CRISPR-Cas系统作为原核生物的适应性免疫系统，广泛存在于细菌和古细菌中，能够保护其自身不受外源DNA或RNA的影响，是非常常用的基因编辑工具。完整的CRISPR-Cas系统包括介导识别DNA的CRISPR RNAs (crRNAs)和介导切割DNA的Cas核酸内切酶。

CRISPR-Cas12a系统是由Cas12a和gRNA (crRNA，仅需约40-44个碱基)组成。FnCas12a由gRNA引导至互补链，识别互补链上5'端富含T碱基(5'-TTN-3')的PAM (Protospacer adjacent motif)序列，然后Cas12a中的RuvC核酸内切酶结构域逐个切割互补链和靶链，以产生交错的DNA双链断裂，断裂发生在PAM序列3'端的约第18个碱基处，切割产物为5'端突出4或5个碱基的粘性末端(图1)。而CRISPR-Cas9系统是由Cas9和gRNA (crRNA和tracrRNA两个RNA分子融合而成)组成，Cas9在gRNA的引导下，识别3'端富含G碱基(5'-NGG-3')的PAM序列，并且Cas9需要使用HNH和RuvC两个核酸酶结构域协同切割DNA，断裂通常发生在PAM序列5'端的第3个碱基处，最终产生平末端。

图1.碧云天Cas12a核酸酶序列识别与DNA切割示意图。

碧云天基于自主研发的PerfectProtein™技术平台表达、纯化获得的FnCas12a, 来源于Francisella novicida U112。FnCas12a识别含有TTN的PAM序列，并且FnCas12a的切割位点相对远离其识别位点为多次编辑提供了可能性，这些特点使Cas12a与Cas9可以互为补充。只需简单将guide RNA (gRNA)与Cas12a蛋白相结合，由于该gRNA仅含有crRNA，无需trans-activating crRNA (tracrRNA)即可实现基因编辑的目的

产品特点：
1.基因编辑效率高：FnCas12a (Cpf1)酶的C端融合了核定位信号(Nuclear localization signal, NLS)，NLS有助于FnCas12a进入细胞后定位至细胞核，从而提高基因编辑的效率；
2.脱靶效应低：研究表明与Cas9相比，Cas12a更有效精确；
3.酶活性高：产品效果见图2。

产品效果：

图2.碧云天和N公司的Cas12a酶活性检测对比效果图。如图所示，本产品与N公司的Cas12a具有相近的酶活性。

产品信息：

产品编号	产品名称	包装	产品价格
D0510S	FnCas12a (Cpf1)	100pmol
D0510M	FnCas12a (Cpf1)	500pmol
D0510L	FnCas12a (Cpf1)	2000pmol