化学信息：
| 化学名 | 4-[[(7R)-8-cyclopentyl-7-ethyl-5-methyl-6-oxo-7H-pteridin-2-yl]amino]-3-methoxy-N-(1-methylpiperidin-4-yl)benzamide |
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| 简称 | BI2536 | |
| 别名 |
BI 2536, BI-2536 |
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| 中文名 | N/A | |
| 化学式 | C28H39N7O3 | |
| 分子量 | 521.66 | |
| CAS号 | 755038-02-9 | |
| 纯度 | 98% | |
| 溶剂/溶解度 |
Water<1mg/ml; DMSO21mg/ml; Ethanol100mg/ml |
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| 溶液配制 | 5mg加入0.96ml DMSO，或者每5.22mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SC6578-10mM用DMSO配制。 |
生物信息：
| 产品描述 | BI 2536是一种有效的Plk1抑制剂，无细胞试验中IC50为0.83nM，比作用于Plk2和Plk3选择性分别高4和11倍。Phase 2。 | ||||
| 信号通路 | Cell Cycle | ||||
| 靶点 | PLK1 | PLK2 | PLK3 | PI3Kα | Met |
| IC50 | 0.83nM | 3.5nM | 9.0nM | 2.407μM | 4.754μM |
| 体外研究 | 除了Plk1，BI 2536也抑制Plk2和Plk3活性，只是抑制程度低点，IC50分别为3.5nM和9.0nM。BI 2536比一组63种其他蛋白激酶(IC50>10μM)选择性高1000多倍。BI 2536按10nM到100nM剂量作用于HeLa细胞，抑制有丝分裂中心体中γ-微管蛋白招募和Apc6磷酸化，抑制染色体臂中释放黏结蛋白、诱导产生单极主轴及一些依赖Plk1的其他有丝分裂过程。与作用于Plk1 RNAi效果相一致，BI 2536处理HeLa细胞，使细胞周期停在G2/M期，随后DNA分解及凋亡，且累积断裂的PARP p85片段，这种作用存在浓度依赖性。BI 2536抑制一组32种人肿瘤细胞系生长，EC50为2-25nM,抑制指数生长的hTERT-RPE1，人脐静脉内皮细胞(HUVECs)和正常大鼠肾脏(NRK)细胞的增殖，EC50为12-31nM。BI 2536抑制Plk1，降低甲状腺未分化癌(ATC)细胞如CAL62、OCUT-1、SW1736、8505C和ACT-1的生长的生长和活力，EC50为1.4-5.6nM。 | ||||
| 体内研究 | BI 2536静脉注射给药多种移植瘤模型，每周一次或两次，效果都很好，通过使细胞周期停滞而抑制细胞增殖，随后诱导肿瘤细胞死亡。BI 2536按50mg/kg剂量处理HCT 116移植瘤，每周一次或两次，显著抑制肿瘤生长，T/C分别为15%和0.3%。BI 2536每周处理两次BxPC-3和A549模型，也显著抑制肿瘤生长，T/C分别为5%和14%。 | ||||
| 临床实验 | N/A | ||||
| 特征 | BI 2536是第一个有效的Plk1选择性抑制剂，抑制Plk1的标记。 | ||||
相关实验数据(此数据来自于公开文献，碧云天并不保证其有效性)：
| 酶活性检测实验 | |
| 方法 | 重组人Plk1(1-603残基)作为氮端，携带杆状病毒表达系统的GST-标记的融合蛋白通过亲和层析，使用谷胱甘肽-琼脂糖而纯化。在梯度稀释的BI 2536存在时，使用20ng重组激酶，及10μg牛奶中的酪蛋白作为底物进行Plk1酶活性实验。在终体积为60μl的混合物(15mM MgCl2，25mM MOPS[pH 7.0]，1mM DTT，1% DMSO，7.5mM ATP，0.3μCi γ-33P-ATP)中30℃下进行激酶反应45分钟。加入125μl冰冻的5% TCA终止反应。沉淀物转移到混合酯纤维素的多屏过滤板上，使用1% TCA冲洗实验板，然后利用放射性进行测量。绘制剂量反应曲线，而计算IC50值。 |
| 细胞实验 | |
| 细胞系 | HeLa, A43, SKOV-3, HT-29, K562, A549, Saos-2, MCF7, HCT116, COLO 205, Hep G2, Raji, PC-3 |
| 浓度 | 溶于DMSO，终浓度为~1μM |
| 处理时间 | 24和72小时 |
| 方法 | 使用不同浓度BI 2536处理细胞24和72小时。在荧光分光光度计中测量Alamar Blue染料转换而测定细胞生长。为了测定培养基中DNA含量，细胞悬液在80%乙醇中混合，使用溶于PBS的0.25% Triton X-100处理5分钟，然后与0.1% RNase和溶于PBS的10μg/ml碘化丙啶在室温下温育20分钟。通过流式细胞仪分析而测定细胞周期谱。 |
| 动物实验 | |
| 动物模型 | 皮下注射HCT 116、NCI-H460或A549细胞的雌性BomTac：NMRI-Foxn1nu小鼠 |
| 配制 | 在盐酸(0.1N)中配制，然后在0.9% NaCl中稀释。 |
| 剂量 | ~50mg/kg |
| 给药方式 | 静脉注射，每周一到两次 |
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| SC6578-10mM | BI2536 (PLK抑制剂) | 10mM×0.2ml |
| SC6578-5mg | BI2536 (PLK抑制剂) | 5mg |
| SC6578-25mg | BI2536 (PLK抑制剂) | 25mg |
| — | 说明书 | 1份 |
保存条件：
-20℃保存，至少一年有效。5mg和25mg包装也可室温保存，至少6个月有效。如果溶于非DMSO溶剂，建议分装后-80℃保存，预计6个月内有效。
