pCMV-C-mCherry

 产品编号: D2628
 产品包装: 1μg
 产品价格: 862.00元
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产品简介

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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D2628 pCMV-C-mCherry 1μg 862.00元

    pCMV-C-mCherry是碧云天自行研发的哺乳动物细胞表达质粒,用于表达C端含mCherry (DsRed的突变体,一种非常明亮的红色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子,可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的后面有一个mCherry的完整编码序列,因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达C端含有mCherry标签的融合蛋白。利用mCherry的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位,也可以利用mCherry抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。mCherry与GFP没有序列同源性,不能使用GFP抗体检测mCherry。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
    pCMV-C-mCherry质粒的主要信息如下:
    Feature Nucleotide                                             Position
    CMV promoter                                                   1-602
    T3 promoter and T3 primer binding site                         620-639
    Multiple cloning site                                          651-736
    mCherry                                                        741-1451
    T7 promoter and T7 primer binding site                         1501-1522
    SV40 polyAsignal                                               1534-1917
    f1 origin of ss-DNA replication                                2055-2361
    bla promoter                                                   2386-2510
    SV40 promoter                                                  2530-2868
    Neomycin/kanamycin resistance ORF                              2903-3694
    HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal                         3695-4153
    pUC origin                                                     4282-4949
    pCMV-C-mCherry质粒(5001bp)的图谱如下:
       
    pCMV-C-mCherry的多克隆位点的详细图谱如下:
                                            SmaI
         SacI    SacII    NotI          XmaI    BamHI  HindIII
     651 GAGCTCCACC GCGGTGGCGG CCGCTCTAGC CCGGGCGGAT CCAAGCTTCT
         CTCGAGGTGG CGCCACCGCC GGCGAGATCG GGCCCGCCTA GGTTCGAAGA
             EcoRI  EcoRV SalI   BglII XhoI   XbaI   mCherry
     701 GCAGGAATTC GATATCGTCG ACAGATCTCT CGAGTCTAGA ATGGTGAGCA
         CGTCCTTAAG CTATAGCAGC TGTCTAGAGA GCTCAGATCT TACCACTCGT
     751 AGGGCGAGGA GGATAACATG GCCATCATCA AGGAGTTCAT GCGCTTCAAG
         TCCCGCTCCT CCTATTGTAC CGGTAGTAGT TCCTCAAGTA CGCGAAGTTC
     801 GTGCACATGG AGGGCTCCGT GAACGGCCAC GAGTTCGAGA TCGAGGGCGA
         CACGTGTACC TCCCGAGGCA CTTGCCGGTG CTCAAGCTCT AGCTCCCGCT
     851 GGGCGAGGGC CGCCCCTACG AGGGCACCCA GACCGCCAAG CTGAAGGTGA
         CCCGCTCCCG GCGGGGATGC TCCCGTGGGT CTGGCGGTTC GACTTCCACT
     901 CCAAGGGTGG CCCCCTGCCC TTCGCCTGGG ACATCCTGTC CCCTCAGTTC
         GGTTCCCACC GGGGGACGGG AAGCGGACCC TGTAGGACAG GGGAGTCAAG
     951 ATGTACGGCT CCAAGGCCTA CGTGAAGCAC CCCGCCGACA TCCCCGACTA
         TACATGCCGA GGTTCCGGAT GCACTTCGTG GGGCGGCTGT AGGGGCTGAT
    1001 CTTGAAGCTG TCCTTCCCCG AGGGCTTCAA GTGGGAGCGC GTGATGAACT
         GAACTTCGAC AGGAAGGGGC TCCCGAAGTT CACCCTCGCG CACTACTTGA
    1051 TCGAGGACGG CGGCGTGGTG ACCGTGACCC AGGACTCCTC CCTGCAGGAC
         AGCTCCTGCC GCCGCACCAC TGGCACTGGG TCCTGAGGAG GGACGTCCTG
    1101 GGCGAGTTCA TCTACAAGGT GAAGCTGCGC GGCACCAACT TCCCCTCCGA
         CCGCTCAAGT AGATGTTCCA CTTCGACGCG CCGTGGTTGA AGGGGAGGCT
    1151 CGGCCCCGTA ATGCAGAAGA AGACCATGGG CTGGGAGGCC TCCTCCGAGC
         GCCGGGGCAT TACGTCTTCT TCTGGTACCC GACCCTCCGG AGGAGGCTCG
    1201 GGATGTACCC CGAGGACGGC GCCCTGAAGG GCGAGATCAA GCAGAGGCTG
         CCTACATGGG GCTCCTGCCG CGGGACTTCC CGCTCTAGTT CGTCTCCGAC
    1251 AAGCTGAAGG ACGGCGGCCA CTACGACGCT GAGGTCAAGA CCACCTACAA
         TTCGACTTCC TGCCGCCGGT GATGCTGCGA CTCCAGTTCT GGTGGATGTT
    1301 GGCCAAGAAG CCCGTGCAGC TGCCCGGCGC CTACAACGTC AACATCAAGT
         CCGGTTCTTC GGGCACGTCG ACGGGCCGCG GATGTTGCAG TTGTAGTTCA
    1351 TGGACATCAC CTCCCACAAC GAGGACTACA CCATCGTGGA ACAGTACGAA
         ACCTGTAGTG GAGGGTGTTG CTCCTGATGT GGTAGCACCT TGTCATGCTT
    1401 CGCGCCGAGG GCCGCCACTC CACCGGCGGC ATGGACGAGC TGTACAAGTA
         GCGCGGCTCC CGGCGGTGAG GTGGCCGCCG TACCTGCTCG ACATGTTCAT
         ApaI
    1451 GGGGCCCGGT ACCTTAATTA ATTAAGGTAC CAGGTAAGTG TACCCAATTC
         CCCCGGGCCA TGGAATTAAT TAATTCCATG GTCCATTCAC ATGGGTTAAG
    pCMV-C-mCherry中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-C-mCherry)
包括:
    AclI      AfeI      AflII         AgeI       AscI      AsiSI        BaeI
    BcgI      BlpI      BmgBI         BsiWI      BsmBI     BspEI        BspQI
    BssHII    BstZ17I   EarI          EcoNI      FseI      NruI         PmeI
    PmlI      PpuMI     PshAI         PspXI      SapI      ScaI         SpeI
    SwaI      XmnI
    pCMV-C-mCherry中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-C-mCherry once)包括:

      NdeI     CA`TA,TG                       240
      SnaBI    TAC|GTA                        346
      CspCI    ,NN`(N)11CAA(N)5GTGG(N)10,NN`  380
      NheI     G`CTAG,C                       597
      BmtI     G,CTAG`C                       597
      SacI     G,AGCT`C                       651
      Eco53kI  GAG|CTC                        653
      BstXI    CCAN,NNNN`NTGG                 659
      SacII    CC,GC`GG                       660
      NotI     GC`GGCC,GC                     668
      TspMI    C`CCGG,G                       680
      XmaI     C`CCGG,G                       680
      SmaI     CCC|GGG                        682
      BamHI    G`GATC,C                       687
      HindIII  A`AGCT,T                       693
      EcoRI    G`AATT,C                       705
      EcoRV    GAT|ATC                        713
      SalI     G`TCGA,C                       717
      AccI     GT`MK,AC                       718
      BglII    A`GATC,T                       723
      XhoI     C`TCGA,G                       729
      PaeR7I   C`TCGA,G                       729
      XbaI     T`CTAG,A                       735
      AhdI     GACNN,N`NNGTC                  934
      SbfI     CC,TGCA`GG                     1092
      BbsI     GAAGACNN`NNNN,                 1176

PflMI     CCAN,NNN`NTGG            1177

Bpu10I    CC`TNA,GC                1282

BbvCI     CC`TCA,GC                1282
BsgI      GTGCAG(N)14,NN`          1333
SgrAI     CR`CCGG,YG               1422
XcmI      CCANNNN,N`NNNNTGG        1426
BsrGI     T`GTAC,A                 1441
PspOMI    G`GGCC,C                 1452
ApaI      G,GGCC`C                 1452
PvuI      CG,AT`CG                 1532
BclI      T`GATC,A                 1688
MfeI      C`AATT,G                 1781
HpaI      GTT|AAC                  1794
BtsI      GCAGTG,NN`               1868
MluI      A`CGCG,T                 1917
DraIII    CAC,NNN`GTG              2144
SfiI      GGCCN,NNN`NGGCC          2803
ClaI      AT`CG,AT                 2871
BspDI     AT`CG,AT                 2871
PflFI     GACN`N,NGTC              3149
Tth111I   GACN`N,NGTC              3149
BsrDI     GCAATG,NN`               3262
RsrII     CG`GWC,CG                3547
BstBI     TT`CG,AA                 3713
BsaI      GGTCTCN`NNNN,            4020
PciI      A`CATG,T                 4949

    pCMV-C-mCherry质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
    T3 primer (620-639): 5′-AATTAACCCTCACTAAAGGG-3′
  C-mCherry primer (852-873): 5′CCTCGTAGGGGCGGCCCTCGCC-3′
    pCMV-C-mCherry的全序列信息:D2628 pCMV-C-mCherry-seq.txt
    pCMV-C-mCherry质粒转染细胞后的表达效果请参考图1。
          
      图1. pCMV-C-mCherry质粒转染细胞后的表达效果图。左侧为明场照片,右侧为荧光照片。
包装清单:

产品编号

产品名称

包装

D2628

pCMV-C-mCherry

1μg

说明书

1份

保存条件:
   -20℃保存。
注意事项:
   本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人
或单位。
    本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放
于普通住宅内。
    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。
   抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. pCMV-C-mCherry质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,构建的质粒可以用常规
  方法转染细胞。
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产品编号

产品名称

包装

D2602

pCMV-Blank

1μg

D2621

pCMV-C-BFP

1μg

D2623

pCMV-C-CFP

1μg

D2624

pCMV-C-DsRed

1μg

D2626

pCMV-C-EGFP

1μg

D2628

pCMV-C-mCherry

1μg

D2630

pCMV-C-YFP

1μg

D2632

pCMV-C-Flag

1μg

D2639

pCMV-C-HA

1μg

D2650

pCMV-C-His

1μg

D2672

pCMV-C-Myc

1μg

D2701

pCMV-N-BFP

1μg

D2703

pCMV-N-CFP

1μg

D2705

pCMV-N-DsRed

1μg

D2707

pCMV-N-EGFP

1μg

D2711

pCMV-N-mCherry

1μg

D2716

pCMV-N-YFP

1μg

D2722

pCMV-N-Flag

1μg

D2733

pCMV-N-HA

1μg

D2737

pCMV-N-His

1μg

D2756

pCMV-N-Myc

1μg


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