化学信息：
| 化学名 | 5-(1H-indol-3-ylmethyl)-3-methyl-2-sulfanylideneimidazolidin-4-one |
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| 简称 | Necrostatin-1 | |
| 别名 |
Nec-1 compound, Nec-1, Necrostatin 1, Necrostatin1 |
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| 中文名 | N/A | |
| 化学式 | C13H13N3OS | |
| 分子量 | 259.33 | |
| CAS号 | 4311-88-0 | |
| 纯度 | 98% | |
| 溶剂/溶解度 |
Water<1mg/ml; DMSO51mg/ml warming; Ethanol<1mg/ml |
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| 溶液配制 | 5mg加入1.93ml DMSO，或者每2.59mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SC4359-10mM用DMSO配制。 |
生物信息：
| 产品描述 | Necrostatin-1是一种特异性RIP1抑制剂，抑制TNF-α诱导的细胞坏死，在293T细胞中EC50为490nM。 | ||||
| 信号通路 | Apoptosis | ||||
| 靶点 | RIP1 | － | － | － | － |
| IC50 | 490nM(EC50) | － | － | － | － |
| 体外研究 | Necrostatin-1(1-100μM)抑制过表达和内源性的RIP1发生自磷酸化。RIP1是初级细胞靶点，负责Necrostatin-1的抗细胞坏死活性。Necrostatin-1有效抑制多种类型细胞触发的坏死性细胞死亡。Necrostatin-1作为细胞坏死的小分子抑制剂，作用于jurkat细胞，抑制RIP激酶的诱导细胞坏死，抑制TNF-α诱导的细胞坏死，EC50为490nM。 | ||||
| 体内研究 | N/A | ||||
| 临床实验 | N/A | ||||
| 特征 | Necrostatin-1是抑制细胞坏死的有力工具。 | ||||
相关实验数据(此数据来自于公开文献，碧云天并不保证其有效性)：
| 酶活性检测实验 | |
| 方法 | RIP1的磷酸化需要其激酶活性。FLAG标记的野生型(WT)或RIP1(K45M)突变体失活激酶的表达结构转染到293T细胞中，在有[γ-32P]ATP存在时，RIP1激酶实验在30℃下进行30分钟。样品进行SDS-PAGE，通过放射自显影可观察到RIP1带。对放射性带的相对强度进行量化，并显示比率。在激酶反应的同时，珠样本使用anti-RIP1抗体进行Western Blot分析，确保与激酶反应中等量的蛋白。 |
| 细胞实验 | |
| 细胞系 | Jurkat，BALB/c 3T3，SV40-转化的MEF，L929 |
| 浓度 | 0.01-100μM |
| 处理时间 | N/A |
| 方法 | 细胞接种在96孔板中(白色板进行发光检测;黑色板进行荧光检测;空白板进行MTT实验)贴壁细胞按每孔5000-10000个细胞的密度接种，悬浮细胞按每孔20000-50000个细胞的密度接种，孔中含100μl合适的无酚红培养基。温育后，使用如下方法之一测定细胞存活率。ATP实验中，使用购买的发光试剂盒，并使用Wallac Victor II酶标仪分析发光值。Sytox实验中,细胞与1μM Sytox Green试剂在37℃下温育30分钟，然后进行荧光读数。随后，增加5μl 20% Triton X-100溶液到每孔中，产生最大溶解，细胞37℃下温育1小时，然后进行二次读数。Triton处理前和后，计算值的比率。MTT实验，使用CellTiter 96 AQueous非放射性细胞增殖检测试剂盒。PI排除实验中，加入2μg/ml PI到培养基中，立即使用FACSCalibur分析样品。PI-膜联蛋白V实验中，使用ApoAlert Annexin V-EGFP凋亡试剂盒。进行DioC6染色，细胞与40nM DiOC6在37℃下温育30分钟，洗涤一次，使用FACSCalibur分析。ROS分析中，细胞与5μM Dihydroethidium在37℃下温育30分钟，洗涤一次，使用FACSCalibur分析。 |
| 动物实验 | |
| 动物模型 | N/A |
| 配制 | N/A |
| 剂量 | N/A |
| 给药方式 | N/A |
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| SC4359-10mM | Necrostatin-1 (TNF-alpha抑制剂) | 10mM×0.2ml |
| SC4359-5mg | Necrostatin-1 (TNF-alpha抑制剂) | 5mg |
| SC4359-25mg | Necrostatin-1 (TNF-alpha抑制剂) | 25mg |
| — | 说明书 | 1份 |
保存条件：
-20℃保存，至少一年有效。5mg和25mg包装也可室温保存，至少6个月有效。如果溶于非DMSO溶剂，建议分装后-80℃保存，预计6个月内有效。
