pGRE-luc(报告基因质粒)

 产品编号: D2152
 产品包装: 1μg
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D2152 pGRE-luc(报告基因质粒) 1μg 862.00元

    pGRE-luc(报告基因质粒)是碧云天自行研发的用于检测糖皮质激素响应元件(glucocorticoid
response element, GRE)转录激活水平的报告基因质粒。pGRE-luc是以碧云天的pGL6质粒为模板,在其多克隆位点插入了多个GRE位点,可以高灵敏度地检测GRE的激活水平,检测糖皮质激素介导的信号途径(glucocorticoid-mediated signaling pathway)的激活水平。
    pGL6质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)报告基因检测的新一
代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
    pGRE-luc质粒的主要信息如下:
    Base pairs                                              5615
    Glucocorticoid response element (GRE)                   26-70
    luc2 reporter gene                                      116-1768
    SV40 late poly(A) signal                                1803-2024
    SV40 early enhancer/promoter                            2072-2490
    Synthetic neomycin phosphotransferase
     (Neor) coding region                                   2515-3309
    Synthetic poly(A) signal                                3334-3382
    Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region     3449-3468
    ColE1-derived plasmid replication origin                3706
    Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region           4497-5357
    Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site     5462-5615
    Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region     5564-5583
    pGRE-luc质粒的图谱如下:
             
    pGRE-luc的多克隆位点及GRE response element的详细图谱如下:
        BglI         KpnI  NheI                  GRE
     1 GGCCTAACTG GCCGGTACCG CTAGCGGTAC ATTTTGTTCT AGAACAAAAT
       CCGGATTGAC CGGCCATGGC GATCGCCATG TAAAACAAGA TCTTGTTTTA
                             BglII      HindIII
    51 GTACCGGTAC ATTTTGTTCT AGATCTGCAG AAGCTTGGCA ATCCGGTACT
       CATGGCCATG TAAAACAAGA TCTAGACGTC TTCGAACCGT TAGGCCATGA
    pGRE-luc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pGRE-luc)包括:
    Aat II     Afl II     Asc I      Ase I      Bsa I     BsaA I     BsiW I     BspM II
    BssH II    Eco72 I    EcoR I     EcoR V     Mlu I     Nde I      Nru I      PaeR7 I
    PflM I     Pme I      Pml I      Psp1406 I  PspA I    Rsr II     Sac I      Sma I
    SnaB I     Spl I      Srf I      Tth111 I   Vsp I     Xcm I      Xho I      Xma I
    pGRE-luc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pGRE-luc once)包括:

Sfi I       GGCCN,NNN`NGGCC 9
Bgl I       GCCN,NNN`NGGC   9
Acc65 I     G`GTAC,C        15
Asp718      G`GTAC,C        15
Kpn I       G,GTAC`C        19
Nhe I       G`CTAG,C        21
Bgl II      A`GATC,T        72
Hind III    A`AGCT,T        82
BsrG I      T`GTAC,A        607
Dra III     CAC,NNN`GTG     1263
Gsu I       CTGGAG 21/19    1496
Bpm I       CTGGAG 22/20    1497
Apo I       R`AATT,Y        1879
Mun I       C`AATT,G        1943
BamH I      G`GATC,C        2036
Stu I       AGG|CCT         2469
EcoN I      CCTNN`N,NNAGG   2990

BsiC I      TT`CG,AA        3385
BstB I      TT`CG,AA        3385
Sal I       G`TCGA,C        3399
Afl III     A`CRYG,T        3649
ApaL I      G`TGCA,C        3963
Not I       GC`GGCC,GC      4469
BstX I      CCAN,NNNN`NTGG  4493
BstE II     G`GTNAC,C       4496
Ahd I       GACNN,N`NNGTC   4571
Bsu36 I     CC`TNA,GG       4927
Pvu I       CG,AT`CG        4941
Sac II      CC,GC`GG        4965
Bst1107 I   GTA|TAC         5081
Xca I       GTA|TAC         5081
Spe I       A`CTAG,T        5400
BsmA I      GTCTC`/9        5412
BsmB I      CGTCTC 7/11     5413

    pGRE-luc质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
    RVprimer3(5564-5583):
    CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
    pGRE-luc的全序列信息:d2152-pGRE-luc-seq.txt
包装清单:

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产品名称

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D2152

pGRE-luc(报告基因质粒)

1μg

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保存条件:
   -20℃保存。
注意事项:
    本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人
或单位。
    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。
   抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. pGRE-luc可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用碧云天的萤火虫萤光素酶报告基因检测
   试剂盒(RG005/RG006)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/RG028)。
3. 糖皮质激素可以激活GRE,可以用作pGRE-luc报告基因检测时的阳性对照。

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