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适配所有血清型的AAV纯化试剂盒来啦

为什么选择AAV?

AAV感染细胞后通常不会与基因组DNA重组,但可以长期稳定地表达目的蛋白,特别是可以在很多不分裂的细胞中长期稳定表达。AAV还具有滴度高,体内注射不产生明显的免疫反应,对于增殖和非增殖细胞感染效率高等优点。

AAV的纯化方法有哪些?

获得高纯度的病毒是稳定感染的前提,常见的获得AAV的方法包括密度梯度超速离心法和色谱纯化法等。密度梯度超速离心法通常存在回收效率低、成本高、处理时间长、操作复杂、样品损失大等缺点;色谱纯化法则需要大量的血清型特异性优化,成本较高,极大限制了高活性、高纯度AAV的制备。

如果有一款这样的试剂盒,你心动嘛?

碧云天推出AAV Purification Kit Mini For All Serotypes(全血清型腺相关病毒小量纯化试剂盒),可在6小时内实现从约30ml细胞和培养上清液中获得高活性、高纯度、高回收率的腺相关病毒。与传统的密度梯度超速离心法和色谱纯化法相比,不仅避免了反复冻融和超声破碎等繁琐耗时的操作,同时也极大保留了AAV的生物学活性

  产品特点

  产品效果

图1.使用碧云天生产的AAV Purification Kit Mini For All Serotypes(C2906)纯化的AAV9-CRE-GFP的SDS-PAGE电泳效果图。

  常见问题分析

1、纯化后病毒得率较低:
a.切勿使用经过反复冻融后的病毒液进行纯化,这会严重影响病毒的得率。
b.包装后过早收集病毒,病毒产量较低。建议包装后3-5天进行病毒收集。
c.病毒总体积小于或等于30ml时,请使用0.5ml的超滤管;病毒总体积为90-120ml时,请使用15ml的超滤管,以减少吸附损失。

2、纯化后病毒纯度较低:
a.本产品的纯化对象中禁止含有血清,建议包装病毒时使用不含血清的培养基,或至少在纯化前一天更换为无血清培养基或OptiPRO™ SFM。如果培养液中含有血清,则在纯化时应去除上清,但会导致病毒得率下降。
b.细胞沉淀和培养上清液使用量过多,导致纯化不完全。请按照说明书推荐用量进行纯化。

  产品信息

产品编号 产品名称 包装 产品价格
C2906S AAV Purification Kit Mini for All Serotypes 5次
C2906M AAV Purification Kit Mini for All Serotypes 20次

本试剂盒适用于小量AAV病毒的纯化,如果需要制备更大量的AAV,推荐选购碧云天的AAV Purification Kit Midi for All Serotypes (C2908)

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