为什么选择AAV?
AAV感染细胞后通常不会与基因组DNA重组,但可以长期稳定地表达目的蛋白,特别是可以在很多不分裂的细胞中长期稳定表达。AAV还具有滴度高,体内注射不产生明显的免疫反应,对于增殖和非增殖细胞感染效率高等优点。
AAV的纯化方法有哪些?
获得高纯度的病毒是稳定感染的前提,常见的获得AAV的方法包括密度梯度超速离心法和色谱纯化法等。密度梯度超速离心法通常存在回收效率低、成本高、处理时间长、操作复杂、样品损失大等缺点;色谱纯化法则需要大量的血清型特异性优化,成本较高,极大限制了高活性、高纯度AAV的制备。
如果有一款这样的试剂盒,你心动嘛?
碧云天推出AAV Purification Kit Mini For All Serotypes(全血清型腺相关病毒小量纯化试剂盒),可在6小时内实现从约30ml细胞和培养上清液中获得高活性、高纯度、高回收率的腺相关病毒。与传统的密度梯度超速离心法和色谱纯化法相比,不仅避免了反复冻融和超声破碎等繁琐耗时的操作,同时也极大保留了AAV的生物学活性。
产品特点
- 浓缩效率高,纯化效果好:有效去除细胞碎片及基因组DNA的污染,病毒浓度可提高10-100倍,同时保留了生物活性,具有优秀的感染效果;
- 操作简单,纯化时间短:无需使用超高速离心机,在6小时内即可完成纯化,可直接用于后续的病毒感染及AAV基因表达效果的检测和评估;
- 组分齐全、使用便捷:包含提取AAV所需的除氯仿以外的全套试剂,用户可直接使用或只需简单混合即可使用;
- 适用范围广:AAV目前发现主要有12种血清型(AAV1-AAV12),本试剂盒均适用。
产品效果
常见问题分析
1、纯化后病毒得率较低:
a.切勿使用经过反复冻融后的病毒液进行纯化,这会严重影响病毒的得率。
b.包装后过早收集病毒,病毒产量较低。建议包装后3-5天进行病毒收集。
c.病毒总体积小于或等于30ml时,请使用0.5ml的超滤管;病毒总体积为90-120ml时,请使用15ml的超滤管,以减少吸附损失。
2、纯化后病毒纯度较低:
a.本产品的纯化对象中禁止含有血清,建议包装病毒时使用不含血清的培养基,或至少在纯化前一天更换为无血清培养基或OptiPRO™ SFM。如果培养液中含有血清,则在纯化时应去除上清,但会导致病毒得率下降。
b.细胞沉淀和培养上清液使用量过多,导致纯化不完全。请按照说明书推荐用量进行纯化。
产品信息
本试剂盒适用于小量AAV病毒的纯化,如果需要制备更大量的AAV,推荐选购碧云天的AAV Purification Kit Midi for All Serotypes (C2908)。
相关产品
产品编号 |
产品名称 |
包装 |
产品价格 |
C2901S |
通用型病毒浓缩试剂盒 |
150ml |
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C2901M |
通用型病毒浓缩试剂盒 |
600ml |
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C2901L |
通用型病毒浓缩试剂盒 |
3L |
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C2908S |
AAV Purification Kit Midi for All Serotypes |
5次 |
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C2908M |
AAV Purification Kit Midi for All Serotypes |
20次 |
|
C3013-250μl |
AAV-mCherry-GFP-LC3B (AAV9, 10^13vp/ml) |
250μl |
|
C4107-250μl |
AAV-CAG-GFP (AAV9, 10^13vp/ml) |
250μl |
|
C4108-250μl |
AAV-CAG-Cre-GFP (AAV9, 10^13vp/ml) |
250μl |
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FCD150 |
BeyoGold™ 150mm细胞培养皿 |
5个/袋,12袋/箱 |
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FFLK176 |
BeyoGold™ 175cm2透气盖细胞培养瓶 |
5个/包,40个/箱 |
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FSCP023 |
BeyoGold™ 23cm细胞刮(独立纸塑包装, 无菌) |
100个/盒 |
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FSCP029 |
BeyoGold™ 29cm细胞刮(独立纸塑包装, 无菌) |
100个/盒 |
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FUF058-5pcs |
超滤管(0.5ml, 100kDa MWCO, PES, Sartorius分装) |
5个 |
|
FUF058-25pcs |
超滤管(0.5ml, 100kDa MWCO, PES, Sartorius分装) |
25个 |
|
FUF058-100pcs |
超滤管(0.5ml, 100kDa MWCO, PES, Sartorius分装) |
100个 |
|
FUF158-2pcs |
超滤管(15ml, 100kDa MWCO, PES, Sartorius分装) |
2个 |
|
FUF158-12pcs |
超滤管(15ml, 100kDa MWCO, PES, Sartorius分装) |
12个 |
|
FUF158-48pcs |
超滤管(15ml, 100kDa MWCO, PES, Sartorius分装) |
48个 |
|
ST876-100ml |
BeyoPure™ Ultrapure Water (DNase/RNase-Free, Sterile) |
100ml |
|
ST876-500ml |
BeyoPure™ Ultrapure Water (DNase/RNase-Free, Sterile) |
500ml |
|
C0508 |
磷酸钙法细胞转染试剂盒 |
>200次 |
|
C0511 |
DEAE-Dextran细胞转染试剂盒 |
>200次 |
|
C0518-1ml |
Lipo293F™转染试剂 |
1ml |
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C0518-10ml |
Lipo293F™转染试剂 |
10ml |
|
C0518-100ml |
Lipo293F™转染试剂 |
100ml |
|
C0519-1ml |
Lipo293F™ Plus转染试剂 |
1ml |
|
C0519-10ml |
Lipo293F™ Plus转染试剂 |
10ml |
|
C0519-100ml |
Lipo293F™ Plus转染试剂 |
100ml |
|
C0521-0.5ml |
Lipo293™转染试剂 |
0.5ml |
|
C0521-1.5ml |
Lipo293™转染试剂 |
1.5ml |
|
C0521-7.5ml |
Lipo293™转染试剂 |
7.5ml |
|
C0522-0.5ml |
Lipo293™ Plus转染试剂 |
0.5ml |
|
C0522-1.5ml |
Lipo293™ Plus转染试剂 |
1.5ml |
|
C0522-7.5ml |
Lipo293™ Plus转染试剂 |
7.5ml |
|
C0526-0.5ml |
Lipo6000™转染试剂 |
0.5ml |
|
C0526-1.5ml |
Lipo6000™转染试剂 |
1.5ml |
|
C0526-7.5ml |
Lipo6000™转染试剂 |
7.5ml |
|
C0533-0.5ml |
Lipo8000™转染试剂 |
0.5ml |
|
C0533-1.5ml |
Lipo8000™转染试剂 |
1.5ml |
|
C0533-7.5ml |
Lipo8000™转染试剂 |
7.5ml |
|
C0535-0.5ml |
LipoRNAi™转染试剂 |
0.5ml |
|
C0535-1.5ml |
LipoRNAi™转染试剂 |
1.5ml |
|
C0535-7.5ml |
LipoRNAi™转染试剂 |
7.5ml |
|
C0541-1ml |
BeyoPEI™转染试剂 |
1ml |
|
C0541-10ml |
BeyoPEI™转染试剂 |
10ml |
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C0541-100ml |
BeyoPEI™转染试剂 |
1100ml |
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C0551-0.5ml |
LipoInsect™转染试剂 |
0.5ml |
|
C0551-1.5ml |
LipoInsect™转染试剂 |
1.5ml |
|
C0551-7.5ml |
LipoInsect™转染试剂 |
7.5ml |
|
C0563S |
植物原生质体转染试剂盒 |
100次 |
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C0563M |
植物原生质体转染试剂盒 |
500次 |
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