碧云天生产的SDS-PAGE上层胶预混液(SDS-PAGE Stacking Gel Master Mix)提供了简单而又超快速地配制SDS-PAGE凝胶(即SDS聚丙烯酰胺凝胶)上层胶所需的主要试剂,包括Tris-HCl (pH6.8)、Acr-Bis(29:1)、SDS等。
碧云天生产的SDS-PAGE上层胶预混液为最常用的5%浓度上层胶,如您需要配制特殊浓度的上层胶,可以考虑单独购买ST003 Acr-Bis(29:1)、ST628 10%SDS和ST768 Tris-HCl (pH6.8)等进行特殊浓度SDS-PAGE凝胶上层胶的配制。
本上层胶预混液已经把SDS-PAGE凝胶上层胶配制所需的Tris-HCl (pH6.8)、Acr-Bis(29:1)、SDS等预混合好,使用前仅需加入适量凝胶聚合催化剂(过硫酸铵或其替代物,如ST005 Ammonium persulfate substitute)和ST728 TEMED即可简单快速地完成上层胶(分离胶)的配制。
本上层胶预混液可以直接配合碧云天不同浓度的SDS-PAGE下层胶预混液使用,轻松超快速完成各种不同浓度SDS-PAGE凝胶的配制。
本产品的250ml包装约可配制50-100块常规大小的SDS-PAGE凝胶的上层胶,500ml包装约可配制100-200块常规大小的SDS-PAGE凝胶的上层胶。具体可以配制的凝胶数量和凝胶的厚薄以及凝胶的大小有关。
包装清单:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P0683-250ml | SDS-PAGE上层胶预混液 | 250ml |
P0683-500ml | SDS-PAGE上层胶预混液 | 500ml |
— | 说明书 | 1份 |
保存条件:
4℃避光保存,一年有效。
注意事项:
进行上层胶配制时,需要另外准备过硫酸铵或其替代物(ST005)以及TEMED (ST728)。
必须在下层胶配制完成后才能进行上层胶的配制。
本产品含有Acr-Bis,对人体有毒,操作时请特别小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
1. 根据目的蛋白的分子量大小选择合适浓度的SDS-PAGE下层胶(即分离胶)。
不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围如下:
SDS-PAGE分离胶浓度 | 最佳分离范围 |
6%胶 | 50-150kD |
8%胶 | 30-90kD |
10%胶 | 20-80kD |
12%胶 | 12-60kD |
15%胶 | 10-40kD |
2. 称取适量过硫酸铵或其替代物,如ST005,用双蒸水或其它高纯度的水配制10%溶液。过硫酸铵或其替代物配成溶液后容易失效,需注意存放及时间限制。
3. 参考下表,在下层胶凝固后,在SDS-PAGE上层胶预混液中,按照1%的比例加入相应量的10%过硫酸铵或其替代物溶液,按照0.1%的比例加入相应量的TEMED。例如10ml SDS-PAGE上层胶预混液中,加入100μl 10%过硫酸铵或其替代物溶液和10μl TEMED,适当混匀。去除下层胶上面覆盖的液体,尽量去干净,然后倒入添加了10%过硫酸铵或其替代物溶液和TEMED的SDS-PAGE上层胶预混液,插入梳子待凝固。上层胶凝固后,则表明制胶步骤结束,可以准备进行后续的电泳了。通常10-30分钟内胶会凝固。注:具体的凝固时间和温度及光照有关,说明书中10%过硫酸铵或其替代物和TEMED的正常推荐用量是室温为25℃时的推荐用量。为达到与25℃时相近的凝固时间,当室温低于25℃时,可以适当同时加大10%过硫酸铵或其替代物和TEMED的用量,例如20℃时建议用量是正常推荐用量的1.5倍,15℃时建议用量是正常推荐用量的2倍。
成分 | 配制不同体积SDS-PAGE上层胶所需各成分的体积(毫升) | |||||
SDS-PAGE上层胶预混液 | 2 | 3 | 4 | 6 | 8 | 10 |
10%过硫酸铵或其替代物 | 0.02 | 0.03 | 0.04 | 0.06 | 0.08 | 0.1 |
TEMED | 0.002 | 0.003 | 0.004 | 0.006 | 0.008 | 0.01 |
4. 配制好的凝胶如果当天不能使用,可以在4℃保存1-2天后使用。
相关产品:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P0012A | SDS-PAGE凝胶配制试剂盒 | 可制30-50块胶 |
P0012AC | SDS-PAGE凝胶快速配制试剂盒 | 可制30-50块胶 |
P0676-250ml | 6% SDS-PAGE下层胶预混液 | 250ml |
P0676-500ml | 6% SDS-PAGE下层胶预混液 | 500ml |
P0678-250ml | 8% SDS-PAGE下层胶预混液 | 250ml |
P0678-500ml | 8% SDS-PAGE下层胶预混液 | 500ml |
P0670-250ml | 10% SDS-PAGE下层胶预混液 | 250ml |
P0670-500ml | 10% SDS-PAGE下层胶预混液 | 500ml |
P0672-250ml | 12% SDS-PAGE下层胶预混液 | 250ml |
P0672-500ml | 12% SDS-PAGE下层胶预混液 | 500ml |
P0675-250ml | 15% SDS-PAGE下层胶预混液 | 250ml |
P0675-500ml | 15% SDS-PAGE下层胶预混液 | 500ml |
P0683-250ml | SDS-PAGE上层胶预混液 | 250ml |
P0683-500ml | SDS-PAGE上层胶预混液 | 500ml |
P0686 | 6% SDS-PAGE凝胶超快速配制试剂盒 | 可制30-50块胶 |
P0688 | 8% SDS-PAGE凝胶超快速配制试剂盒 | 可制30-50块胶 |
P0690 | 10% SDS-PAGE凝胶超快速配制试剂盒 | 可制30-50块胶 |
P0692 | 12% SDS-PAGE凝胶超快速配制试剂盒 | 可制30-50块胶 |
P0695 | 15% SDS-PAGE凝胶超快速配制试剂盒 | 可制30-50块胶 |
ST005 | Ammonium persulfate substitute (APS substitute) | 10g |
ST728 | TEMED | 10ml |