化学信息：
| 化学名 | (E)-N-[4-(3-chloro-4-fluoroanilino)-7-methoxyquinazolin-6-yl]-4-piperidin-1-ylbut-2-enamide |
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| 简称 | Dacomitinib | |
| 别名 |
PF299804, UNII-2XJX250C20, PF299 |
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| 中文名 | 达克替尼 | |
| 化学式 | C24H25ClFN5O2 | |
| 分子量 | 469.94 | |
| CAS号 | 1110813-31-4 | |
| 纯度 | 98% | |
| 溶剂/溶解度 |
Water<1mg/ml; DMSO19mg/ml; Ethanol<1mg/ml |
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| 溶液配制 | 5mg加入1.06ml DMSO，或者每4.7mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SF5373-10mM用DMSO配制。 |
生物信息：
| 产品描述 | Dacomitinib (PF299804, PF299)是一种有效的，不可逆的泛ErbB抑制剂，最有效作用于EGFR，无细胞试验中IC50为6nM，高效作用于携带EGFR或ERBB2突变型(耐Gefitinib)和携带EGFR T790M突变型的NSCLCs。Phase 2。 | ||||
| 信号通路 | Protein Tyrosine Kinase; Angiogenesis; JAK/STAT | ||||
| 靶点 | EGFR | ErbB2 | ErbB4 | － | － |
| IC50 | 6.0nM | 45.7nM | 73.7nM | － | － |
| 体外研究 | PF299804是ERBB家族激酶的特异性抑制剂。PF299804抑制EGFR信号传导，并诱导包含EGFR T790M的H3255 GR细胞系凋亡。PF299804能够有效作用于对gefitinib-敏感的和耐药的NSCLC细胞系。PF299804抑制表达T790M突变体的H3255和HCC827细胞的生长。T790M突变体存在下，PF299804抑制EGFR磷酸化。通过在ATP位点的结合，以及ERBB家族成员的催化域中亲核性半胱氨酸残基的共价修饰，PF-299804能够不可逆抑制ERBB酪氨酸激酶活性。PF299804在HER2-扩增的胃癌细胞(SNU216, N87)中表现出显著的生长抑制作用，并且与其他EGFR酪氨酸激酶抑制剂，包括gefitinib、lapatinib、BIBW-2992和CI-1033相比，PF299804具有低50%的抑制浓度值。在HER2-扩增的胃癌细胞，PF299804诱导细胞凋亡和G1期阻滞，并抑制HER家族和下游信号通路，包括STAT3、AKT和细胞外信号调节激酶(ERK)中受体磷酸化。PF299804也会阻断SNU216细胞中EGFR/HER2、HER2/HER3和HER3/HER4异质二聚体形成，以及HER3与p85α的结合。一项最近的研究使用47种人乳腺癌和永生的乳腺上皮细胞系，以评估PF299804的抑制作用，结果表明，相对于非扩增细胞系(RR=3.39, p<0.0001)，PF299804优先抑制HER-2-扩增的乳腺癌细胞系的生长。在大多数敏感细胞系中，PF299804降低HER2、EGFR、HER4、AKT和ERK的磷酸化作用。PF299804通过G0/G1期阻滞，并诱导细胞凋亡发挥其抗增殖作用。 | ||||
| 体内研究 | PF299804口服给药有效抑制HCC827 Del/T790M异种移植物的生长。PF-299804(15mg/kg)低剂量口服给药引起显著的抗肿瘤活性，包括在各种人肿瘤异种移植模型中引起显著的肿瘤退化，如表达和/或过表达ERBB家族成员，或与耐gefitinib和erlotinib相关的含有双重突变(L858R/T790M)的ERBB1(EGFR)异种移植模型。 | ||||
| 临床实验 | N/A | ||||
| 特征 | N/A | ||||
相关实验数据(此数据来自于公开文献，碧云天并不保证其有效性)：
| 酶活性检测实验 | |
| 方法 | ERBB1，ERBB 2和ERBB4细胞质融合蛋白通过使用PCR将ERBB1序列(Met-668到Ala-1211)，ERBB2(Ile-675到Val-1256)和ERBB4序列(Gly-259)复制到杆状病毒载体制备。蛋白质在杆状病毒感染的Sf9昆虫细胞中以GST融合蛋白表达。蛋白质使用谷胱甘肽琼脂糖磁珠通过亲和色谱法纯化。ERBB酪氨酸激酶活性的抑制使用基于ELISA受体的酪氨酸激酶试验评估。激酶反应(每50μl反应混合物包含50mM HEPES，pH 7.4，125mM NaCl，10mM MgCl2，100μM原矾酸钠，2mM二硫苏糖醇，20μM ATP，PF299804或载体对照和1-5nM GST-erbB)在0.25mg/ml poly-Glu-Tyr包被的96孔板上进行。反应在室温下摇晃培育6分钟。除去反应混合物停止反应，然后用洗涤缓冲液(0.1% Tween 20的PBS溶液)清洗孔。耦合到辣根过氧化物酶(HRP)的0.2μg/ml抗磷酸酪氨酸抗体(致癌基因Ab-4；50μl/well)，在包含3% BSA和0.05% Tween 20的PBS中稀释，将其加入后，在室温下摇晃25分钟，以检测磷酸化的酪氨酸残基。将抗体移除，板在洗涤缓冲液中清洗。将HRP底物(SureBlue3,3￠,5,5￠-四甲基联苯胺或TMB)加入(50μl/孔)，并在室温下摇晃培育10-20分钟。TMB反应通过加入50μl停止溶液(0.09N H2SO4)停止。信号通过测量450nM下的吸光度定量。使用中值效应法测定PF299804的IC50值。 |
| 细胞实验 | |
| 细胞系 | 各种NSCLC细胞系 |
| 浓度 | 0-20nM |
| 处理时间 | 72小时 |
| 方法 | 生长和生长抑制通过5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑(MTS)法测定。该试验中，比色法测定活细胞数量是基于细胞对MTS的生物还原，以形成可溶于细胞培养基的甲臜产物，通过分光光度法检测。将细胞暴露处理72小时，每个实验使用的细胞数量根据经验测定。所有实验点在6到12个孔中建立，并且所有实验至少重复3次。这些数据使用GraphPad Prism 3.00版的Windows (GraphPad软件)直观显示。曲线使用非线性回归模型通过S形剂量反应曲线拟合。 |
| 动物实验 | |
| 动物模型 | HCC827-GFP或HCC827-Del/T790M肺癌细胞(在0.2ml PBS中)皮下移植到裸鼠右下方四分之一侧腹。 |
| 配制 | PF299804以10mM在-20℃下溶解于DMSO |
| 剂量 | 10mg/kg |
| 给药方式 | 口服强饲给药 |
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| SF5373-10mM | Dacomitinib (EGFR抑制剂) | 10mM×0.2ml |
| SF5373-5mg | Dacomitinib (EGFR抑制剂) | 5mg |
| SF5373-25mg | Dacomitinib (EGFR抑制剂) | 25mg |
| — | 说明书 | 1份 |
保存条件：
-20℃保存，至少一年有效。5mg和25mg包装也可室温保存，至少6个月有效。如果溶于非DMSO溶剂，建议分装后-80℃保存，预计6个月内有效。
