FITC-labeled Ficoll 400 (MW400,000)
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产品编号 ST3025-50mg
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¥ 256.00
产品包装:
50mg 250mg 1g
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碧云天生产的FITC-labeled Ficoll,即FITC标记聚蔗糖,也称FITC-Ficoll、FITC-polysucrose、Fluorescein-labeled Ficoll、Fluorescein-polysucrose、Fluorescein标记聚蔗糖、异硫氰酸荧光素-聚蔗糖、异硫氰酸荧光素标记聚蔗糖或荧光素标记聚蔗糖,是一类广泛使用的荧光示踪剂化合物,常用于渗透性、扩散作用和微循环的研究,如组织、细胞通透性,肾小球滤过功能检测等。

Ficoll,又名Polysucrose、Poly(sucrose-co-epichlorhydrin),中文名称为聚蔗糖,是通过蔗糖(Sucrose)和环氧氯丙烷(Epichlorohydrin, 即(R)-(-)-1-Chloro-2,3-epoxypropane)共聚制备的高度支链化的高分子聚合物(图1)。Ficoll因其高含量的羟基而具有非常好的水溶性,在溶液中为球状分子,可视作介于刚性固体球体和柔性线性缠绕之间的中间体,分子量范围广(20kDa-1000kDa),具有优异的生物相容性,毒性低,免疫原性低,呈电中性。与相同浓度的蔗糖水溶液相比,Ficoll水溶液具有极低的渗透压。相较于葡聚糖(Dextran),Ficoll对酸性pH值更为敏感,刚性更高、柔性更低,更具球形的结构,所以在分子量相近的情况下,Ficoll的分子大小会比Dextran更小一些[1]。综上,Ficoll conjugates (聚蔗糖偶联物)是细胞和组织的理想示踪剂。

图1. FITC-labeled Ficoll结构示意图。

常见的聚蔗糖偶联物(Ficoll conjugates)包括各种荧光标记聚蔗糖(如FITC-labeled Ficoll,参考图1)、聚蔗糖-泛影酸钠(Ficoll-paque)等,其应用包括但不限于:①肾小球滤过作用研究,Ficoll conjugates具有一定的生物惰性,且不被近端小管重吸收,表现出相当开放、灵活、可变形的结构,在肾小球毛细血管壁上的量化清除率(Fractional clearances, 即Sieving Coefficient)明显高于同等Stokes-Einstein半径的中性球状蛋白[1-4];②Ficoll为电中性的亲水性多糖,分子大小范围广,具有膜不渗透性,故可将各种荧光标记的Ficoll用于液相内吞作用(Fluid-phase endocytosis)研究、膜通道孔径的大小和通透性研究、以及细胞隔室(Cell compartment)大小研究等[5];③物质运输研究,在小鼠模型中使用FITC-labeled Ficoll可以对跨血管蛋白质转运途径进行监测[6];④组织、细胞内扩散作用研究,例如通过光漂白荧光恢复技术(Fluorescence recovery after photobleaching, FRAP)量化FITC-labeled Ficoll在玻璃体(Vitreum)中的扩散情况,以研究眼内药物递送[7],又例如通过FRAP技术监测FITC-labeled Ficoll在MDCK上皮细胞和3T3成纤维细胞的细胞核和细胞质中的扩散情况[8];⑤Ficoll-Paque是一种用于分离细胞和细胞器的密度梯度离心介质,常用于血液来源的淋巴细胞和单核细胞的分离[9,10]。

碧云天的FITC-labeled Ficoll系列产品以冻干粉(Lyophilized powder)形式提供,经无水乙醇反复清洗并进行荧光强度检测,确保不含游离染料。FITC-labeled Ficoll系列产品纯度高、品质佳、性质十分稳定、分子量范围广、可选择的分子量多,用户可根据实验目的、所需分子量大小等进行选择。

本FITC-labeled Ficoll系列产品使用异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocyanate, FITC)对不同分子量的Ficoll通过稳定的硫代氨基甲酰键(Thiocarbamoyl linkage)进行标记,标记过程确保Ficoll未发生降解,同时保证了多糖链中FITC的标记程度适中,既能确保适当的荧光强度,又能大大减少标记反应可能对Ficoll本身特性产生影响,并能有效避免与细胞内组分相互作用。

FITC是一种常用的绿色荧光探针,在激发后会发出绿色荧光信号,因此可以通过荧光显微镜、荧光酶标仪或流式细胞仪等对FITC-labeled Ficoll进行检测。FITC的吸收(激发)和发射峰参见下表。

Fluorophore Excitation Peak (nm) Emission Peak (nm)
FITC 492 520

本FITC-labeled Ficoll系列产品的基本性质(Properties)如下:

Product Cat No. Product Name Average MW Degree of labeling Stokes-Einstein radius (Å)
ST3001 FITC-labeled Ficoll 20 20,000 0.003-0.015mol FITC per mol Sucrose ~28.9
ST3005 FITC-labeled Ficoll 40 40,000 0.003-0.015mol FITC per mol Sucrose ~38.8
ST3010 FITC-labeled Ficoll 50 50,000 0.003-0.015mol FITC per mol Sucrose ~42.7
ST3015 FITC-labeled Ficoll 70 70,000 0.003-0.015mol FITC per mol Sucrose ~49.3
ST3020 FITC-labeled Ficoll 100 100,000 0.003-0.015mol FITC per mol Sucrose ~57.4
ST3025 FITC-labeled Ficoll 400 400,000 0.003-0.015mol FITC per mol Sucrose ~103.8

本FITC-labeled Ficoll系列产品的标记效率约为相当于每100个蔗糖分子中有0.3-1.5个FITC分子标记,即0.003-0.015 moles of FITC per mole of Sucrose。

本FITC-labeled Ficoll系列产品,呈黄色或橙色,在水或盐溶液中具有极高溶解度,也可溶解于DMSO、甲酰胺等有机溶剂,但不溶于低级脂肪醇、丙酮、氯仿和二甲基甲酰胺。

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
ST3001-50mg FITC-labeled Ficoll 20 (MW20,000) 50mg
ST3001-250mg FITC-labeled Ficoll 20 (MW20,000) 250mg
ST3001-1g FITC-labeled Ficoll 20 (MW20,000) 1g
ST3005-50mg FITC-labeled Ficoll 40 (MW40,000) 50mg
ST3005-250mg FITC-labeled Ficoll 40 (MW40,000) 250mg
ST3005-1g FITC-labeled Ficoll 40 (MW40,000) 1g
ST3010-50mg FITC-labeled Ficoll 50 (MW50,000) 50mg
ST3010-250mg FITC-labeled Ficoll 50 (MW50,000) 250mg
ST3010-1g FITC-labeled Ficoll 50 (MW50,000) 1g
ST3015-50mg FITC-labeled Ficoll 70 (MW70,000) 50mg
ST3015-250mg FITC-labeled Ficoll 70 (MW70,000) 250mg
ST3015-1g FITC-labeled Ficoll 70 (MW70,000) 1g
ST3020-50mg FITC-labeled Ficoll 100 (MW100,000) 50mg
ST3020-250mg FITC-labeled Ficoll 100 (MW100,000) 250mg
ST3020-1g FITC-labeled Ficoll 100 (MW100,000) 1g
ST3025-50mg FITC-labeled Ficoll 400 (MW400,000) 50mg
ST3025-250mg FITC-labeled Ficoll 400 (MW400,000) 250mg
ST3025-1g FITC-labeled Ficoll 400 (MW400,000) 1g
说明书 1份
保存条件:

-20ºC避光保存,至少一年有效。

注意事项:

荧光物质均易发生淬灭,请注意避光。

本系列产品为干燥粉末状,易吸收空气中水分,请避免敞口放置,注意防潮。

本系列产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. Ficoll的分子量、电荷数、标记程度、偶联物性质等都可能会对实验造成影响,具体的最佳工作浓度和处理时间请自行参考相关文献,或根据实验目的,以及所培养的特定细胞和组织,通过实验进行摸索和优化。例如:对于体内研究,如通过研究FITC-Ficoll的体内清除率以研究大分子转运途径,推荐使用50mg/ml的FITC-Ficoll 400和FITC-Ficoll 70的混合物(1:24) [6];大鼠肾小球筛分系数研究中,推荐使用0.36mg/ml的FITC-Ficoll 400或15μg/ml的FITC-Ficoll-70,注射量4ml/kg [11]。
2. 配制储存液或工作液时,可通过涡旋、超声或在剧烈搅拌下将粉末缓慢加入到温水(约40-60ºC)中以实现高分子量FITC-labeled Ficoll的溶解。溶解过程中形成的任何不溶性颗粒可12,000×g离心5分钟去除。
3. 配制成储存液后,或使用0.22μm孔径的滤器(FF362)过滤除菌后,置于4ºC避光保存,几周内有效。如需长期储存,可将储存液分装后,置于-20ºC避光保存,尽量避免反复冻融。
参考文献:
1. Venturoli D, Rippe B. American Am J Physiol Renal Physiol. 2005. 288(4):F605-13.
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3. Ohlson M, Sörensson J, Haraldsson B. Am J Physiol Renal Physiol. 2000. 279(1):F84-91.
4. Königshausen E, Potthoff SA, Woznowski M, Stegbauer J, Rump LC, et al. J Vis Exp. 2019. (150).
5. Chazotte B. Cold Spring Harb Protoc. 2011. 2011(2):pdb.prot5572.
6. Rosengern B, Rippe C, Rippe C, Venturoli D, Swärd K, et al. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2006. 291(3):H1371-7.
7. Srikantha N, Teijeiro-Gonzalez Y, Simpson A, Elsaid N, Somavarapu S, et al. PLoS One. 2022. 17(2):e0261925.
8. Seksek O, Biwersi J, Verkman AS. J Cell Biol. 1997. 138(1):131-42.
9. Jaatinen T, Laine J. Curr Protoc Stem Cell Biol. 2007. Chapter 2:Unit 2A.1.
10. Tan YS, Lei YL. Methods Mol Biol. 2019;1960:93-99.
11. Axelesson J, Mahmutovic I, Rippe A, Rippe B. American Am J Physiol Renal Physiol. 2009. 297(3):F577-82.
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