化学信息：
| 化学名 | 1-[(4-methoxyphenyl)methyl]-3-(5-nitro-1,3-thiazol-2-yl)urea |
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| 简称 | AR-A014418 | |
| 别名 |
AR A014418, AR-AO 14418, IN1309, AR-A 014418 |
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| 中文名 | N/A | |
| 化学式 | C12H12N4O4S | |
| 分子量 | 308.31 | |
| CAS号 | 487021-52-3 | |
| 纯度 | 98% | |
| 溶剂/溶解度 |
Water<1mg/ml; DMSO62mg/ml; Ethanol<1mg/ml |
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| 溶液配制 | 5mg加入1.62ml DMSO，或者每3.08mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SF2744-10mM用DMSO配制。 |
生物信息：
| 产品描述 | AR-A014418是一种ATP竞争性和选择性的GSK3β抑制剂，无细胞试验中IC50和Ki为104nM和38nM，而对被测试的其他26种激酶没有显著抑制作用。 | ||||
| 信号通路 | PI3K/Akt/mTOR; Stem Cells & Wnt | ||||
| 靶点 | GSK-3β | － | － | － | － |
| IC50 | 38nM(Ki) | － | － | － | － |
| 体外研究 | 在3T3成纤维细胞中，AR-A014418抑制GSK3特定位点(丝氨酸396)τ蛋白磷酸化，其IC50是2.7μM，进而保护N2A细胞免遭抑制PI3K/PKB信号通路引起的死亡。在海马切片中，AR-A014418抑制由β样淀粉肽诱导的神经退化。在NGP细胞和SH-5Y-SY细胞中，AR-A014418抑制神经内分泌标志物，抑制神经瘤细胞的生长。 | ||||
| 体内研究 | 在SOD1蛋白G93A突变肌萎缩性脊髓侧索硬化症的小鼠模型中，腹腔注射AR-A014418(0-4mg/kg, i.p.)能够延长症状的发生，增加肌肉活力，减慢疾病发生。此外，AR-A014418通过调节脊髓中的NMDA和代谢型受体信号通路和TNF-α和IL-1β的释放来发挥对小鼠乙酸和甲醛诱导的伤害感受的抑制作用。 | ||||
| 临床实验 | N/A | ||||
| 特征 | 细胞渗透性GSK3选择性抑制剂。 | ||||
相关实验数据(此数据来自于公开文献，碧云天并不保证其有效性)：
| 酶活性检测实验 | |
| 方法 | 竞争性实验是在干净底部的孔板中用10个不同的浓度梯度重复两次来测定的。 生物素标记的多肽biotin-AAEELDSRAGS(PO3H2)PQL以2μM的浓度加入到含有6单位的重组人GSK3(α和β等量混合)12mM MOPS，pH 7.0，0.3mM EDTA，0.01% β-mercaptoethanol，0.004% Brij 35，0.5% glycerol和0.5μg牛血清蛋白/25μl中孵育10-15分钟。在50mM Mg(Ac)2中加入0.04μCi [γ-33P]ATP和未标记的ATP，ATP的终浓度是1μM，反应体积是25ul，使反应开始进行。使用不加多肽底物作为空白对照。 室温孵育20分钟以后，用含有5mM EDTA，50μM ATP，0.1% Triton X-100，以及0.25mg链霉亲和素包被具有35pmol的结合能力的珠子来终止反应。6小时以后，用液体闪烁计数器测定放射性。用GraphPad Prism通过非线性回归来分析抑制曲线。 |
| 细胞实验 | |
| 细胞系 | N2A细胞 |
| 浓度 | ~50μM |
| 处理时间 | 24小时 |
| 方法 | 细胞活性通过钙黄绿素和碘化吡啶摄入来测定。活细胞具有酯酶，能够将钙黄绿素摄入和排出，产生黄绿荧光。碘化吡啶只能被死细胞摄入，产生橘红色荧光。简单的说，N2A细胞在体外培养2天，然后在AR-A014418或者载体(DMSO)存在下用50μM LY-294002处理24小时。然后，N2A细胞在2μM PI和1μM钙黄绿素-AM存在下孵育30分钟。随后培养基用包含2mM CaCl2的Hanks'缓冲盐溶液洗3次，细胞通过Zeiss Axiovert 135荧光显微镜进行观察。分析3个区域(随机挑选)至少3个不同实验中每孔的情况(大约300个细胞每个区域)。以PI染色阳性的细胞比上总的细胞的比值作为细胞死亡的百分比。在每次试验中，每次都是扣除空白对照中死亡的细胞数之后计算的。 |
| 动物实验 | |
| 动物模型 | 携带G93A突变体人类SOD1的ALS小鼠模型。 |
| 配制 | 生理盐水 |
| 剂量 | ~4毫克/千克 |
| 给药方式 | 腹腔注射 |
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| SF2744-10mM | AR-A014418 (GSK-3抑制剂) | 10mM×0.2ml |
| SF2744-5mg | AR-A014418 (GSK-3抑制剂) | 5mg |
| SF2744-25mg | AR-A014418 (GSK-3抑制剂) | 25mg |
| — | 说明书 | 1份 |
保存条件：
-20℃保存，至少一年有效。5mg和25mg包装也可室温保存，至少6个月有效。如果溶于非DMSO溶剂，建议分装后-80℃保存，预计6个月内有效。
