碧云天产品助力科研，CNS文章使用产品大揭秘 (2020年第12期)

碧云天产品助力过继T细胞实体瘤治疗研究！
2020年11月25日，中国药科大学药物科学研究院张灿教授团队在《Science translational medicine》发表了题为 “Combination of metabolic intervention and T cell therapy enhances solid tumor immunotherapy”的研究成果。 该研究建立了新型T细胞表面锚定技术，即模拟跨膜蛋白的特性，利用疏水作用力先将脂质锚定在T细胞膜上，再将脂质与药物脂质体通过点击 反应偶联在T细胞膜上。这种细胞表面锚定技术具有不影响膜蛋白功能、不干预T细胞正常生理功能、温和快速等优势，并可以用于其他细胞的 表面工程化改造。新型工程化T细胞中的阿伐麦布通过“自分泌和旁分泌”的双重作用增加T细胞膜上的胆固醇水平，促进T细胞受体的快速聚集以及增加 T细胞的持久活力，从而提高过继T细胞对实体瘤的治疗效果。研究数据表明，新型鼠源工程化TCR-T（T cell receptor-gene engineered T cells）和人源工程化CAR-T（Chimetic antigen receptor T cells）分别在原位黑色素瘤、肺转移黑色素瘤及原位胶质母细胞瘤小鼠模型中展示出优异的治疗效果。其中，工程化CAR-T细胞在原位胶质母细胞瘤小鼠模型中的完全缓解率达到60%，且生存期延长至100天以上。并且这种联用策略具有较好的体内安全性。该研究为过继T细胞用于实体瘤治疗提供了新策略，也为细胞工程化改造提供了新技术。

在该研究中使用了碧云天高品质乳酸脱氢酶检测试剂盒，用于检测CD8⁺T细胞毒性。

碧云天产品助力自噬调控新机制研究！
2020年12月7日， 中国科学院生物物理研究所张宏课题组在《Developmental Cell》杂志在线发表了题为“Inositol polyphosphate multikinase inhibits liquid-liquid phase separation of TFEB to negatively regulate autophagy activity”的研究成果。研究团队构建了 秀丽隐杆线虫作为研究细胞生物自噬活性调控的模型，通过遗传筛选，研究人员发现ipmk-1（bp1075）突变体中自噬活性显著升高，ipmk-1能够编码线虫中的肌醇多磷酸激酶IPMK，该酶的主要功能是催化产生IP4、IP5等高磷酸肌醇和三磷酸磷脂酰肌醇。敲除IPMK能够显著提高哺乳动物细胞自噬活性。进一步研究发现，IPMK对于自噬活性和溶酶体功能的调控依赖于转录因子TFEB。TFEB蛋白能够在体外发生液-液相分离，IPMK可以与TFEB直接作用从而抑制TFEB的液-液相分离，也可以使形成的TFEB蛋白凝聚体解聚，IMPK在细胞核中起到TFEB分子伴侣的作用，通过调节TFEB凝聚体的形成调控下游基因的转录水平。IPMK缺失可以提高TFEB的转录活性，促进TFEB下游基因的转录， 从而调控溶酶体功能，提高自噬活性。该研究揭示了一种自噬活性调控的新机制，也为研究转录凝聚体的调控机制提供了新思路。

该研究中使用了多种碧云天高品质试剂盒，包括双萤光素酶报告基因检测试剂盒、pGL6-TA (报告基因质粒)、pRL-SV40-N(报告基因质粒)等。

碧云天产品助力O-GlcNAc糖基化生物学功能研究！
2020年11月19日，大连理工大学张嘉宁教授团队与华大基因任艳研究员团队在《Nature communications》发表了题为“ Proteomic profiling and genome-wide mapping of O-GlcNAc chromatin-associated proteins reveal an O-GlcNAc-regulated genotoxic stress response”的研究成果。该研究报道了连接N乙酰葡糖胺（O-GlcNAc）糖基化在肿瘤细胞的基因转录重编程中的重要生物学功能。为了解析O-GlcNAc修饰的生物学功能，研究人员在糖代谢标记技术的基础上，发展了一种基于化学基因组学的多组学联合分析新策略，实现了在全基因组范围内深度剖析O-GlcNAc密码与转录调控的关系。应用该策略，论文对基因毒应激反应前后肿瘤细胞的多组学进行贯通比较分析，发现了基因毒刺激诱导的O-GlcNAc染色质结合位点由增强子向启动子转移的变化规律以及O-GlcNAc密码的转录激活功能。其中O-GlcNAc修饰调控的NRF1转录因子在该转录调控网络中扮演关键角色。O-GlcNAc糖基化激活了该转录因子的染色质结合能力和转录调控功能，这对肿瘤细胞的基因毒耐受表型起到重要影响。该研究首次以多层次组学视角解析肿瘤细胞中O-GlcNAc糖 基化控制复杂基因表达网络中的有序规律，为全面认识肿瘤等重大疾病的发生发展机制研究提供了多组学数据，为新药物靶点的发现提供了理论基础。

该研究中使用了多种碧云天高品质产品，包括Western及IP细胞裂解液、SDS裂解液、增强型CCK-8试剂盒。

碧云天产品助力病毒免疫逃逸新机制研究！
2020年11月26日， 复旦大学基础医学院免疫学系严大鹏团队在《Nature communications》发表了题为“β-arrestin 2 as an activator of cGAS-STING signaling and target of viral immune evasion”的研究成果。发生病毒感染后会激活I型干扰素及其调控的信号通路从而发挥机体免疫作用，IFNβ能够激活JAK-STAT通路，促进TNFα、IL-6等大量炎症因子的表达，启动机体抗病毒免疫反应。研究人员发现β-arrestin 2能够促进IFNβ表达、Ⅰ型干扰素信号通路活化及小鼠的抗病毒免疫。β-arrestin 2与cGAS直接结合并促进cGAS和DNA的结合及cGAMP的产生，而β-arrestin 2在感染中发生的去乙酰化是其发挥抗感染功能的基础。在病毒感染早期，β-arrestin 2迅速发生去乙酰化而活化，发挥其抗感染功能；而在感染晚期，β-arrestin 2却能被病毒诱导，发生泛素化而被降解，帮助病毒实现免疫逃逸。研究团队进一步发现，抗心衰药物Carvedilol能够促进β-arrestin 2的去乙酰化及抑制β-arrestin 2的降解，通过稳定β-arrestin 2调控Ⅰ型干扰素信号通路及小鼠的抗病毒免疫，提示其可作为潜在的抗病毒药物。

在该研究中使用了多种碧云天高品质产品，包括双萤光素酶报告基因检测试剂盒、BCA蛋白浓度测定试剂盒、化学发光法EMSA试剂盒。

碧云天产品助力单细胞成像研究！
2020年12月7日，上海交通大学李茜团队在《Nature Protocols》在线发表题为“Tracking endocytosis and intracellular distribution of spherical nucleic acids with correlative single-cell imaging”的合作研究结果。全面了解纳米颗粒与生物学组分之间的相互作用对于纳米粒子及纳米药物的临床应用至关重要。该研究提供了相关的成像方法，用于研究在单细胞水平上不同聚集态的等离子NP。可追溯的球形核酸（SNA）是通过用荧光团标记的DNA修饰50nm球形金NP制成的。利用暗场显微镜（DFM）和荧光显微镜（FM）进行的原位相关成像揭示了SNA的细胞内分布，而DFM与扫描电子显微镜（SEM）结合可以对溶液中SNA的聚集态进行半定量。成像数据通过ImageJ和用Python编写 的基于比色法的算法进行分析。可以在20 s内有效地区分单个小区中SNA的群集状态。该研究为监测不同聚集状态的等离子NP的实时内吞作用和细胞分布，并定量成像活细胞中的目标靶标（例如特定的DNA，信使RNA，肽或蛋白质）提供了新方法。

在该研究中使用了多种碧云天高品质常用试剂，包括青霉素-链霉素溶液(100X)、4%多聚甲醛固定液、PBS (10X)。

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