碧云天自主研发生产的DpnII，是从大肠杆菌表达纯化获得的一种限制性内切酶，是BfuCI、MboI、Sau3AI、BscFI、Bsp143I、BssMI、BstENII、BstMBI、Kzo9I、NdeII、BstKTI的同裂酶(Isoschizomers)，其基本信息如下：
| 识别序列[1] | 缓冲液兼容性(%) | 酶切温度 | 失活条件 | 甲基化干扰？ | |||||
| ^GATC | 1X B | 1X G | 1X O | 1X R | 1X Y | 2X Y | 37ºC | 65ºC 20min |
有时有干扰 |
| CTAG^ | 0-25 | 0-25 | 100 | 50-100 | 0-25 | 50-100 | |||
*，37ºC孵育3小时未表现星号活性，延长酶切时间(>3小时)可能出现星号活性。
碧云天生产的DpnII酶切DNA双链的效果请参考图1。
图1. 碧云天生产的DpnII (D6266)酶活性检测效果图。图A. 碧云天生产的DpnII (D6266)和国外同类产品(Competitor)的酶活性检测效果对比图。使用本产品或国外N公司的DpnII，在20µl反应体系中加入图中指定量的本产品或国外N公司的DpnII，在1X Buffer O中酶切含15个DpnII位点的pUC18 (D2303) (Dam-)，37ºC孵育1小时进行酶切反应，酶切产物为多个DNA片段，随后65ºC孵育20分钟进行失活，然后电泳并进行核酸染色和荧光成像分析。如图所示，本产品与N公司的产品相比，具有类似的酶切效果。M, DNA marker (DNA Ladder (0.1-12 kb, 12 bands) (D0110))。图B. 分别用从JM110菌株(Dam-)和DH5α菌株(Dam+)中提取400ng的pBR322 DNA (D2301)，在20μl酶切体系中，分别加入或不加入0.63U的DpnII，37ºC酶切1小时，然后电泳分析。图中可见从JM110菌株中提取得到的非甲基化质粒可以被DpnII完全消化，而对于从DH5α菌株中提取得到的甲基化质粒没有任何非特异性的酶切作用。M, DNA marker (DNA Ladder (0.1-10 kb, 21 bands) (D0107))。实际检测效果会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。
酶储存液组成为：10mM Tris-HCl (pH7.4 at 25ºC), 300mM NaCl, 1mM DTT, 0.1mM EDTA, 500μg/ml BSA and 50% Glycerol.
1X Buffer O组成为：50mM Tris-HCl (pH7.5 at 37ºC), 10mM MgCl2, 100mM NaCl, 0.1mg/ml BSA.
酶切和连接效率：50倍过量的本内切酶消化1小时，>95%被酶切的片段可以被连接并被重新酶切(Recut)。
活性单位定义：One unit is defined as the amount of DpnII required to digest 1µg of λDNA (Dam-) in 1 hour at 37ºC in a total reaction volume of 50µl.
包装清单：| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D6266S-1 | DpnII (10U/µl) | 50μl |
| D6010O-200µl | 10X Buffer O | 200μl |
| - | 说明书 | 1份 |
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D6266M-1 | DpnII (10U/µl) | 200µl |
| D6010O-800µl | 10X Buffer O | 800µl |
| - | 说明书 | 1份 |
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D6266L-1 | DpnII (10U/µl) | 1ml |
| D6010O-4ml | 10X Buffer O | 4ml |
| - | 说明书 | 1份 |
-20ºC保存，至少两年有效。
注意事项：内切酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20ºC保存。
超纯水推荐选购BeyoPure™ Ultrapure Water (DNase/RNase-Free, Sterile) (ST876)。
如果发现预期的酶切位点不能切开，请确认是否存在甲基化干扰问题。Dam甲基化与酶切位点的序列完全重叠会阻断酶切，EcoBI甲基化可能与酶切位点的重叠组合会阻断酶切。
同裂酶对于不同的甲基化修饰可能具有不同敏感性，遇到可能存在甲基化干扰问题时，可以尝试同裂酶。
MboI和Sau3AI是DpnII的完全同裂酶。
特别注意：甘油含量大于5%，低盐浓度，pH>8.0或酶超量(约20倍以上)可能会导致星号活性，即产生非特异性酶切。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
| Reagent | Volume |
| DNA Substrate | xµl (≤1µg) |
| Ultrapure water | (18-x-y)µl |
| 10X Buffer O | 2µl |
| DpnII | yµl (0.5-1µl) |
| Total volume | 20µl |
| Incubate at 37ºC for 1h, 2-6h or overnight | |
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D6049 | ApaI | 2000U |
| D6050S/M/L/XL | AscI | 400U/2kU/10kU/50kU |
| D6052S/M/L | AvrII | 200U/1kU/5kU |
| D6053 | BamHI | 2000U |
| D6055S/M/L/XL | BamHI | 10/40/200/800kU |
| D6093 | BglII | 500U |
| D6095S/M/L/XL | BglII | 2/10/40/200kU |
| D6128S/M/L/XL | BsaI | 1/5/20/200kU |
| D6132S/M/L/XL | BspQI | 400U/2kU/10kU/40kU |
| D6133S/M/L | Nt.BspQI | 500U/2kU/10kU |
| D6176S/M/L | Cfr9I | 2/10/40kU |
| D6257S/M/L/XL | DpnI | 500U/2.5KU/10KU/50KU |
| D6258 | DpnI | 2500U |
| D6266S/M/L | DpnII | 500U/2kU/10kU |
| D6272S/M/L | DraI | 4/20/100kU |
| D6292S/M/L/XL | EarI | 400U/2kU/10kU/40kU |
| D6329 | EcoRI | 2000U |
| D6330 | EcoRI | 5000U |
| D6333S/M/L/XL | EcoRI | 10/40/200/800kU |
| D6337 | EcoRV | 1500U |
| D6339S/M/L/XL | EcoRV | 4/20/100/400kU |
| D6369S/M/L/XL | HhaI | 1/5/20/100kU |
| D6389 | HindIII | 2000U |
| D6390 | HindIII | 5000U |
| D6392S/M/L/XL | HindIII | 10/40/200/1000kU |
| D6403S/M/L | HpaII | 1/5/20kU |
| D6417 | KpnI | 1000U |
| D6418S/M | KpnI | 4/20kU |
| D6436S/M/L | MboI | 200U/1kU/5kU |
| D6449 | MluI | 1000U |
| D6468S/M/L/XL | MseI | 400U/2kU/10kU/40kU |
| D6470S/M/L/XL | MspI | 4/20/100/500kU |
| D6481 | NcoI | 200U |
| D6482S/M/L/XL | NcoI | 800U/4kU/20kU/100kU |
| D6485 | NdeI | 400U |
| D6486S/M/L | NdeI | 4/20/100kU |
| D6489 | NheI | 200U |
| D6490S/M/L/XL | NheI | 800U/4kU/20kU/100kU |
| D6497 | NotI | 150U |
| D6498S/M/L/XL | NotI | 1/4/20/100kU |
| D6538S/M/L | PleI | 500U/2kU/10kU |
| D6542S/M/L/XL | PmeI | 800U/4kU/20kU/100kU |
| D6565 | PstI | 1000U |
| D6566 | PstI | 3000U |
| D6568S/M/L | PstI | 4/20/100kU |
| D6581 | PvuII | 1000U |
| D6585 | RsaI | 200U |
| D6590S/M/L/XL | SapI | 400U/2kU/10kU/40kU |
| D6593 | SacI | 500U |
| D6597 | SalI | 1000U |
| D6598S/M/L/XL | SalI | 2/10/40/200kU |
| D6607S/M/L/XL | ScaI | 2/10/40/200kU |
| D6633 | SmaI | 500U |
| D6635S/M/L/XL | SmaI | 2/10/40/200kU |
| D6652S/M/L | SphI | 500U/2kU/10kU |
| D6713 | XbaI | 1500U |
| D6715S/M/L | XbaI | 10/40/200kU |
| D6718S/M/L/XL | XcmI | 1/4/20/100kU |
| D6721 | XhoI | 2000U |
| D6723S/M/L/XL | XhoI | 2/10/40/200kU |
| D6730S/M/L | XmaI | 2/10/40kU |
| D6847-50μl | SgeI | 50μl |
