碧云天生产的BL21(DE3)pLysS甘油菌,是收集生长在对数期的BL21(DE3)pLysS菌,加入含有甘油的细菌冻存液制备而成。可以直接划平板或小量、大量培养。本菌株适用于T7启动子(T7 promoter)调控目的基因表达的pET系列等原核表达质粒,特别适合于影响细菌生存和活力的外源毒性蛋白的IPTG诱导表达。
BL21缺失细胞质中的Lon蛋白酶(Lon protease)和胞外膜上的OmpT蛋白酶(OmpT protease),能有效避免重组表达蛋白的降解,所以被广泛用作外源蛋白的表达菌株。
BL21(DE3)是BL21被λ噬菌体DE3溶原化(lysogenization)的衍生菌株,在lacUV5启动子控制下可表达噬菌体T7 RNA聚合酶(相关基因序列已经整合到细菌染色体中)。IPTG可以诱导BL21(DE3)菌株中T7 RNA聚合酶的高表达,因此BL21(DE3)菌株适合受T7启动子(T7 promoter)调控的目的基因通过IPTG诱导表达。常见的pET系列原核表达载体中目的基因的表达都是受T7启动子调控的,因此都适合用BL21(DE3)作为宿主菌。
BL21(DE3)pLysS菌株携带pLysS质粒,具有氯霉素抗性,可以表达能降解T7 RNA聚合酶的T7溶菌酶(T7 lysozyme),从而可以抑制T7 RNA聚合酶在目的蛋白被IPTG诱导前的本底表达,即导致本底性的外源重组蛋白的表达被有效抑制。因此本菌株特别适合于影响细胞生存和活力的外源毒性蛋白的表达。
BL21(DE3)pLysS菌株基因型:F- ompT hsdSB (rB- mB- ) gal dcm (DE3) pLysS (CamR)
BL21(DE3)pLysS菌株核酸酶表达水平较高,在利用其进行被转化质粒提取时,为充分避免核酸酶的影响,可使用碧云天生产的质粒小量抽提试剂盒(通用型) (D0007S或D0007M)、质粒中量抽提试剂盒(通用型) (D0020)或质粒大量抽提试剂盒(通用型) (D0028)进行质粒抽提。
本菌株可以使用常规的LB培养基或SOC培养基进行培养。
关于碧云天不同甘油菌菌种的比较和选择,可参考我们的相关网页:http://www.beyotime.com/support/strain.htm
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D0339 | BL21(DE3)pLysS甘油菌(低本底蛋白诱导表达用) | 200μl |
— | 说明书 | 1份 |
-20℃保存,至少3个月有效。-80℃可以长期保存。
注意事项:使用本甘油菌时可以不必完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用,但随着冻融次数的增加细菌的活力会逐渐下降。在没有结冻的情况下,菌体会逐渐沉淀至管底,请务必注意适当混匀后使用。
为保证菌种纯正,避免其它细菌污染,尽量先划平板然后再挑单克隆菌落进行后续操作。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D0332 | 2-T1甘油菌 | 200µl |
D0337 | BL21(DE3)甘油菌(蛋白诱导表达菌株) | 200µl |
D0339 | BL21(DE3)pLysS甘油菌(低本底蛋白诱导表达用) | 200µl |
D0346 | DH10Bac甘油菌(重组Bacmid制备用菌株) | 200µl |
D0351 | DH5α甘油菌(常规质粒构建和扩增用菌株) | 200µl |
D0360 | JM109甘油菌(常规质粒构建和扩增用菌株) | 200µl |
D0361 | JM110甘油菌(Dam和Dcm甲基化缺陷菌株) | 200µl |
D0371 | Rosetta(DE3)甘油菌(密码子兼容的蛋白诱导表达) | 200µl |
D0378 | Stbl3甘油菌(慢病毒等逆转录病毒载体扩增用) | 200µl |
D0389 | TG1甘油菌(快速生长菌株) | 200µl |
D0390 | TOP10甘油菌 | 200µl |
D0391 | 细菌冻存液 | 50ml |
D0301 | 一步法感受态细菌制备试剂盒 | 200次 |
D0302 | 超级感受态细菌制备试剂盒 | 100次 |