化学信息：
| 化学名 | 3-[[6-(3-aminophenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl]oxy]phenol |
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| 简称 | TWS119 | |
| 别名 |
TWS 119, TWS-119 |
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| 中文名 | N/A | |
| 化学式 | C18H14N4O2 | |
| 分子量 | 318.33 | |
| CAS号 | 601514-19-6 | |
| 纯度 | 98% | |
| 溶剂/溶解度 |
Water<1mg/ml; DMSO64mg/ml; Ethanol<1mg/ml |
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| 溶液配制 | 5mg加入1.57ml DMSO，或者每3.18mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SF2771-10mM用DMSO配制。 |
生物信息：
| 产品描述 | TWS119是一种GSK-3β抑制剂，在无细胞试验中IC50为30nM；能够诱导神经细胞的分化，并且有助于干细胞生物学的研究。 | ||||
| 信号通路 | PI3K/Akt/mTOR; Stem Cells & Wnt | ||||
| 靶点 | GSK-3β | － | － | － | － |
| IC50 | 30nM | － | － | － | － |
| 体外研究 | 使用1μM TWS119处理P19细胞，使30-40%细胞进行分化，尤其分化为神经细胞谱，根据正确的神经元形态(通过标准EB形成法，且伴随着TWS119处理，产生60%神经分化)计数TuJ1阳性细胞。TWS119与GSK-3β(KD=126nM)紧密结合，通过表面等离子共振(SPR)量化，IC50为30nM。TWS119作用于小鼠胚胎癌和ES 细胞，有效诱导神经分化。TWS119处理肝星状细胞(HSC)，降低β-catenin磷酸化，诱导β-catenin核易位，提高谷氨酰胺合成酶产量，阻碍平滑肌肌动蛋白和Wnt5a合成，但促进胶质蛋白酸性蛋白，Wnt10b和成对的同源结构域转录因子2c的表达。TWS119触发β-catenin的迅速累积，增强与寡核苷酸(含Tcf和Lef结合的DNA序列)的核蛋白相互作用，且大幅上调Tcf7、Lef1和其他Wnt靶点基因包括Jun、Ezd7(编码Frizzled-7)、Nlk(编码Nemo样激酶)。TWS119 提高T细胞特定杀伤力和与保护IL-2的产生能力相关的IFN-g释放。最新研究显示TWS119处理多克隆活化人类T细胞，诱导Wnt信号。与表达CD45RO(+)CD62L(-)效应表型的对照激活T细胞相比，这些T细胞具有天然CD45RA(+)CD62L(+)表型，这种作用存在TWS119剂量依赖性。 | ||||
| 体内研究 | TWS119按30mg/kg计量处理细胞表面，细胞表达低水平CD44和高水平CD62L。 | ||||
| 临床实验 | N/A | ||||
| 特征 | N/A | ||||
相关实验数据(此数据来自于公开文献，碧云天并不保证其有效性)：
| 酶活性检测实验 | |
| 方法 | 在BIAcore S51仪器上在25℃下在PBS buffer中测量SPR。GSK-3β-GST融合蛋白的相对光单位(11000-17000)通过EDC[1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺]耦合程序固定在S系列CM5生物传感器芯片上。GSK-3β稀释到温和酸性缓冲液(10mM KAc, pH 5.0)中，然后在浓度为20-200μg/ml时注射到传感芯片(事先使用EDC(0.2M)和N-羟基丁二酰亚胺(NHS, 0.05M)的1:1混合物温育7分钟激活)中，注射7分钟。最后，通过注射7分钟乙醇胺(1M, pH 8.5)，而阻断生物传感器矩阵的未反应位点。随后,注射TWS119 90秒，浓度不断提高(0、2、4、8、16、32、62.5、125、250、500和1000nM), 随后300秒，GSK-3β-TWS119复合物解离。使用S51评价软件包对SPR进行测评。在四种不同表面进行两组独立滴定实验的数据值，取平均。假设 1:1结合模型，用于测定热力学和动力学结合系数。 |
| 细胞实验 | |
| 细胞系 | 大鼠肝星状细胞(HSC) |
| 浓度 | N/A |
| 处理时间 | 4小时和48小时 |
| 方法 | 使用酶连续灌注而分离雄性Wistar大鼠(体重为500-600g)肝星状细胞，通Nycodenz密度梯度离心而富集。由于其高脂肪含量，HSC富集在梯度离心的上层。HSC培养在含10% FCS，100U/ml青霉素和100g/ml链霉亲和素的DMEM培养基中。细胞按1000000个(HSC 7d)和2000000个(HSC 1d)的密度接种在每个培养皿(直径6cm)中。HSC培养1和7天，然后使用TWS119处理。使用DMSO制备10mM TWS119储存液。对照组用DMSO单独处理。在无血清条件下，加入TWS119 4小时和48小时。在实验培养基中只加入血清，测定HSC的DNA合成。然后进行western blot分析，免疫荧光染色和RT-PCR，用于测量生物学变化。 |
| 动物实验 | |
| 动物模型 | Pmel-1 TCR-转基因小鼠和pmel-1 ly5.1双转基因小鼠和pmel-1 Thy1.1双转基因小鼠 |
| 配制 | TWS119溶于DMSO |
| 剂量 | 30mg/kg |
| 给药方式 | 腹腔注射 |
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| SF2771-10mM | TWS119 (GSK-3抑制剂) | 10mM×0.2ml |
| SF2771-5mg | TWS119 (GSK-3抑制剂) | 5mg |
| SF2771-25mg | TWS119 (GSK-3抑制剂) | 25mg |
| — | 说明书 | 1份 |
保存条件：
-20℃保存，至少一年有效。5mg和25mg包装也可室温保存，至少6个月有效。如果溶于非DMSO溶剂，建议分装后-80℃保存，预计6个月内有效。
