参见图2。

图2. 碧云天BeyoMag™ RNA Clean Magnetic Beads (RNA纯化磁珠)纯化不同长度RNA的效果图。以4条不同长度的携带有T7 Promoter序列的线性化质粒分别为模板,通过T7 Quick High Yield RNA Transcription Kit (R7016)体外转录成RNA,再经RNase free的DNase I (D7073)消化去除DNA模板后混合,经本产品纯化前后的比较。图中可见RNA的回收效率非常高。实际纯化效果会因实验条件、操作等而存在一定差异,本图仅供参考。

本产品兼容性强。本产品不仅适用于少量样本的手工操作,也适用于高通量(High-throughput screening)的自动化操作系统。

本产品安全环保。本产品与传统的RNA回收方法相比,避免了酚、氯仿等有机溶剂的使用,更加安全。

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
R0081-1ml BeyoMag™ RNA Clean Magnetic Beads (RNA纯化磁珠) 1ml
R0081-5ml BeyoMag™ RNA Clean Magnetic Beads (RNA纯化磁珠) 5ml
R0081-20ml BeyoMag™ RNA Clean Magnetic Beads (RNA纯化磁珠) 20ml
R0081-100ml BeyoMag™ RNA Clean Magnetic Beads (RNA纯化磁珠) 100ml
说明书 1份
保存条件:

4℃保存,一年有效。

注意事项:

需自备无水乙醇和磁分离装置,推荐使用碧云天的BeyoMag™磁分离架系列产品(FMS004FMS008FMS012FMS016FMS024)。

操作过程要严格保证无RNase污染。请戴上口罩和手套操作,尽量防止人体表面的RNase污染样品。操作时应避免对着样品或所使用的试剂盒或耗材呼气或说话,以防RNase污染。对于操作环境中RNase的去除,推荐使用碧云天生产的RNase and DNase Away (R0123)以去除实验桌、仪器设备表面或其它接触面上的RNase。

本产品的所用试剂和耗材都要求是RNase-free,操作时应小心,避免被污染。如果耗材可能有RNase污染,可考虑用0.01%的DEPC水浸泡过夜,然后高温高压灭菌并烘干。

本产品避免冷冻、避免高速离心。

为保证RNA的回收效率,使用前须将磁珠由4℃冰箱取出,或取所需量,待其温度平衡至室温后再使用。

分装或使用磁珠时,请适当漩涡震荡或反复颠倒以保证磁珠充分混匀。

80% (v/v)乙醇溶液推荐现用现配,否则后续使用时可能会因为乙醇的挥发而影响回收效率。

请勿长时间干燥磁珠,干燥过度将导致磁珠的不可逆聚集,从而降低洗脱效率。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. 准备工作。
a.将磁珠溶液从4℃冰箱取出,适当漩涡震荡或充分颠倒以保证磁珠充分混匀,然后取出所需的量,平衡至室温。
b.新鲜配制80% (v/v)乙醇溶液。例如分别量取8ml无水乙醇和2ml超纯水或双蒸水(RNase free),混匀后即得约10ml 80% (v/v)乙醇溶液。超纯水推荐使用碧云天生产的ST876 BeyoPure™ Ultrapure Water (DNase/RNase-Free, Sterile)
注:因为乙醇和水混合后体积会发生改变,所以请勿量取8ml乙醇,加超纯水或双蒸水定容至10ml。
2. RNA纯化。
a.将0.5-5µg RNA样本转移到洁净的RNase-free 1.5ml离心管(如FTUB306)。
b.根据样本体积,参照下表用量加入BeyoMag™ RNA Clean Magnetic Beads (使用前务必混匀),一般磁珠用量是样品体积的2倍。轻柔涡旋震荡或移液器吹打10次混匀,室温孵育5分钟。随后将离心管置于磁力架的磁珠中,室温孵育30秒,小心移除上清。
Sample Volume (µl) Beads (µl)
50 100
100 200
150 300
200 400
注1:磁珠在使用前一定要适当涡旋震荡或吹打混匀。如果希望提升RNA回收效率,可适当增加磁珠用量,延长结合时间。
注2:一般情况下磁珠用量为样品体积的1.8-2.0倍,用户也可根据实际测试效果对磁珠用量进行适当的调整。
c.保持离心管始终处于磁力架中,加入200µl新鲜配制的80% (v/v)乙醇溶液漂洗磁珠,室温孵育30秒,小心移除上清。
d.重复步骤c一次。
e.保持离心管始终处于磁力架中,打开离心管盖,室温干燥至磁珠刚刚出现龟裂状(约5-10分钟)。
注:磁珠晾干要避免过度干燥,过度干燥会导致RNA的洗脱效率降低。
f.将离心管从磁力架中取出,加入适量超纯水水(10-30µl),轻柔涡旋震荡或使用移液器轻轻吹打以充分混匀。
g.室温孵育5分钟。
h.将离心管短暂低速离心后置于磁力架中分离5分钟,待溶液澄清后,小心吸取上清至洁净的离心管中,即完成RNA的纯化。
注:建议转移上清时保留少量液体以免吸到磁珠影响后续实验。纯化得到的RNA极易降解,建议尽快进行下一步实验。短时间内不使用时请置于-80℃保存。
参考文献:
1. Ivo Nikolaev Sirakov. From Basic Aspects to Laboratory Tools, IntechOpen. 2016. Chapter 1.
2. Zhao, W., He, X., Hoadley, K.A. et al. BMC Genomics. 2014. 15, 419.
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