pUC18是一种由pBR322改造而来的质粒载体,全长2686bp,含有lacZ蛋白N端的部分编码序列,在多克隆位点(Multiple cloning site, MCS)插入外源序列后可以通过蓝白斑筛选阳性克隆。在质粒的多克隆位点上下游含有M13正向和反向引物结合位点,以便于对插入的DNA片段进行常规测序。本质粒为氨苄青霉素抗性。
pUC18质粒的主要信息如下:
Feature Nucleotide | Position |
lacZ | 146-469 |
M13 forward primer binding site | 379-395 |
Multiple cloning site | 399-455 |
M13 reverse primer binding site | 465-481 |
lac operator | 489-505 |
lac promoter | 513-543 |
ori | 867-1455 |
Ampicillin resistance ORF | 1626-2486 |
Ampicillin promoter | 2487-2591 |
pUC18质粒(2686bp)的图谱如下:
pUC18的多克隆位点的详细图谱见说明书:https://www.beyotime.com/Manual/D2303 pUC18.pdf
pUC18中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pUC18)包括:
AfeI | AflII | AgeI | AleI | ApaI | AscI | AsiSI |
AvrII | BaeI | BbsI | BbvCI | BclI | BglII | BlpI |
BmgBI | BmtI | Bpu10I | BsaAI | BsaBI | BseRI | BsgI |
BsiWI | BsmFI | BsmI | BspDI | BspEI | BsrGI | BssHII |
BstBI | BstEII | BstXI | BstZ17I | Bsu36I | BtgI | BtgZI |
ClaI | CspCI | DraIII | EagI | EcoNI | EcoRV | FseI |
HpaI | MfeI | MluI | MscI | NaeI | NcoI | NgoMIV |
NheI | NotI | NruI | NsiI | PacI | PaeR7I | PflFI |
PflMI | PmeI | PmlI | PpuMI | PshAI | PsiI | PspOMI |
PspXI | RsrII | SacII | SexAI | SfiI | SgrAI | SnaBI |
SpeI | SrfI | StuI | StyI | SwaI | Tth111I | XcmI |
XhoI |
pUC18中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pUC18 once)包括:
NdeI | CA`TA,TG | 184 | Eco53kI | GAG|CTC | 446 |
BstAPI | GCAN,NNN`NTGC | 185 | BanII | G,RGCY`C | 448 |
KasI | G`GCGC,C | 235 | SacI | G,AGCT`C | 448 |
NarI | GG`CG,CC | 236 | EcoRI | G`AATT,C | 450 |
SfoI | GGC|GCC | 237 | ApoI | R`AATT,Y | 450 |
PluTI | G,GCGC`C | 239 | BsaXI | ,NNN`(N)9AC(N)5CTCC(N)7,NNN` | 651 |
HindIII | A`AGCT,T | 399 | SapI | GCTCTTCN`NNN, | 690 |
BspMI | ACCTGCNNNN`NNNN, | 404 | BspQI | GCTCTTCN`NNN, | 690 |
BfuAI | ACCTGCNNNN`NNNN, | 404 | AflIII | A`CRYG,T | 806 |
SphI | G,CATG`C | 409 | PciI | A`CATG,T | 806 |
PstI | C,TGCA`G | 415 | BseYI | C`CCAG,C | 1110 |
SbfI | CC,TGCA`GG | 415 | AlwNI | CAG,NNN`CTG | 1222 |
SalI | G`TCGA,C | 417 | AhdI | GACNN,N`NNGTC | 1699 |
AccI | GT`MK,AC | 418 | BsaI | GGTCTCN`NNNN, | 1760 |
HincII | GTY|RAC | 419 | BpmI | CTGGAG(N)14,NN` | 1769 |
XbaI | T`CTAG,A | 423 | BsrFI | R`CCGG,Y | 1779 |
BamHI | G`GATC,C | 429 | NmeAIII | GCCGAG(N)19,NN` | 1848 |
AvaI | C`YCGR,G | 434 | ScaI | AGT|ACT | 2179 |
TspMI | C`CCGG,G | 434 | BcgI | ,NN`(N)10CGA(N)6TGC(N)10,NN` | 2204 |
BsoBI | C`YCGR,G | 434 | XmnI | GAANN|NNTTC | 2298 |
XmaI | C`CCGG,G | 434 | SspI | AAT|ATT | 2503 |
SmaI | CCC|GGG | 436 | ZraI | GAC|GTC | 2619 |
Acc65I | G`GTAC,C | 438 | AatII | G,ACGT`C | 2621 |
KpnI | G,GTAC`C | 442 | EcoO109I | RG`GNC,CY | 2675 |
pUC18质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
M13 forward primer (379-395): 5´-GTAAAACGACGGCCAGT-3´
M13 reverse primer (465-481): 5´-CAGGAAACAGCTATGAC-3´
pUC18的全序列信息:D2303 pUC18 全序列.txt
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D2303-1µg | pUC18 | 1μg |
D2303-100µg | pUC18 | 100μg |
— | 说明书 | 1份 |
-20℃保存。
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