TMB显色终止液(450nm, 不含硫酸)
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产品编号 P0215-500ml
数量
¥ 516.00
产品包装:
100ml 500ml
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产品问答

      TMB显色终止液(450nm, 不含硫酸),即Stop Solution for TMB Substrate (450nm, Sulfuric acid free ),是一种主要用于ELISA等实验中TMB显色反应终止的比较安全的不含硫酸的即用型酸性溶液。加入本产品后,TMB显色反应会被终止,并且原来的蓝色溶液会并转变成在450nm处有较强光吸收的黄色溶液,最终在450nm测定吸光度并且可以使检测灵敏度比检测蓝色吸光度提高1倍左右。
      本产品相对比较安全。2M硫酸是最常用的TMB显示终止液,但由于其腐蚀性极强而有较大的安全隐患。本产品不含硫酸,使用了相对更加安全的适当中强酸,可以有效避免硫酸的强腐蚀性可能对人体造成的伤害。需要注意的是本产品作为中强酸,虽然腐蚀性比硫酸弱很多,但还是有一定的腐蚀性,需要注意适当防护。
      TMB,即3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine,是辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)的最常用底物之一。在辣根过氧化物酶或其它适当过氧化物酶的催化下,TMB会产生可溶性蓝色产物,该蓝色产物通常可以在370nm或620-650nm测定吸光度。
      由于辣根过氧化物酶与TMB的反应在一定时间内能持续进行,若不及时终止反应,可能会由于反应达到平台期等而影响实验结果。TMB显色终止液根据吸光度的检测分为两种,一种是在450nm进行检测,一种是在620-650nm进行检测。本TMB显色终止液加入后溶液颜色从蓝色变为黄色,并在450nm测定吸光度,本产品终止反应后在1小时内吸光度保持稳定。加入TMB显色液及加入TMB显色终止液(450nm, 不含硫酸)后的吸光度检测和实拍显色效果图参考图1。

      图1. 本产品的检测效果图。左图为不同浓度的HRP标记的二抗(A0208 辣根过氧化物酶标记山羊抗兔IgG (H+L)),加入TMB显色液(P0209)室温反应5分钟后A370的吸光值,及加入TMB显色终止液(450nm, 不含硫酸) A450的吸光值的线性图。右图为两者的实拍显色效果图。图中数据仅供参考,实际的检测效果可能会略有不同。

      TMB显色终止液(450nm, 不含硫酸)与TMB显色终止液(650nm, 无腐蚀性)的主要区别如下:

产品编号 P0215 P0217
产品名称 TMB显色终止液(450nm, 不含硫酸) TMB显色终止液(650nm, 无腐蚀性)
最终溶液颜色 黄色 蓝色
检测波长 450nm 620-650nm
吸光度信号 提高约一倍 无明显变化
安全性 有一定腐蚀性 无腐蚀性

      96孔板每孔使用100µl,本试剂盒小包装P0215-100ml可以进行1000个终止反应,稍大的包装P0215-500ml可以进行5000个终止反应。
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
P0215-100ml TMB显色终止液(450nm, 不含硫酸) 100ml
P0215-500ml TMB显色终止液(450nm, 不含硫酸) 500ml
说明书 1份

保存条件:
      4℃保存,一年有效。
注意事项:
      本产品适用于ELISA等实验时溶液中TMB显色反应的终止,不适用于膜或组化组化反应TMB显色的终止。
      加入TMB显色液或者TMB显色终止液后,如果有沉淀生成,说明样品中目的蛋白的含量过高,建议适当稀释后再进行测试。
      本产品有腐蚀性,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或腐蚀其它物品。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. 对于ELISA等实验中TMB显色反应的终止:
a. 参考ELISA试剂盒的实验步骤,在与辣根过氧化物酶标记的抗体孵育后,用适当洗涤液洗涤3-5次,每次3-5分钟。
b. 洗涤完毕后,去除洗涤液,加入100µl TMB显色液。
c. 室温避光孵育3-30分钟或更长时间,直至显色至预期深浅。
d. 加入100µl TMB显色终止液(450nm, 不含硫酸),随后在450nm测定吸光度。
2. 对于在96孔板内进行的其它适当检测 (如检测组织或细胞样品内源性的过氧化物酶):
a. 在96孔板内每孔加入10-20µl样品。
b. 加入100µl TMB显色液。
c. 室温避光孵育3-30分钟或更长时间,直至显色至预期深浅。
d. 加入100µl TMB显色终止液(450nm, 不含硫酸),随后在450nm测定吸光度。加入TMB显色液及加入TMB显色终止液(450nm, 不含硫酸)后的吸光度检测和实拍显色效果图参考图1。

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产品编号 产品名称 包装
P0209-100ml TMB显色液(ELISA HRP显色用) 100ml
P0209-500ml TMB显色液(ELISA HRP显色用) 500ml
P0215-500ml TMB显色终止液(450nm, 不含硫酸) 500ml
P0217-100ml TMB显色终止液(650nm, 无腐蚀性) 100ml


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使用本产品的文献:
1. Ji Wang, Caiguangxi Deng, Ming Liu, Yihao Liu, Liubing Li, Zhangping Huang, Liru Shang, Juan Jiang, Yongyong Li, Ruohui Mo, Hui Zhang, Min Liu, Sui Peng, Haipeng Xiao
Nat Commun. doi: 10.1038/s41467-022-34633-7. (IF 12.121)
2. Shaojie Liu, Donghui Han, Chao Xu, Fa Yang, Yu Li, Keying Zhang, Xiaolong Zhao, Jiayu Zhang, Tong Lu, Shiqi Lu, Changhong Shi, Rui Zhang, An-Gang Yang, Aizhi Zhao, Weijun Qin, Bo Yang, Weihong Wen
Mol Med. doi: 10.1186/s10020-022-00460-1. (IF 4.096)
3. Xiangyu Huang, Guihu Yin, Yiqin Cai, Jianing Hu, Jingwen Huang, Qingtao Liu, Xiuli Feng
Viruses. doi: 10.3390/v14122739.