| 来源 | 用途 | 交叉反应性 | 理论分子量 | 实际分子量 |
| Rabbit | WB, IHC-P, IF/ICC, ChIP | H, M, R | 11kDa | 11Da |
WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IF, Immunofluorescence; ICC, Immunocytochemistry; IHC-P, Immunohistochemistry-Paraffin; mIHC-P, Multiplex IHC-P; FC, Flow Cytometry; ChIP, Chromatin Immunoprecipitation Assay; ChIP-seq, ChIP-sequencing.
H, Human; M, Mouse; R, Rat; Ar, Arabidopsis; C, Chicken; Cerastium, Ce; Cw, Cow; Dg, Dog; Gp, Guinea pig; Hm, Hamster; Hr, Horse; Mk, Monkey; Ph, Pharbitis; Pg, Pig; Rb, Rabbit; Rc, Rice; S, Sheep; Z, Zebrafish; All, all species expected.
配套提供了Western一抗稀释液，可以用于Western检测或其它适当用途时的一抗稀释。
建议抗体使用时的稀释比例如下(实际使用时需根据抗原水平的高低作适当调整)：
| WB | IP | IF/ICC | IHC-P | mIHC-P | FC | ChIP | ChIP-seq |
| 1:500-1:2000 | - | 1:50-1:200 | 1:100-1:500 | - | - | 1:50-1:100 | - |
抗体详细信息如下:
| About this Antibody | |
| Name | Acetyl-Histone H4 (Lys8) Rabbit Polyclonal Antibody |
| Category | Rabbit Polyclonal Antibody (pAb); Primary antibody; 乙酰化 |
| Isotype | IgG |
| Purification method | Protein A偶联acetylated H4 (Lys8)抗原多肽亲和层析柱纯化 |
| Positive samples | - |
| Cellular location | 细胞核 |
| Customer validation | - |
| About the Immunogen | |
| Immunogen | - |
| Sequence | - |
| Gene ID | 8359 |
| SwissProt | P62805 |
| Synonyms | H4K8ac, 乙酰化 |
| Category | Epigenetics; Protein Acetylation |
| Background | 组蛋白翻译后修饰(PTMs)是表观遗传学调控染色质结构的关键机制，被称为“组蛋白密码”。组蛋白上的PTMs包括乙酰化、甲基化、磷酸化和新的酰化直接影响染色质对转录因子的可及性和其他表观遗传调控，改变基因组的稳定性，基因转录等。组蛋白乙酰化主要发生在核心组蛋白氨基末端的多个赖氨酸残基上，以响应各种刺激，在基因表达调控、DNA损伤修复、染色质动力学等方面发挥重要作用。大多数情况下，组蛋白H2A主要在Lys5、9、15和36位处发生乙酰化修饰。 H2B主要在Lys5、12、15、16和20位处发生乙酰化修饰。组蛋白H3主要在Lys4、9、14、18、23、27、56和79位处发生乙酰化修饰。组蛋白H4主要在Lys5、8、12、16和20位处发生乙酰化修饰。组蛋白乙酰转移酶(HATs)和组蛋白去乙酰化酶(HDACs)是主要的调节因子。 |
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| AG4193 | Acetyl-Histone H4 (Lys8) Rabbit Polyclonal Antibody | 50µl |
| AZ050 | Western一抗稀释液 | 50ml |
| — | 说明书 | 1份 |
Acetyl-Histone H4 (Lys8) Rabbit Polyclonal Antibody -20ºC保存，需避免反复冻融。Western一抗稀释液-20℃或4℃保存，一年有效，Western一抗稀释液优先推荐4℃保存，长期不使用可以考虑-20℃保存，但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。
注意事项：如果本抗体用于Western blot (WB)、免疫荧光(IF)、免疫细胞化学(ICC)等实验，请注意回收使用过的稀释抗体。回收的抗体通常至少可以重复使用5-10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，请4℃保存。
回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10,000×g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。
提供的Western一抗稀释液也可以用于免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)、免疫细胞化学(ICC)等适当用途。如果希望获得最佳的检测效果，请考虑使用上述检测专用的一抗稀释液。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
Fig. 1. Blocking buffer: QuickBlock™ Blocking Buffer (P0231); Detection: BeyoECL Star (P0018A)
一抗稀释度：1:2000
一抗孵育条件：室温2小时
二抗：HRP-labeled Goat Anti-Rabbit IgG(H+L) (A0208) at 1:1000 dilution
免疫原多肽点样量：1 ng, 4 ng, 16 ng
曝光时间：60 s
Lane 1: H4K8ac; Lane 2: H4K5ac; Lane 3: H4K5bu; Lane 4: H4K8bu; Lane 5: H4K8cr; Lane 6: H4K8un
Fig. 2. Blocking buffer: QuickBlock™ Blocking Buffer (P0231); Detection: BeyoECL Star (P0018A)
一抗稀释度：1:2000
一抗孵育条件：室温2小时
二抗：HRP-labeled Goat Anti-Rabbit IgG(H+L) (A0208) at 1:1000 dilution
裂 解 液：(-) HeLa，(+) HeLa+Sodium butyrate (30mM, 4hr)
蛋白上样量：20 μg
曝光时间：60 s
理论分子量：11 kDa
实际分子量：11Da
Fig. 3. 组 织：小鼠结肠
切片类型：甲醛固定&石蜡包埋
修复方式：高温高压
修 复 液：Tris/EDTA (PH 9.0)
一抗稀释度：1:500
一抗孵育条件：室温1小时
二抗：Anti-Rabbit and Mouse Polymer HRP (即用型)
胞核复染：苏木素(蓝色)
结果描述：棕色染色为Acetyl-Histone H4 (Lys8) Rabbit Polyclonal Antibody信号
Fig. 4. 细 胞 系：HeLa
固定方式：4%多聚甲醛
通透方式：0.1% Triton X-100
一抗稀释度：1:200
一抗孵育条件：4度过夜
二抗：Goat Anti-Rabbit IgG
胞核复染：DAPI(蓝色)
复染：Tubulin(红色)
结果描述：绿色染色为Acetyl-Histone H4 (Lys8) Rabbit Polyclonal Antibody信号
Fig. 5. 细 胞 系：HeLa+SBA (5mM, 24h)
交联条件：无交联
单个IP染色质量：5×106细胞
单个IP抗体量：1:100
Beads类型及使用量：50μl Protein A/G MagBeads
注：使用1μg正常兔IgG作为阴性对照。用特异性人RAB20、GAPDH CDS区、RPL30、LDHA、FOXO3a启动子和FOXO3a下游的引物对免疫沉淀DNA进行实时定量PCR。数据表示每个样本相对于输入染色质总量的富集程度。
