pET-N-His-TEV是一种用于表达N端含有His标签(His tag)的原核表达质粒。本质粒N端His标签后含有TEV酶切位点，可通过TEV Protease (P2307/P2308)切除N端的His标签。本质粒为卡那霉素抗性。
本质粒含有T7启动子/lac操纵子，可以在异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的诱导下高效启动目的蛋白表达。在多克隆位点的前面，带有一个His标签的编码序列，含有6个组氨酸(6X His)。因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达N端含有His标签的目的蛋白。
本载体在N端His标签与多克隆位点之间含有TEV蛋白酶(TEV Protease)识别的七肽序列ENLYFQG，对应的核酸序列为GAGAACCTGTACTTCCAAGGG，因此可在目的蛋白纯化后用TEV蛋白酶切除N端His标签。TEV蛋白酶酶切发生在七肽序列的Q和G之间，因此在酶切去除His标签的时候目的蛋白的N端会留下一个额外的氨基酸残基G。
通常可以采用如BeyoGold™ His-tag Purification Resin (P2210/P2218/P2220)或His标签蛋白纯化试剂盒(P2226)等纯化本质粒表达的目的蛋白，也可以使用His-tag抗体(AH367)检测和少量地分离纯化目的蛋白。
pET-N-His-TEV质粒的主要信息如下：
| Feature Nucleotide | Position |
| f1 origin | 12-467 |
| Kanamycin resistance ORF | 563-1645 |
| PBR 322 origin | 2084 |
| LacI coding sequence | 3518-4597 |
| T7 promoter | 4988-5004 |
| His tag coding sequence | 5079-5096 |
| TEV Protease recogniton site sequence | 5097-5117 |
| Multiple cloning site(BamHI-XhoI) | 5118-5165 |
| T7 Terminator | 5251-5297 |
pET-N-His-TEV质粒(5304bp)的图谱如下：
pET-N-His-TEV质粒的详细图谱见说明书：https://www.beyotime.com/Manual/D2905 pET-N-His-TEV.pdf。
pET-N-His-TEV中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pET-N-His-TEV)包括：
| AatII | Acc65I | AflII | AgeI | AhdI | AleI | AscI |
| AvrII | BaeI | BbvCI | BfuAI | BmgBI | BmtI | BsaI |
| BseRI | BsiWI | BspMI | BsrGI | BstBI | Bsu36I | CspCI |
| DraI | EagI | Eco53kI | FseI | KpnI | MfeI | MscI |
| NcoI | NheI | NotI | PacI | PmeI | PmlI | PspXI |
| RsrII | SacI | SacII | SbfI | ScaI | SexAI | SfiI |
| SnaBI | SpeI | SrfI | StuI | SwaI | ZraI |
pET-N-His-TEV中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pET-N-His-TEV once)包括：
| DraIII | CAC,NNN`GTG | 242 | BssHII | G`CGCG,C | 3831 |
| PsiI | TTA|TAA | 370 | ApaI | G,GGCC`C | 4035 |
| PvuI | CG,AT`CG | 943 | PspOMI | G`GGCC,C | 4035 |
| AsiSI | GCG,AT`CGC | 943 | NmeAIII | GCCGAG(N)19,NN` | 4041 |
| TspMI | C`CCGG,G | 1067 | BstEII | G`GTNAC,C | 4060 |
| XmaI | C`CCGG,G | 1067 | MluI | A`CGCG,T | 4242 |
| SmaI | CCC|GGG | 1069 | BstAPI | GCAN,NNN`NTGC | 4563 |
| NruI | TCG|CGA | 1286 | SphI | G,CATG`C | 4771 |
| AcuI | CTGAAG(N)14,NN` | 1597 | SgrAI | CR`CCGG,YG | 4923 |
| AlwNI | CAG,NNN`CTG | 1729 | SgrAI | CR`CCGG,YG | 4923 |
| BssSI | C`ACGA,G | 1968 | XbaI | T`CTAG,A | 5034 |
| PciI | A`CATG,T | 2141 | NdeI | CA`TA,TG | 5074 |
| SapI | GCTCTTCN`NNN, | 2258 | BamHI | G`GATC,C | 5118 |
| BspQI | GCTCTTCN`NNN, | 2258 | HindIII | A`AGCT,T | 5124 |
| BstZ17I | GTA|TAC | 2374 | PstI | C,TGCA`G | 5130 |
| Tth111I | GACN`N,NGTC | 2399 | EcoRI | G`AATT,C | 5136 |
| PflFI | GACN`N,NGTC | 2399 | EcoRV | GAT|ATC | 5144 |
| PpuMI | RG`GWC,CY | 3136 | SalI | G`TCGA,C | 5148 |
| FspI | TGC|GCA | 3164 | BglII | A`GATC,T | 5154 |
| BglI | GCCN,NNN`NGGC | 3182 | XhoI | C`TCGA,G | 5160 |
| PshAI | GACNN|NNGTC | 3401 | PaeR7I | C`TCGA,G | 5160 |
| HpaI | GTT|AAC | 3740 | BlpI | GC`TNA,GC | 5221 |
pET-N-His-TEV质粒中推荐使用的测序引物序列如下：
T7 primer (4988-5004): 5′-TAATACGACTCACTATA-3′
pET-R primer (5218-5237): 5′-TGCTAGTTATTGCTCAGCGG-3′
pET-N-His-TEV的全序列信息：D2905 pET-N-His-TEV.docx。
不同原核表达质粒的比较和选择，以及标签、蛋白酶切位点和蛋白共表达的考虑可以参考如下网页：
http://www.beyotime.com/support/prokaryotic-plasmids.htm
包装清单：
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D2905-1μg | pET-N-His-TEV | 1μg |
| D2905-100μg | pET-N-His-TEV | 100μg |
| — | 说明书 | 1份 |
保存条件：
-20℃保存。
注意事项：
本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：
1. 首次使用1μg包装的本产品时，请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2. 100μg包装的本产品质粒浓度为0.1μg/μl，共1ml。可以直接用于酶切或者转染细胞。
3. pET-N-His-TEV质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因，构建的质粒可以用常规方法转入表达菌株。
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