化学信息：
| 化学名 | 9-cyclohexyl-N-(4-morpholin-4-ylphenyl)-2-naphthalen-1-yloxypurin-6-amine |
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| 简称 | Purmorphamine | |
| 别名 |
UNII-PB12M2F8KY, Shh Signaling Antagonist VI, PB12M2F8KY |
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| 中文名 | N/A | |
| 化学式 | C31H32N6O2 | |
| 分子量 | 520.62 | |
| CAS号 | 483367-10-8 | |
| 纯度 | 98% | |
| 溶剂/溶解度 |
Water<1mg/ml; DMSO4mg/ml warming; Ethanol<1mg/ml |
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| 溶液配制 | 5mg加入0.96ml DMSO，或者每5.21mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SF6822-10mM用DMSO配制。 |
生物信息：
| 产品描述 | Purmorphamine直接结合并激活Smoothened，阻断BODIPY-cyclopamine与Smo结合，在HEK293T细胞中IC50约为1.5μM，也诱导成骨细胞分化，EC50为1μM。 | ||||
| 信号通路 | Stem Cells & Wnt; GPCR & G Protein | ||||
| 靶点 | Smoothened | － | － | － | － |
| IC50 | ~1.5μM | － | － | － | － |
| 体外研究 | Purmorphamine与Cyclopamine(一种Smo拮抗剂)竞争，直接结合和激活Smoothened，而激活Hedgehog通路，IC50为1.5μM。Purmorphamine作用于全能C3H10T1/2细胞，是有效的骨生成诱导剂。Purmorphamine作用于C3H10T1/2细胞的EC50(根据ALP表达)为1μM。Purmorphamine (1μM)和BMP-4(100ng/ml)联用，作用于3T3-L1细胞，使ALP活性增强90多倍。与BMP-4相比，Purmorphamine作用于多能间充质祖细胞，诱导骨生成，通过激活Hedgehog信号。 | ||||
| 体内研究 | Purmorphamine作用于基于大鼠结构的人间充质干细胞，上调ALP表达。 | ||||
| 临床实验 | N/A | ||||
| 特征 | N/A | ||||
相关实验数据(此数据来自于公开文献，碧云天并不保证其有效性)：
| 酶活性检测实验 | |
| 方法 | 使用BODIPY-Cyclopamine和过表达Smo的细胞进行Smo结合实验，使用CMV启动子，含SV40起点的表达载体，获得Smo-Myc3，缺失突变体Smo CRD (68到182位氨基酸缺失)和Smo CT (556到793位氨基酸缺失)。HEK 293T细胞在12孔板中的聚-D-赖氨酸处理的玻璃盖玻片上生长，直到70%汇合，然后使用FuGene 6，通过适当的表达载体(每孔0.5g)进行转染。转染两天后，HEK 293T细胞与含0.5%小牛血清，5nM BODIPY-Cyclopamine和不同浓度的Purmorphamine(0、1.5或5M)(每孔1ml)的DMEM培养基在37℃下温育1小时。然后使用1×PBS缓冲液(每孔1ml)洗涤过表达Smo的细胞，置于含DAPI的培养基，使用Leica DM4500B荧光显微镜观察。使用固定细胞进行结合检测，使用溶于1×PBS缓冲液(每孔1ml)的3%多聚甲醛在室温下固定过表达Smo的HEK293T细胞10分钟，然后使用含10mM甘氨酸和0.2%叠氮化钠的1×PBS缓冲液(每孔1ml)处理5分钟，使用1×PBS缓冲液(每孔1ml)洗涤，然后再使用含Purmorphamine的培养基在室温下处理4小时。 |
| 细胞实验 | |
| 细胞系 | C3H10T1/2细胞 |
| 浓度 | 0.5-10μM |
| 处理时间 | 4天 |
| 方法 | C3H10T1/2细胞在T175烧瓶中扩增，第13通道的细胞通过胰蛋白酶/EDTA分离，然后在生长培养基中稀释。使用Multi-dropTM液体传输系统，将产生的细胞悬浮液按每孔2500个细胞接种到黑色透明底384孔板中，孔中为100μl生长培养基。温育过夜后，细胞附着到孔的底部。使用Mini TrakTM多位分配系统，将溶于DMSO(500nl)的每组Purmorphamine储存液输送到对应孔中，确保Purmorphamine终浓度为5μM。然后细胞置于37℃下含5% CO2的空气中温育。4天后，除去培养基，10μl被动裂解缓冲液加入到每孔中。5分钟后，10μl碱性磷酸酶底物溶液添加到每孔中。在室温下温育15分钟后，在Acquest高通量酶标仪上对实验板进行读数。 |
| 动物实验 | |
| 动物模型 | N/A |
| 配制 | N/A |
| 剂量 | N/A |
| 给药方式 | N/A |
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| SF6822-10mM | Purmorphamine (Hedgehog/Smoothened激动剂) | 10mM×0.2ml |
| SF6822-5mg | Purmorphamine (Hedgehog/Smoothened激动剂) | 5mg |
| SF6822-25mg | Purmorphamine (Hedgehog/Smoothened激动剂) | 25mg |
| — | 说明书 | 1份 |
保存条件：
-20℃保存，至少一年有效。5mg和25mg包装也可室温保存，至少6个月有效。如果溶于非DMSO溶剂，建议分装后-80℃保存，预计6个月内有效。
