EIF3A基因敲除HEK293T细胞Trizol裂解液
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产品编号 L02604
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¥ 1258.00
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EIF3A Knockout HEK293T Trizol Lysate (EIF3A基因敲除HEK293T细胞Trizol裂解液)是通过同时表达Cas9、目的基因sgRNA和puromycin抗性基因,并实现了目的基因CRISPR敲除的多克隆HEK293T细胞的Trizol裂解液。该细胞中目的基因的敲除已经通过T7EI法的验证。本产品可用于该目的基因敲除后其信号通路相关RNA表达的研究。

本Trizol裂解液源于可同时表达Cas9、目的基因sgRNA和puromycin抗性基因的慢病毒感染HEK293T细胞并经过puromycin筛选后获得的多克隆HEK293T细胞。制备该细胞的相应慢病毒的基因序列的关键图谱信息请参考图1。

图1. 可同时表达sgRNA、Cas9和puromycin抗性的慢病毒其基因序列的关键图谱信息。

该细胞中目的基因的敲除已经通过T7EI法的验证。

由于本细胞是通过CRISPR/Cas9技术获得的多克隆细胞,基于CRISPR/Cas9技术的特点,理论上平均有2/3的细胞发生移码突变而导致了目的基因的敲除,平均有1/3的细胞并未发生移码突变。很多情况下有约2/3的细胞发生目的基因的敲除,已经足以进行很多的目的基因的生物学功能的研究了。如果希望获得100%基因敲除的细胞,可以自行使用本产品筛选单克隆细胞,或者委托碧云天进行单克隆细胞株的筛选服务。

本Trizol裂解液用于实验时,建议同时选购无任何靶向的对照细胞Trizol裂解液Control Knockout HEK293T Trizol Lysate (L00031)或靶向GFP的对照Trizol裂解液GFP Knockout HEK293T Trizol Lysate (L00033)

碧云天同时提供基于CRISPR/Cas9技术的EIF3A基因敲除的质粒(L02600 pLenti-EIF3A-sgRNA)慢病毒(L02601 EIF3A Knockout Lentivirus)HEK293T细胞(L02602 EIF3A Knockout HEK293T Cells)HEK293T敲除细胞的RIPA裂解液(L02603 EIF3A Knockout HEK293T RIPA Lysate)HEK293T敲除细胞的Trizol裂解液(L02604 EIF3A Knockout HEK293T Trizol Lysate)等产品,具体请在碧云天网站查询或在本产品网页点击相应产品。

EIF3A基因的基本信息如下:

Species Gene Symbol Gene ID GenBank Accession Transcript
Human EIF3A 8661 BC114429 NM_003750

 

About the gene
Official Symbol EIF3A
Previous Symbol EIF3|EIF3S10
Official Full Name eukaryotic translation initiation factor 3 subunit A
Synonyms eIF3-theta; eIF3-p170; KIAA0139; eIF3a; TIF32
Location 10q26.11
Gene Type protein-coding gene
Uniprot ID Q14152
Pathway/Library m6A Modification Related Genes Library
Gene Summary RNA-binding component of the eukaryotic translation initiation factor 3 (eIF-3) complex, which is required for several steps in the initiation of protein synthesis (PubMed:17581632, PubMed:25849773). The eIF-3 complex associates with the 40S ribosome and facilitates the recruitment of eIF-1, eIF-1A, eIF-2:GTP:methionyl-tRNAi and eIF-5 to form the 43S pre-initiation complex (43S PIC). The eIF-3 complex stimulates mRNA recruitment to the 43S PIC and scanning of the mRNA for AUG recognition. The eIF-3 complex is also required for disassembly and recycling of post-termination ribosomal complexes and subsequently prevents premature joining of the 40S and 60S ribosomal subunits prior to initiation (PubMed:17581632, PubMed:11169732). The eIF-3 complex specifically targets and initiates translation of a subset of mRNAs involved in cell proliferation, including cell cycling, differentiation and apoptosis, and uses different modes of RNA stem-loop binding to exert either translational activation or repression (PubMed:25849773, PubMed:27462815). EIF3A_HUMAN,Q14152 (Microbial infection) Essential for the initiation of translation on type-1 viral ribosomal entry sites (IRESs), like for HCV, PV, EV71 or BEV translation (PubMed:23766293, PubMed:24357634). EIF3A_HUMAN,Q14152 (Microbial infection) In case of FCV infection, plays a role in the ribosomal termination-reinitiation event leading to the translation of VP2 (PubMed:18056426). EIF3A_HUMAN,Q14152
包装清单:
产品编号 产品名称 包装
L02604 EIF3A Knockout HEK293T Trizol Lysate 500µl
说明书 1份
保存条件:

-20℃保存,至少6个月有效;-80℃保存,至少一年有效。

注意事项:

碧云天拥有sgRNA序列的知识产权,如果需要sgRNA序列,请在订购后发送邮件向info@beyotime.com索取。sgRNA序列信息与本产品,未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。使用者在发表研究论文或结果时,应注明来源。

对于非目录产品的CRISPR基因敲除细胞Trizol裂解液的定制,可联系碧云天技术服务service@beyotime.com

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. 本细胞Trizol裂解液中含有不少于1×106个细胞。
2. 按照碧云天的Trizol (总RNA抽提试剂) (R0016)中的使用说明进行RNA的抽提:https://www.beyotime.com/product/R0016.htm;或按照Invitrogen™的TRIzol™ Reagent的使用说明进行RNA的抽提,后续可以用于反转录、qRT-PCR、NGS等各种常见用途。
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