化学信息：
| 化学名 | tert-butyl (2S)-2-[[(2S)-2-[[2-(3,5-difluorophenyl)acetyl]amino]propanoyl]amino]-2-phenylacetate |
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| 简称 | DAPT | |
| 别名 |
DAPT (GSI-IX), Gamma-Secretase Inhibitor IX, CHEBI:86193, MFCD04974585 |
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| 中文名 | N/A | |
| 化学式 | C23H26F2N2O4 | |
| 分子量 | 432.46 | |
| CAS号 | 208255-80-5 | |
| 纯度 | 98% | |
| 溶剂/溶解度 |
Water<1mg/ml; DMSO86mg/ml; Ethanol50mg/ml |
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| 溶液配制 | 5mg加入1.16ml DMSO，或者每4.32mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SF4139-10mM用DMSO配制。 |
生物信息：
| 产品描述 | DAPT (GSI-IX)是一种新型γ-secretase抑制剂，抑制 Aβ产生，在HEK 293细胞中IC50为20nM。 | ||||
| 信号通路 | Proteases; Stem Cells & Wnt; Neuronal Signaling | ||||
| 靶点 | Aβ | γ secretase(Aβ) | － | － | － |
| IC50 | 20nM | 20nM | － | － | － |
| 体外研究 | DAPT功能性抑制γ-分泌酶而降低HEK 293细胞中全部Aβ产量，IC50为20nM。DAPT作用于原代培养的人神经细胞，也抑制Aβ产量，作用于全部Aβ和Aβ42时，IC50分别为115nM和200nM，比作用于HEK 293细胞时低5-10倍。最新研究显示DAPT抑制SK-MES-1细胞增殖，这种作用存在浓度依赖性，IC50为11.265μM。此外，DAPT作用于肺鳞状细胞癌细胞，通过抑制Notch受体信号通路，也诱导依赖型和非依赖型细胞凋亡。 | ||||
| 体内研究 | DAPT按100mg/kg剂量处理PDAPP小鼠，产生强劲和持久的药效，1小时内脑中DAPT水平超过100ng/g，且处理后，持续上升达18小时，3小时后的时候观察到最高水平为490ng/g。在此期间，DAPT按100mg/kg剂量处理，也降低大脑皮层全部Aβ和Aβ42，这种作用存在剂量依赖性，降低50%。DAPT按40mg/kg剂量作用于大鼠大脑皮层，抑制LPS诱导的γ分泌酶活性，且提高携带长期神经炎症的细胞凋亡。 | ||||
| 临床实验 | N/A | ||||
| 特征 | DAPT(GSI-IX)是新型γ-分泌酶抑制剂。 | ||||
相关实验数据(此数据来自于公开文献，碧云天并不保证其有效性)：
| 酶活性检测实验 | |
| 方法 | 转染APP751(HEK 293)基因的人类胚胎肾细胞，用于常规Aβ减少检测。细胞接种在96孔板上，在含10%热灭活胎牛血清的DMEM培养基上粘附过夜。DAPT在DMSO中稀释，终浓度为0.1% DMSO。使用DAPT在37℃下预处理细胞2小时，吸除培养基，使用新鲜实验化合物溶液。再处理2小时后，抽除条件培养基，使用标准ELISA(266-3D6)分析全部Aβ。根据使用0.1% DMSO处理的对照组细胞，测量Aβ产量的减少，表示为抑制百分数。实验至少按6种剂量重复进行，得到实验数据，然后使用XLfit软件拟合四参数方程，测定药性。培养的人和PDAPP小鼠神经细胞在无血清培养基上生长，增强他们的神经元特性，其中有90%以上神经元在实验使用前成熟。通过在每孔中加入新鲜培养基，然后在没有DAPT存在时，在37℃下温育24小时，收集条件培养基中得到的基底Aβ值。使用含DAPT的新鲜培养基，按所需浓度范围在37℃下再处理培养细胞24小时，收集条件培养基。为了测量全部Aβ，使用与HE2K 293细胞实验相同的ELISA(266-3D6)分析样本。通过分开的ELISA(21F12-3D6)，使用特定Aβ42 C-端捕获抗体，进行Aβ42产量分析。测定对全部Aβ和Aβ42产量的抑制情况。绘制与DAPT浓度相对的抑制百分数，使用 XLfit软件分析数据，测定药性。 |
| 细胞实验 | |
| 细胞系 | SK-MES-1 |
| 浓度 | 2.5μM到160μM |
| 处理时间 | 72小时 |
| 方法 | 细胞接种在96孔板上，使用0.1% DMSO或DAPT(浓度为2.5μM-160μM)处理72小时。使用MTT染料减少检测实验，稍微修正，测定细胞毒性。与DAPT温育后，20μl MTT溶液(5mg/ml，溶于PBS)加到含180μl培养基的每孔中，实验板在37℃下温育4小时，随后每孔加入150μl DMSO，在室温下震荡15分钟混合。通过酶联免疫吸附法在490nM处测定吸光值。使用α-MEM及等量的MTT溶液和溶剂，作为空白对照。使用PROBIT程序在SPSS中计算IC50值。 |
| 动物实验 | |
| 动物模型 | 过表达淀粉样前体蛋白APPV717F突变型的杂合PDAPP转基因小鼠 |
| 配制 | DAPT溶于玉米油，5% (v/v)乙醇中 |
| 剂量 | ≤100mg/kg |
| 给药方式 | 口服处理 |
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| SF4139-10mM | DAPT (γ-secretase抑制剂) | 10mM×0.2ml |
| SF4139-5mg | DAPT (γ-secretase抑制剂) | 5mg |
| SF4139-25mg | DAPT (γ-secretase抑制剂) | 25mg |
| — | 说明书 | 1份 |
保存条件：
-20℃保存，至少一年有效。5mg和25mg包装也可室温保存，至少6个月有效。如果溶于非DMSO溶剂，建议分装后-80℃保存，预计6个月内有效。
