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pNFκB-luc(报告基因质粒)

 产品编号: D2206
 产品包装: 1μg
 产品价格: 862.00元
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产品简介

产品简介:

产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D2206 pNFκB-luc(报告基因质粒) 1μg 862.00元

    pNFκB-luc(报告基因质粒)是碧云天自行研发的用于检测NFκB转录活性水平的报告基因质粒。
pNFκB-luc是以碧云天的pGL6质粒为模板,在其多克隆位点插入了多个NFκB结合位点,可以高灵敏度地检测NFκB的激活水平。
    pGL6质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)报告基因检测的新一
代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
    pNFκB-luc质粒的主要信息如下:
    Base pairs                                              5610
    NFκB response element (κB)                              26-65
    luc2 reporter gene                                      111-1763
    SV40 late poly(A) signal                                1798-2019
    SV40 early enhancer/promoter                            2067-2485
    Synthetic neomycin phosphotransferase
     (Neor) coding region                                   2510-3304
    Synthetic poly(A) signal                                3329-3377
    Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region     3444-3463
    ColE1-derived plasmid replication origin                3701
    Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region           4492-5352
    Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site     5457-5610
    Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region     5559-5578
    pNFκB-luc质粒的图谱如下:
            
    pNFκB-luc的多克隆位点及NFκB response element的详细图谱如下:
        BglI         KpnI  NheI        NFkB response elememt
     1 GGCCTAACTG GCCGGTACCG CTAGCGGGAA TTTCCGGGAA TTTCCGGGAA
       CCGGATTGAC CGGCCATGGC GATCGCCCTT AAAGGCCCTT AAAGGCCCTT
                       BglII      HindIII
    51 TTTCCGGGAA TTTCCAGATC TGCAGAAGCT TGGCAATCCG GTACTGTTGG
       AAAGGCCCTT AAAGGTCTAG ACGTCTTCGA ACCGTTAGGC CATGACAACC
    pNFκB-luc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pNFκB-luc))包括:
    Aat II     Afl II     Asc I      Ase I      Bsa I     BsaA I     BsiW I     BspM II
    BssH II    Eco72 I    EcoR I     EcoR V     Mlu I     Nde I      Nru I      PaeR7 I
    PflM I     Pme I      Pml I      Psp1406 I  PspA I    Rsr II     Sac I      Sma I
    SnaB I     Spl I      Srf I      Tth111 I   Vsp I     Xcm I      Xho I      Xma I
    pNFκB-luc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pNFκB-luc once)包括:

Sfi I       GGCCN,NNN`NGGCC 9
Bgl I       GCCN,NNN`NGGC   9
Acc65 I     G`GTAC,C        15
Asp718      G`GTAC,C        15
Kpn I       G,GTAC`C        19
Nhe I       G`CTAG,C        21
Bgl II      A`GATC,T        67
Hind III    A`AGCT,T        77
BsrG I      T`GTAC,A        602
Dra III     CAC,NNN`GTG     1258
Gsu I       CTGGAG 21/19    1491
Bpm I       CTGGAG 22/20    1492
Mun I       C`AATT,G        1938
BamH I      G`GATC,C        2031
Stu I       AGG|CCT         2464
EcoN I      CCTNN`N,NNAGG   2985
BsiC I      TT`CG,AA        3380

BstB I      TT`CG,AA        3380
Sal I       G`TCGA,C        3394
Afl III     A`CRYG,T        3644
ApaL I      G`TGCA,C        3958
HgiE II     ACCNNNNNNGGT -1/134223
Not I       GC`GGCC,GC      4464
BstX I      CCAN,NNNN`NTGG  4488
BstE II     G`GTNAC,C       4491
Ahd I       GACNN,N`NNGTC   4566
Bsu36 I     CC`TNA,GG       4922
Pvu I       CG,AT`CG        4936
Sac II      CC,GC`GG        4960
Bst1107 I   GTA|TAC         5076
Xca I       GTA|TAC         5076
Spe I       A`CTAG,T        5395
BsmA I      GTCTC`/9        5407
BsmB I      CGTCTC 7/11     5408

    pNFκB-luc质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
    RVprimer3(5559-5578):
    CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
    pNFκB-luc的全序列信息:D2206-pNFkappaB-luc-seq.txt
包装清单:

产品编号

产品名称

包装

D2206

pNFκB-luc(报告基因质粒)

1μg

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1份

保存条件:
   -20℃保存。
注意事项:
    本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人
或单位。
    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。
   抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. pNFκB-luc可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用碧云天的萤火虫萤光素酶报告基因检测
   试剂盒(RG005/RG006)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/RG028)。
3. TNF-α、IL-1β和LPS等是常见的可以激活NFκB的试剂,可以用作pNFκB-luc报告基因检测时的阳
   性对照。

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