pET-N-His-Avi是碧云天自行研发的用于在大肠杆菌(E.coli)中表达可被生物素标记的目的蛋白的原核表达质粒。该质粒在多克隆位点(Multiple cloning sites, MCS)之前含有His标签(His tag)和Avi标签(Avi tag)，目的蛋白表达后在ATP、生物素(Biotin)以及生物素连接酶(Biotin ligase) BirA存在的体外条件下，BirA催化生物素共价结合到目的蛋白N端的Avi标签上，从而对目的蛋白进行生物素标记。本质粒为卡那霉素(Kanamycin)抗性。

Avi标签是由15个氨基酸(GLNDIFEAQKIEWHE)组成的短肽标签，在ATP和生物素存在的条件下，BirA可以在Avi标签的赖氨酸残基上连接一个生物素，从而实现目的蛋白的生物素标记[1]。

生物素连接酶BirA特异性生物素标记Avi-tag有多方面的优点。Avi标签小且对融合蛋白的影响非常小，只针对Avi标签上的Lys残基进行特定位置的生物素标记，生物素标记效率高，可重复性好；体内或体外均可进行标记，标记后的蛋白与链霉亲和素(Streptavidin)的亲和力高，从而使Avi-tag技术可以应用于目的蛋白的固定吸附、纯化和检测等；相比于传统生物素化学标记的非特异性位点的标记，BirA催化的反应条件更温和，对被标记蛋白活力影响小，酶活效率高，标记特异性强[1]。

本质粒表达的目的蛋白可以采用如BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐还原螯合型) (P2210/P2218/P2220)、His标签蛋白纯化试剂盒(耐还原螯合型) (P2226)以及BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐变性剂型) (P2233)、His标签蛋白纯化试剂盒(耐变性剂型) (P2229S)等进行纯化。

pET-N-His-Avi质粒的主要信息如下：

pET-N-His-Avi质粒(5354bp)的图谱如下：

pET-N-His-Avi表达基因的详细图谱见说明书：https://www.beyotime.com/Manual/D3002 pET-N-His-Avi (Avi标签原核表达质粒).pdf。

pET-N-His-Avi中没有的酶切位点包括：

pET-N-His-Avi中的单酶切位点包括：

pET-N-His-Avi质粒中推荐使用的测序引物序列如下： T7-R (4984-5003): 5'-CCCTATAGTGAGTCGTATTA-3'

pET-N-His-Avi的全序列信息：D3002 pET-N-His-Avi (Avi标签原核表达质粒)全序列.txt

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本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。