碧云天生产的Recombinant 16-Tag Protein (重组16标签蛋白)是通过大肠杆菌表达的带有His、HA、AU1、T7、E、VSV-G、V5、AU5、S、HSV、FLAG、LUMINO、GluGlu、Myc、GST和EGFP共16种常见标签的大小为68.5kD的重组蛋白,可以被16种相应的标签抗体特异性识别,常用作16种标签中的任何一种标签融合表达蛋白的Western blot检测时的阳性对照。
本产品也常被称作多标签重组蛋白或多重标签重组蛋白(Multiple-tag recombinant protein, multi-tag recombinant protein),多标签蛋白、多重标签蛋白或万能标签蛋白(Multiple-tag protein, multi-tag protein,universal tag protein),Western标签蛋白阳性对照、WB标签蛋白阳性对照、Western阳性对照或WB阳性对照(Tag protein positive control for Western blot),标签蛋白标准(Tag protein marker/Tagged protein marker),标签蛋白对照或标签蛋白阳性对照(Tag protein control, Tagged protein control, Tag protein positive control, Tagged protein positive control )等。
本产品带有的标签从N端开始依次为His、HA、AU1、T7、E、VSV-G、V5、AU5、S、HSV、FLAG、LUMINO、GluGlu、Myc、GST以及EGFP。GST与EGFP标签分别含有218和239个氨基酸,可从PubMed等处查询到其对应的蛋白序列,其余各标签的氨基酸序列信息见下表。
标签名称 | 氨基酸序列 |
His | HHHHHH |
HA | YPYDVPDYA |
AU1 | DTYRYI |
T7 | MASMTGGQQMG |
E | GAPVPYPDPLEPR |
VSV-G | YTDIEMNRLGK |
V5 | GKPIPNPLLGLDST |
AU5 | TDFYLK |
S | KETAAAKFERQHMDS |
HSV | SQPELAPEDPED |
FLAG | DYKDDDDK |
LUMINO | CCPGCC |
GluGlu | CEEEEYMPME |
Myc | EQKLISEEDL |
本产品已经配制在SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X)中,浓度约为1ng/μl,室温融化后取约5μl直接上样,最后即可获得比较清晰的Western Blot检测条带。本产品经12% SDS-PAGE电泳后,使用碧云天部分标签抗体的Western Blot检测效果如图1所示。
图1. 本产品使用碧云天7种标签抗体的Western Blot检测结果图。Recombinant 16-Tag Protein上样量均为5μl,电泳结束后采用湿法电转膜,将样品转移至PVDF膜上;封闭后PVDF膜分别采用碧云天生产的一抗产品His-tag抗体(小鼠单抗) (AH367)、HA抗体(小鼠单抗) (AH158)、AU1-tag Mouse Monoclonal Antibody (AF0051)、Flag抗体(小鼠单抗) (AF519)、Myc抗体(小鼠单抗) (AM926)、GST抗体(小鼠单抗) (AG768)与GFP抗体(小鼠单抗) (AG281)于4℃孵育过夜,洗涤后PVDF膜用辣根过氧化物酶标记山羊抗小鼠lgG(H+L)(A0216)孵育1h,一抗与二抗均使用相应稀释液按1:1000稀释后使用;最后发光检测时采用BeyoECL Star (P0018A),曝光时间为10秒。注意:使用不同的一抗、二抗和化学发光试剂,会有不同的检测灵敏度,最佳的上样量须在实际使用时适当调节。
包装清单:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P0059-200μl | Recombinant 16-Tag Protein | 200μl |
— | 说明书 | 1份 |
保存条件:
-20℃保存,一年有效。避免过多的反复冻融,可以适当分装后-20℃保存。如果希望保存更长时间,可以适当分装后-80℃保存。
注意事项:
本产品如果过多地反复冻融,可能导致蛋白降解,从而影响最终的检测效果。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。