碧云天的AllProtect™动物组织核酸、蛋白稳定保存液(AllProtect™ Nucleic Acid and Protein Stabilization Reagent for Animal Tissue) ,简称AllProtect™试剂或AllProtect™,是一种用于采集动物组织时,仅需室温操作,即可迅速稳定和保存组织中核酸和蛋白的无毒无害液态试剂。本产品广泛用于新鲜动物组织样品或细胞样品中RNA、DNA和蛋白的稳定与保存。
本产品使用范围广。本产品能够用于各种动物组织样品中RNA、DNA和蛋白的稳定和保存,如肝脏、脑、肺、脾脏、肾脏、心脏、肌肉、骨组织等,也可用于某些植物样品的保存。AllProtect™试剂用于样品蛋白的稳定和保存时不会导致蛋白变性,后续可进行Western Blot、SDS-PAGE、酶活力测定等全部常规蛋白实验。样品取出后可直接匀浆并按照常规方法进行组织裂解和蛋白抽提。
本产品的效果和液氮冻存的效果一致。本产品可以迅速渗透到组织内部,完全抑制RNase、DNase和蛋白酶(Proteinase),
避免RNA、DNA和蛋白降解,从而保持组织样品中RNA、DNA和蛋白的完整性,并且和液氮一样可以长期保存样品中的RNA、DNA和蛋白。
本产品安全便捷。本产品无任何毒性和刺激性,可在室温使用,确保了使用时的安全和便捷。和使用液氮相比,可以有效避免因使用超低温的液氮而引起的冻伤、离心管爆裂等安全隐患,并且携带、运输非常方便。
本产品适合普通新鲜组织样品中RNA、DNA和蛋白的稳定和保存,更加适合样品收集后不能够立即进行RNA(包括miRNA等小RNA)、DNA或蛋白抽提的情况,特别适用于野外或临床采集的样品、大批量采集的动物组织样品和不能立即冻存样品的稳定与保存。
在本产品中样品的保存时间和存储温度相关,例如37℃可保存1-2天,室温可保存一周,4℃可以保存6个月,-20℃或更低温度可以长期保存。具体如下表所示:
存储温度 | 37℃ | 25℃ | 4℃ | -20或-80℃ |
保存时间 | 1-2天 | 1周 | 6个月 | 长期 |
本产品在25℃浸泡保存小鼠肝组织7天后的效果如图1和图2所示。图中分别对比了RNA、基因组DNA和总蛋白抽提后,得率、完整性、酶活性等的检测结果。图中实验结果表明,AllProtect™对于样品中RNA、DNA和蛋白保护作用与液氮冻存无显著差异。
图1.小鼠肝组织在不同保存条件下的RNA、DNA的抽提效果对比。各组样品均约10mg,25℃分别用PBS和AllProtect™保存,或者液氮冻存,7天后分别使用碧云天的RNAeasy™动物RNA抽提试剂盒(离心柱式)(R0026)和基因组DNA小量抽提试剂盒(离心柱式)(D0063)进行RNA和DNA抽提。A.各组抽提获得RNA量的柱状图。B.抽提获得的RNA样品的电泳图,各组均上样2μl洗脱下来的RNA样品(除PBS组外,每组约1.0μg RNA),并用1.2%甲醛变性琼脂糖凝胶进行电泳检测。本图中使用的是DNA marker。C. 各组抽提获得DNA量的柱状图。D.抽提获得的DNA样品电泳图,各组均上样2μl洗脱下来的DNA样品(除PBS组外,每组约300ng DNA),并用1.0%琼脂糖凝胶进行电泳检测。 图2.小鼠肝组织在不同保存条件下的总蛋白抽提效果对比。各组样品均约10mg,25℃分别用PBS和AllProtect™保存,或者液氮冻存,7天后分别使用碧云天的Western及IP细胞裂解液(P0013)进行总蛋白抽提。A. 各组抽提获得的蛋白总量柱状图。B. 抽提获得的蛋白样品SDS-PAGE电泳后的考马斯亮蓝染色图,各组按照约30μg蛋白上样(PBS组除外),并利用12% SDS-PAGE凝胶进行电泳和染色检测。C. Western blot检测各组β-Actin和Histone H3的表达情况。D. 利用半乳糖/半乳糖氧化酶检测试剂盒测得的半乳糖氧化酶活力柱状图。本产品保存的组织样品能够与大多数RNA、DNA和蛋白抽提的方法相兼容,特别适用于碧云天的RNAeasy™RNA抽提试剂盒(离心柱式)、基因组DNA抽提试剂盒(离心柱式)和蛋白抽提方法(详见后附的相关产品)。使用时直接将样品从AllProtect™试剂中取出,去除附着的溶液,少量的残留不会影响后续抽提效果。
一个包装的R0121-25ml可以用于约25个重量为100mg样品的保存;一个包装的R0121-100ml可以用于约100个重量为100mg样品的保存。
包装清单:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
R0121-25ml | AllProtect™动物组织核酸、蛋白稳定保存液 | 25ml |
R0121-100ml | AllProtect™动物组织核酸、蛋白稳定保存液 | 100ml |
— | 说明书 | 1份 |
保存条件:
室温或4℃密封保存,一年有效。
注意事项:
本产品可以用移液器吸取,但由于本产品的粘稠度与甘油相近,请用剪刀适当剪去枪头的尖端部分后再进行吸取。
本产品存放在蓝色包装瓶中,为方便使用还赠送了一个按压泵。按压泵第一次使用时须左右转动进行解锁。按压头下有一个保护卡扣。不取出卡扣,旋转卡扣使其开口处至按压嘴的背面,此时充分按压每次大约能流出近0.2ml液体;旋转卡扣使其开口处至按压嘴的同侧,此时按压每次大约能流出0.6ml;取出卡扣后,按压泵每次充分按压一次可以约流出1.5ml液体。
本产品每次使用后应当拧紧瓶盖或锁住按压泵,保证本产品的密闭保存,以免影响使用效果。
本产品若置于低于室温的条件保存,试剂粘度会增加,需平衡至室温(约25℃)后再使用。
实验中获得的组织样品适当处理大小后,应迅速并完全浸泡在AllProtect™试剂中。
本试剂只可用于新鲜动物组织样品中RNA、DNA和蛋白的稳定与保存,不可用于已冻存过的样品。冻存过的样品由于融解过程缓慢,会导致AllProtect™试剂很难快速浸润到组织内部以阻止核酸和蛋白的降解。
用本产品保存后,样品可能会变得微硬,为正常现象,不会影响后续RNA、DNA或蛋白抽提时组织的匀浆、裂解等操作。
样品如果需要在-20℃或-80℃长期保存,应在4℃保存过夜或更长时间后才能再转移至-20℃或-80℃保存,以保证
AllProtect™试剂更加充分有效地完全浸入组织内部。
AllProtect™试剂保存的样品置于-20℃或-80℃保存后,应先解冻并平衡至室温后再进行取样。AllProtect™保护的样品尽量减少反复冻融的次数,以免发生降解。通常用于蛋白分析时(特别如酶活性分析),冻融次数不应超过5次;用于RNA和DNA分析时,冻融次数可增加到15次。本产品本身通常不会影响酶活性,但对于反复冻融非常敏感的一些酶,本产品并不能缓解反复冻融对于这些酶活性的抑制作用。
用于植物样品保存时,应当去除表面蜡质,确保AllProtect™试剂能充分进入组织内部。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
1. 对于组织样品:
a. 保存:将组织剪切成长宽高均不大于0.5厘米的组织块,迅速完全浸泡于5-10倍体积AllProtect™试剂中(例如100mg组织需约0.5-1ml AllProtect™试剂),此时室温可以保存一周,4℃可以保存6个月,4℃至少保存过夜后可以在-20℃或-80℃保存3-5年。组织块过大时,AllProtect™试剂会出现不易充分渗透到组织中心处的问题,导致未充分渗透处核酸和蛋白出现一定程度的降解。
b. RNA、DNA或蛋白抽提时样品的处理:用洁净的镊子将组织块从AllProtect™试剂中取出,纸巾吸除表面残液,液氮冷冻并研磨成粉末后进行RNA、DNA或蛋白的抽提操作,或根据后续用途的具体要求不经液氮冷冻和研磨直接进行RNA、DNA或蛋白的抽提操作。
相关产品:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D0063 | 基因组DNA小量抽提试剂盒(离心柱式) | 50次 |
P0013 | Western及IP细胞裂解液 | 100ml |
R0011 | Beyozol (总RNA抽提试剂) | 100ml |
R0016 | Trizol (总RNA抽提试剂) | 100ml |
R0021 | DEPC水(DNase、RNase free) | 100ml |
R0022 | DEPC水(DNase、RNase free) | 500ml |
R0024 | RNAeasy™动物RNA抽提试剂盒(离心柱式) | 12次 |
R0026 | RNAeasy™动物RNA抽提试剂盒(离心柱式) | 50次 |
R0027 | RNAeasy™动物RNA抽提试剂盒(离心柱式) | 200次 |
R0028 | RNAeasy™动物小RNA抽提试剂盒(离心柱式) | 50次 |
R0032 | RNAeasy™ Plus动物RNA抽提试剂盒(离心柱式) | 50次 |
R0035 | BeyoMag™磁珠法动物总RNA抽提试剂盒 | 50次 |
R0118 | RNALater™动物组织RNA稳定保存液 | 100ml |
R0121-25ml | AllProtect™动物组织核酸、蛋白稳定保存液 | 25ml |
R0121-100ml | AllProtect™动物组织核酸、蛋白稳定保存液 | 100ml |
R0123 | RNase and DNase Away | 250ml |
ST036 | DEPC | 10g |