TMB显色终止液(450nm, 不含硫酸),即Stop Solution for TMB Substrate (450nm, Sulfuric acid free ),是一种主要用于ELISA等实验中TMB显色反应终止的比较安全的不含硫酸的即用型酸性溶液。加入本产品后,TMB显色反应会被终止,并且原来的蓝色溶液会并转变成在450nm处有较强光吸收的黄色溶液,最终在450nm测定吸光度并且可以使检测灵敏度比检测蓝色吸光度提高1倍左右。
本产品相对比较安全。2M硫酸是最常用的TMB显示终止液,但由于其腐蚀性极强而有较大的安全隐患。本产品不含硫酸,使用了相对更加安全的适当中强酸,可以有效避免硫酸的强腐蚀性可能对人体造成的伤害。需要注意的是本产品作为中强酸,虽然腐蚀性比硫酸弱很多,但还是有一定的腐蚀性,需要注意适当防护。
TMB,即3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine,是辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)的最常用底物之一。在辣根过氧化物酶或其它适当过氧化物酶的催化下,TMB会产生可溶性蓝色产物,该蓝色产物通常可以在370nm或620-650nm测定吸光度。
由于辣根过氧化物酶与TMB的反应在一定时间内能持续进行,若不及时终止反应,可能会由于反应达到平台期等而影响实验结果。TMB显色终止液根据吸光度的检测分为两种,一种是在450nm进行检测,一种是在620-650nm进行检测。本TMB显色终止液加入后溶液颜色从蓝色变为黄色,并在450nm测定吸光度,本产品终止反应后在1小时内吸光度保持稳定。加入TMB显色液及加入TMB显色终止液(450nm, 不含硫酸)后的吸光度检测和实拍显色效果图参考图1。
图1.本产品的检测效果图。左图为不同浓度的HRP标记的二抗(A0208 辣根过氧化物酶标记山羊抗兔IgG (H+L)),加入TMB显色液(P0209)室温反应5分钟后A370的吸光值,及加入TMB显色终止液(450nm, 不含硫酸) A450的吸光值的线性图。右图为两者的实拍显色效果图。图中数据仅供参考,实际的检测效果可能会略有不同。
TMB显色终止液(450nm, 不含硫酸)与TMB显色终止液(650nm, 无腐蚀性)的主要区别如下:
产品编号 | P0215 | P0217 |
产品名称 | TMB显色终止液(450nm, 不含硫酸) | TMB显色终止液(650nm, 无腐蚀性) |
最终溶液颜色 | 黄色 | 蓝色 |
检测波长 | 450nm | 620-650nm |
吸光度信号 | 提高约一倍 | 无明显变化 |
安全性 | 有一定腐蚀性 | 无腐蚀性 |
96孔板每孔使用100µl,本试剂盒小包装100ml可以进行1000个终止反应,稍大的包装P0215-500ml可以进行5000个终止反应。
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P0215-100ml | TMB显色终止液(450nm, 不含硫酸) | 100ml |
P0215-500ml | TMB显色终止液(450nm, 不含硫酸) | 500ml |
— | 说明书 | 1份 |
本产品适用于ELISA等实验时溶液中TMB显色反应的终止,不适用于膜或组化组化反应TMB显色的终止。
加入TMB显色液或者TMB显色终止液后,如果有沉淀生成,说明样品中目的蛋白的含量过高,建议适当稀释后再进行测试。
本产品有腐蚀性,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或腐蚀其它物品。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P0209-100ml | TMB显色液(ELISA HRP显色用) | 100ml |
P0209-500ml | TMB显色液(ELISA HRP显色用) | 500ml |
P0215-100ml | TMB显色终止液(450nm, 不含硫酸) | 100ml |
P0215-500ml | TMB显色终止液(450nm, 不含硫酸) | 500ml |
P0217-100ml | TMB显色终止液(650nm, 无腐蚀性) | 100ml |