碧云天生产的Lipo293F™ Plus转染试剂(Lipo293F™ Plus Transfection Reagent)是一种非常高效的基于改良的阳离子脂质体的新型转染试剂,专门适用于悬浮培养的HEK293细胞,如Freestyle™ 293-F等,进行质粒转染和重组蛋白大量表达。本产品与Thermo公司的293fectin™ Transfection Reagent和Merck公司的293-Free™ Transfection Reagent的用途和使用效果基本一致或更佳,与Thermo公司的FreeStyle™ MAX Reagent相比,用于悬浮培养的293细胞时效果基本一致或略佳。
Lipo293F™ Plus转染试剂对Expi293F™或Freestyle™ 293-F细胞的转染效率非常高(约90%),同时具有细胞毒性极低、重复性好、操作简单、转染后无需更换培养液等突出优点。悬浮培养293系列细胞转染试剂的比较和选择请参考:http://www.beyotime.com/support/lipo293F.htm。
Lipo293F™ Plus转染试剂也同样适用于293系列贴壁细胞的转染,但转染293系列贴壁细胞时,推荐使用性价比更高的Lipo293™ Plus转染试剂(C0522)或Lipo293™转染试剂(C0521)。
Lipo293F™ Plus转染试剂兼容性好,细胞转染可允许血清和抗生素存在的情况下进行,无需Opti-MEM®或无血清培养液。
Lipo293F™ Plus转染试剂转染细胞目的蛋白表达质粒后,通常在48-72小时后达到比较理想的蛋白表达水平。
Lipo293F™ Plus转染试剂的转染效率可以通过转染表达EGFP等荧光蛋白的质粒进行快速鉴定。
Lipo293F™ Plus转染试剂为化学合成,因此不含动物源成分(Animal origin-free, AOF)。
Lipo293F™ Plus转染试剂转染Expi293F™细胞效果请参考图1。
图1.碧云天Lipo293F™ Plus转染试剂(C0519)转染Expi293F™细胞的效果图。如图所示,Lipo293F™ Plus转染试剂与同类转染试剂(Competitor)转染表达EGFP的质粒至Expi293F™细胞,转染48小时后,Expi293F™细胞的荧光照片。实际结果会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异,图中效果仅供参考。
按照DNA用量(μg)和Lipo293F™ Plus转染试剂(μl)的比例为1:2使用,每毫升Lipo293F™ Plus转染试剂可以转染500μg质粒。
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
C0519-1ml | Lipo293F™ Plus转染试剂 | 1ml |
C0519-10ml | Lipo293F™ Plus转染试剂 | 10ml |
C0519-100ml | Lipo293F™ Plus转染试剂 | 100ml |
- | 说明书 | 1份 |
4ºC保存,两年有效。长期不使用可以-20ºC保存。
注意事项:使用高纯度的DNA有助于获得较高的转染效率。对于质粒,可以使用碧云天生产的质粒大量抽提试剂盒(D0026)进行抽提,以保证可以获得较高的转染效率。
转染前细胞必须处于良好的生长状态。
虽然本转染试剂可允许血清和抗生素存在的情况下进行细胞转染,但使用无血清或低浓度血清(如5%或以下)、无抗生素的培养液或Opti-MEM®,转染效率可能会更好。
Lipo293F™转染试剂不能vortex或离心,可以用移液器轻轻吹打混匀或缓慢摇动混匀。
本转染试剂使用后请立即盖好盖子,避免长时间暴露在空气中,影响转染效率。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
转染体系体积 | 10ml | 20ml | 50ml | 100ml | 200ml | 500ml |
细胞培养液 | 0.5ml | 1ml | 2.5ml | 5ml | 10ml | 25ml |
DNA | 10μg | 20μg | 50μg | 100μg | 200μg | 500μg |
细胞培养液 | 0.5ml | 1ml | 2.5ml | 5ml | 10ml | 25ml |
Lipo293F™ Plus转染试剂 | 20μl | 40μl | 100μl | 200μl | 400μl | 1ml |
将配制好的Lipo293F™ Plus转染试剂稀释液加入到配制好的DNA稀释液中,室温孵10-20分钟 随后加入到培养的悬浮细胞中继续培养24-96小时,后续进行目的蛋白的检测和纯化。 |
Multiple Well Plates or Dishes | Single Well Only for Plates | |||||
Diameter (Bottom, mm)* | Growth Area (cm2)* | Average Cell Yield | Total Well Volume (ml) | Working Volume (ml) | Recommended Volume (ml) | |
6 well | 34.8 | 9.5 | 9.5 × 105 | 16.8 | 1.9-2.9 | 2 |
12 well | 22.1 | 3.8 | 3.8 × 105 | 6.9 | 0.76-1.14 | 1 |
24 well | 15.6 | 1.9 | 1.9 × 105 | 3.4 | 0.38-0.57 | 0.5 |
48 well | 11.0 | 0.95 | 9.5 × 104 | 1.6 | 0.19-0.285 | 0.25 |
96 well | 6.4 | 0.32 | 3.2 × 104 | 0.36 | 0.10-0.20 | 0.1 |
384 well | 2.7 | 0.056 | 5.6 × 103 | 0.112 | 0.025-0.050 | 0.030 |
1536 well | 1.63 × 1.63** | 0.025 | 2.5 × 103 | 0.0125 | 0.005-0.010 | 0.010 |
3.5cm dish | 34 | 9 | 9.0 × 105 | NA | 1.8-2.7 | 2 |
6cm dish | 52 | 21 | 2.1 × 106 | NA | 4.2-6.3 | 5 |
10cm dish | 8.4 | 55 | 5.5 × 106 | NA | 11-16.5 | 12 |
15cm dish | 14 | 152 | 1.5 × 107 | NA | 30.4-45.6 | 35 |
24.5cm dish | 22.4 × 22.4** | 500 | 5.0 × 107 | NA | 100-150 | 120 |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
C0508 | 磷酸钙法细胞转染试剂盒 | >200次 |
C0511 | DEAE-Dextran细胞转染试剂盒 | >200次 |
C0518-1ml | Lipo293F™转染试剂 | 1ml |
C0518-10ml | Lipo293F™转染试剂 | 10ml |
C0518-100ml | Lipo293F™转染试剂 | 100ml |
C0519-1ml | Lipo293F™ Plus转染试剂 | 1ml |
C0519-10ml | Lipo293F™ Plus转染试剂 | 10ml |
C0519-100ml | Lipo293F™ Plus转染试剂 | 100ml |
C0521-0.5ml | Lipo293™转染试剂 | 0.5ml |
C0521-1.5ml | Lipo293™转染试剂 | 1.5ml |
C0521-7.5ml | Lipo293™转染试剂 | 5×1.5ml |
C0522-0.5ml | Lipo293™ Plus转染试剂 | 0.5ml |
C0522-1.5ml | Lipo293™ Plus转染试剂 | 1.5ml |
C0522-7.5ml | Lipo293™ Plus转染试剂 | 5×1.5ml |
C0526-0.5ml | Lipo6000™转染试剂 | 0.5ml |
C0526-1.5ml | Lipo6000™转染试剂 | 1.5ml |
C0526-7.5ml | Lipo6000™转染试剂 | 5×1.5ml |
C0533-0.5ml | Lipo8000™转染试剂 | 0.5ml |
C0533-1.5ml | Lipo8000™转染试剂 | 1.5ml |
C0533-7.5ml | Lipo8000™转染试剂 | 5×1.5ml |
C0541-1ml | BeyoPEI™转染试剂 | 1ml |
C0541-10ml | BeyoPEI™转染试剂 | 10ml |
C0541-100ml | BeyoPEI™转染试剂 | 100ml |
C0551-0.5ml | LipoInsect™转染试剂 | 0.5ml |
C0551-1.5ml | LipoInsect™转染试剂 | 1.5ml |
C0551-7.5ml | LipoInsect™转染试剂 | 5×1.5ml |