化学信息：
| 化学名 | 6-[2-[[4-(2,4-dichlorophenyl)-5-(5-methyl-1H-imidazol-2-yl)pyrimidin-2-yl]amino]ethylamino]pyridine-3-carbonitrile,hydrochloride |
|
| 简称 | CHIR-99021 HCl | |
| 别名 |
Chir 99021 hcl, Chir-99021 hcl, Chir99021 hcl, CT 99021 hcl, CT-99021 hcl, CT99021 hcl |
|
| 中文名 | N/A | |
| 化学式 | C22H18Cl2N8.HCl | |
| 分子量 | 501.8 | |
| CAS号 | 252917-06-9 (free base) | |
| 纯度 | 98% | |
| 溶剂/溶解度 |
Water<1mg/ml; DMSO93mg/ml; Ethanol2mg/ml |
|
| 溶液配制 | 5mg加入1.0ml DMSO，或者每5.02mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SF2703-10mM用DMSO配制。 |
生物信息：
| 产品描述 | CHIR-99021 (CT99021) HCl是CHIR-99021的盐酸盐，是一种GSK-3α/β抑制剂，在无细胞试验中IC50为10nM/6.7nM，可用于区分GSK-3和其最接近的同源物Cdc2与ERK2。 | ||||
| 信号通路 | PI3K/Akt/mTOR; Stem Cells & Wnt | ||||
| 靶点 | GSK-3β | GSK-3α | Tie-2 | FLT1 | KDR |
| IC50 | 6.7nM | 10nM | >5μM | >5μM | >5μM |
| 体外研究 | CHIR-99021作用于GSK-3比作用于其最接近的同系物CDC2和ERK2，及其他蛋白激酶选择性高500倍。此外，CHIR-99021只与一组22种药理相关的受体微弱结合，且对一组23种非激酶的酶几乎没有抑制活性。CHIR-99021作用于表达胰岛素受体的CHO-IR细胞，诱导糖原合成酶(GS)激活，EC50为0.763μM。CHIR-99021(3μM)作用于3T3-L1前脂肪细胞，除了模拟胰岛素的作用，抑制GSK-3，使胞内游离β-catenin增加1.9倍，模仿经典Wnt信号通路。在分化的前3天，CHIR-99021处理，抑制脂肪细胞分化，IC50为0.3μM，通过抑制CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的诱导作用。不像LiCl和AR-A014418，CHIR-99021处理，即使在高浓度，不会降低INS-1E细胞活力。相反，CHIR-99021增加INS-1E细胞增殖，这种作用具有剂量依赖性，且显著抑制高糖和高棕榈酸诱导的INS-E细胞死亡，这种作用具有浓度依赖性。CHIR-99021浓度低至1μM，处理离体大鼠胰岛，促进β细胞复制，5μM CHIR-99021处理，使细胞复制增长2-3倍。 | ||||
| 体内研究 | CHIR-99021按30mg/kg剂量口服处理患2型糖尿病的啮齿类动物模型，增强葡萄糖代谢，处理3-4小时后，最大血浆葡萄糖减少近150mg/dl，而血浆胰岛素保持或低于对照水平。CHIR-99021按16或48mg/kg剂量口服给药ZDF大鼠，1小时后，再口服葡萄糖，显著改善糖耐量，16mg/kg和48mg/kg处理组的血浆葡萄糖分别减少14%和33%，较高剂量CHIR-99021处理，再口服葡萄糖，还可以降低高血糖。CHIR-99021处理移植小鼠或人造血干细胞(HSC)的受体小鼠，显著增强造血重建功能，说明GSK-3是一种特异性的HSC活性调节剂。 | ||||
| 临床实验 | N/A | ||||
| 特征 | N/A | ||||
相关实验数据(此数据来自于公开文献，碧云天并不保证其有效性)：
| 酶活性检测实验 | |
| 方法 | 聚丙烯96孔板中每孔充满了含27nM GSK-3α或29nM GSK-3β和0.5μM生物素-CREB 肽底物的300μl缓冲液(50mM Tris HCl，10mM MgCl2，1mM EGTA，1mM二硫苏糖醇，25mM β-glycerophosphate，1mM NaF，0.01% BSA，pH 7.5)。各种浓度CHIR-99021加入3.5μl DMSO中，随后加入50μl ATP储存液，使所有无细胞实验中ATP终浓度为1μM。温育后，100μl等分试样按一式三份转移至每孔含100μl 50μM ATP和20mM EDTA的Combiplate 8孔板中。1小时后，使用用PBS将孔洗涤5次，填充200μl闪烁液，密封，放置30分钟后，然后在闪烁计数器中计数。所有步骤在室温下进行。 |
| 细胞实验 | |
| 细胞系 | INS-1E |
| 浓度 | 溶于DMSO，终浓度为20μM |
| 处理时间 | 1或4天 |
| 方法 | 细胞在饥饿培养基(只含5mM葡萄糖，1%胎牛血清)中维持24小时。然后使用不同浓度的CHIR-99021处理细胞的1天或4天。通过使用CyQuant染料进行细胞DNA染色，测量细胞数，当结合DNA就会发出荧光。温育30分钟后，使用FLUOstar Optima酶标仪测量荧光。通过BrdUrd掺入法测定细胞复制。最后4小时，BrdUrd标记溶液加入到培养基中，然后使用FixDenat溶液固定细胞，与单克隆anti-BrdUrd-POD抗体温育。每孔加入底物溶液后，在微孔板发光检测仪上使用Analyst HT检测系统测量光发射。 |
| 动物实验 | |
| 动物模型 | 雌性db/db小鼠或雄性2型糖尿病ZDF大鼠 |
| 配制 | 在20mM柠檬酸盐缓冲的15% Captisol中配制成溶液，或在0.5%羧甲基纤维素中配制成悬浮液 |
| 剂量 | ~48mg/kg |
| 给药方式 | 口服处理 |
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| SF2703-10mM | CHIR-99021 HCl (GSK-3抑制剂) | 10mM×0.2ml |
| SF2703-5mg | CHIR-99021 HCl (GSK-3抑制剂) | 5mg |
| SF2703-25mg | CHIR-99021 HCl (GSK-3抑制剂) | 25mg |
| — | 说明书 | 1份 |
保存条件：
-20℃保存，至少一年有效。5mg和25mg包装也可室温保存，至少6个月有效。如果溶于非DMSO溶剂，建议分装后-80℃保存，预计6个月内有效。
