化学信息：
| 化学名 | 5-methyl-2-(2-propan-2-ylphenyl)-N-[[4-(triazol-1-yl)phenyl]methyl]pyrimidin-4-amine |
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| 简称 | DBeq | |
| 别名 |
N2,N4-dibenzylquinazoline-2,4-diamine, N,N'-dibenzylquinazoline-2,4-diamine, 2-N,4-N-dibenzylquinazoline-2,4-diamine |
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| 中文名 | N/A | |
| 化学式 | C22H20N4 | |
| 分子量 | 340.42 | |
| CAS号 | 177355-84-9 | |
| 纯度 | 98% | |
| 溶剂/溶解度 |
Water<1mg/ml; DMSO68mg/ml; Ethanol5mg/ml |
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| 溶液配制 | 5mg加入1.47ml DMSO，或者每3.4mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SG0006-10mM用DMSO配制。 |
生物信息：
| 产品描述 | DBeQ是一种选择性的，有效的，可逆的，ATP竞争性的p97抑制剂，IC50为1.5μM。 | ||||
| 信号通路 | Ubiquitin | ||||
| 靶点 | p97 | － | － | － | － |
| IC50 | 1.5μM | － | － | － | － |
| 体外研究 | DBeQ作用于HeLa细胞，抑制UbG76V-GFP、ODD-Luc和Luc-ODC降解，IC50分别为2.6μM、56μM和45μM。DBeQ作用于N-ethylmaleimide-敏感因子(NSF)和26S蛋白酶，效果至少低50倍。DBeQ与ATP竞争性抑制P97，Ki为3.2μM，说明DBeQ结合到D2域的活性位点。DBeQ(10μM)作用于HEK293细胞，有效抑制TCRα-GFP降解。DBeQ作用于HEK293细胞，3小时内诱导CHOP，但不增加p21水平，这种作用存在浓度依赖性。DBeQ(15μM)作用于Hela细胞，诱导LC3-II在在细胞核及浓缩膜和胞质级组分中大量积累。DBeQ作用于HeLa细胞，通过抑制LC3-II自噬降解，而不是诱导自噬，而发挥作用。DBeQ(10μM)作用于HeLa细胞，快速促进caspases-3和-7激活。比激活外在caspase-8通路，DBeQ更有效激活内在caspase-9凋亡途径，而STS激活两种途径程度相似。DBeQ作用于多发性骨髓瘤细胞(RPMI8226)比作用于正常人胚肺成纤维细胞(MRC5)效果强5倍，HeLa细胞和Hek293细胞具有中等的敏感性。在ERAD和自噬途径内，DBeQ干扰底物降解。DBeQ(12μM)作用于HeLa细胞中。抑制细胞中和，这种作用存在剂量依赖性。DBeQ(10μM)完全抑制病毒和抗体的降解，但不抑制IgG Fc的降解。DBeQ作用于U20S细胞，降低基本的和营养刺激的MTOR靶点磷酸化，与Rapamycin 效果类似。 | ||||
| 体内研究 | N/A | ||||
| 临床实验 | N/A | ||||
| 特征 | DBeQ快速有效地诱导caspase激活和细胞死亡。 | ||||
相关实验数据(此数据来自于公开文献，碧云天并不保证其有效性)：
| 酶活性检测实验 | |
| 方法 | 实验Buffer [20μl 2.5×浓度，1×=50mM Tris (pH 7.4)，20mM MgCl2，1mM EDTA和0.5mM tris(2-carboxyethyl)phosphine (TCEP)]加到96孔板中。纯化的p97(25μl 50μM)975μl 1×实验 Buffer中稀释，然后每孔中加入10μl。每孔加入DBeQ(10μl)或5% DMSO(10μl)，实验板在室温下温育10分钟。按如下进行ATP酶实验：每孔加入10μl 500μM ATP (pH 7.5)，在室温下温育60分钟，然后加入50μl Kinase Glo Plus试剂,随后在室温下黑暗环境中温育10分钟。使用 Analyst AD读取发光值。在一个浓度范围(0、0.048、0.24、1.2、6和30μM)按一式三份测定DBeQ。 |
| 细胞实验 | |
| 细胞系 | MRC-5，Hek293，HeLa和RPMI8226细胞 |
| 浓度 | 33μM |
| 处理时间 | 48小时 |
| 方法 | 细胞按每孔5000个接种于384孔白色固体板中。使用荧光素酶siRNA或p97siRNA(10nM)进行细胞转染48小时，或在指定时间使用DBeQ处理。每孔加入Caspase-3/7 Glo，caspase-6 Glo，caspase-8 Glo或caspase-9，按500rpm震荡混合1分钟。在室温下温育1小时后，测定发光信号。使用CellTiter-Glo试剂测定细胞存活力。为了测定细胞活力的IC50，使用七种浓度的MG132或DBeQ(开始于μM的三倍连续稀释液)处理细胞48小时。拟合发光信号归一化DMSO处理细胞的百分比，计算IC50值。 |
| 动物实验 | |
| 动物模型 | N/A |
| 配制 | N/A |
| 剂量 | N/A |
| 给药方式 | N/A |
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| SG0006-10mM | DBeq (p97抑制剂) | 10mM×0.2ml |
| SG0006-5mg | DBeq (p97抑制剂) | 5mg |
| SG0006-25mg | DBeq (p97抑制剂) | 25mg |
| — | 说明书 | 1份 |
保存条件：
-20℃保存，至少一年有效。5mg和25mg包装也可室温保存，至少6个月有效。如果溶于非DMSO溶剂，建议分装后-80℃保存，预计6个月内有效。
