化学信息：
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化学名
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N-(3-aminopropyl)-N-[(1R)-1-(3-benzyl-7-chloro-4- oxochromen-2-yl)-2-methylpropyl]-4-methylbenzamide;hydrochloride
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简称
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SB743921
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别名
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SB 743921, SB-743921
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中文名
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N/A
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化学式
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C31H33N2O3.HCl
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分子量
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553.52
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CAS号
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940929-33-9
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纯度
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99.2%
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溶剂/溶解度
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Water 22mg/ml; DMSO 111mg/ml; Ethanol 111mg/ml
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溶液配制
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5mg加入0.90ml DMSO，或者每5.54mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SC0110-10mM用DMSO配制。
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生物信息：
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产品描述
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SB743921是一种kinesin spindle protein(KSP)(纺锤体驱动蛋白)抑制剂，Ki为0.1nM，对MKLP1、Kin2、Kif1A、Kif15、KHC、Kif4和CENP-E几乎没有亲和力。Phase 1/2。
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信号通路
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Cytoskeletal Signaling
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靶点
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KSP(MX1 cells)
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KSP(Colo205 cells)
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KSP
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KSP(SKOV3 cells)
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KSP(MV552 cells)
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IC50
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0.06nM
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0.07nM
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0.1nM(Ki)
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0.2nM
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1.7nM
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体外研究
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SB743921对于人和鼠的KSP的Ki值分别是0.1nM和0.12nM，而对其它的驱动蛋白MKLP1和Kin2，其Ki值则大于70μM。SB743921阻断了功能性有丝分裂纺锤体的组装，因此能将细胞阻断在有丝分裂期并随后导致细胞坏死。SB743921对Ispinesib的效能已经分别在生化和细胞实验中得到改善。
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体内研究
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在体内SB-743921能有效抑制P388白血病。不同于紫杉烷，SB-743921对广谱肿瘤模型都有显著效应。SB-743921对异种移植人的肿瘤Colo205(完全回归)，MCF-7、SK-MES、H69、OVCAR-3(完全和部分回归)和HT-29、MX-1、MDA-MB-231、A2780(肿瘤生长延迟)都能产生抑制增长的活性。SB-743921不会引起经常与微管蛋白相关的神经病变。
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临床实验
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N/A
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特征
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SB743921是第二代KSP抑制剂
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相关实验数据(此数据来自于公开文献，碧云天并不保证其有效性)：
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酶活性检测实验
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方法
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用大肠杆菌BL21(DE3)表达COOH端标记6个组氨酸的KSP蛋白的马达结构域(1-360位氨基酸)。在microfluidizer中用裂解液[50mM Tris-HCl、50mM KCl、10mM咪唑、2mM MgCl2、8mM β-巯基乙醇、0.1mM ATP(pH 7.4)]裂解菌体，在用Ni-NTA琼脂糖亲和层析的方法纯化蛋白，并用洗脱液[50mM PIPES、10%蔗糖、300mM咪唑、50mM KCl、2mM MgCl2、8mM β-巯基乙醇、0.1mM ATP(pH 6.8)]将蛋白洗脱下来。丙酮酸激酶-乳酸脱氢酶检测系统能够将ADP外露部分与NADH的氧机偶联，因此可以利用这个系统来测量ATPase的活性的稳定性。然后检测340nM的吸光度变化。所有生化实验都在PEM25的缓冲液[25mM Pipes/KOH(pH 6.8)、2mM MgCl2、1mM EGTA]中进行，而实验涉及微管时则需要另加10μM SB743921。可以用中止流仪器通过检测MANT-ATP荧光的减少来检测ADP的释放率。也可以用7-二乙氨-3-((((2顺丁烯二酰亚氨)乙烷基)氨基)羰基)香豆素(MDCC)染料修饰Pi，然后通过中止流仪器检测Pi的释放率。之后可以做出KSP抑制剂的剂量响应曲线，用酶浓度明确修正结果后，就可以估算出KSP抑制剂的Ki值。微管蛋白的聚合则可以通过检测340nM处吸光度的变化来测量，反应体系为100μl，在96孔板中进行，并将酶标仪的孵育温度设置成37℃。
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细胞实验
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细胞系
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HeLa细胞
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浓度
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1μM
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处理时间
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24小时
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方法
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用含10% FCS的RPMI 1640培养基，在5% CO2的条件下培养包括HeLa细胞在内的所有细胞。在96孔微量滴定板中利用3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium我们检测了48小时内连续稀释的SB743921对DMSO处理的细胞的生长抑制作用。将用DMSO处理的细胞的吸光度比率当成细胞的生长情况，绘制成浓度对应的四参数曲线。从拟合曲线中可以推测出细胞生长被抑制50%时的药物浓度。可以用碘化丙啶染色及流式细胞技术估测用1μM SB743921处理或不用SB743921处理的HeLa细胞中的DNA含量。还可以用免疫荧光的技术来检测，首先用1μM SB743921处理HeLa细胞24小时，再用2%甲醛固定，通透后再用DM1-α、anti-γ-tubulin和1μg/ml 4′,6-diamidino-2-phenylindole染色，再用Alexa 488 secondary goat antirabbit IgG和Rhodamine-X goat antimouse IgG孵育，最后拍照得到免疫荧光结果的图片。图片是用DeltaVision Restoration Microscopy System放大600倍得到的。收集Z stacks(0.2μM)的结果并把模糊的信息通过约束迭代卷积去除掉。然后把Z stacks压缩成单像平面。
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动物实验
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动物模型
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携带淋巴球性白血病细胞P388的雌性BDF1小鼠
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配制
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2%二甲基乙酰胺+2%聚氧乙烯蓖麻油+96%酸化水[pH 5.0]
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剂量
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7.5mg/kg-30mg/kg
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给药方式
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腹腔注射
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参考文献：
1.Sakowicz R, et al. Cancer Res. 2004; 64(9):3276-3280.
2.Jackson JR, et al. AACR. 2006; Abst 0906.
包装清单：
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产品编号
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产品名称
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包装
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SC0110-10mM
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SB-743921 (KSP抑制剂)
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10mM×0.2ml
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SC0110-5mg
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SB-743921 (KSP抑制剂)
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5mg
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SC0110-25mg
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SB-743921 (KSP抑制剂)
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25mg
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说明书
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1份
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保存条件：
-20℃保存，至少一年有效。如果溶于非DMSO溶剂，建议分装后-80℃保存，预计6个月内有效。
注意事项：
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
