化学信息：
| 化学名 | (±)-4-[4,5-bis(4-chlorophenyl)-2-(4-methoxy-2-propan-2-yloxyphenyl)-4,5-dihydroimidazole-1-carbonyl]piperazin-2-one |
|
| 简称 | NUTLIN 3 | |
| 别名 | Nutlin-3, nutlin 3, (±)-NUTLIN 3 | |
| 中文名 | N/A | |
| 化学式 | C30H30Cl2N4O4 | |
| 分子量 | 581.5 | |
| CAS号 | 890090-75-2；548472-68-0 | |
| 纯度 | 98% | |
| 溶剂/溶解度 |
Water<1mg/ml; DMSO100mg/ml; Ethanol30mg/ml |
|
| 溶液配制 | 5mg加入0.86ml DMSO，或者每5.82mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SC4350-10mM用DMSO配制。 |
生物信息：
| 产品描述 | Nutlin-3是一种有效的，选择性Mdm2(它自身和p53的环指依赖性泛素蛋白连接酶)拮抗剂，无细胞试验中IC50为180nM；可稳定p53缺陷细胞中的p73。Nutlin-3是Nutlin-3A((-)-Nutlin-3)和Nutlin-3B ((+)-Nutlin-3)的混合物，其中Nutlin-3B的活性比Nutlin-3A的作用效果低150倍，Nutlin-3的活性介于Nutlin-3A和Nutlin-3B之间。 | ||||
| 信号通路 | Apoptosis | ||||
| 靶点 | Mdm2 (Cell-free assay) | － | － | － | － |
| IC50 | 180nM | － | － | － | － |
| 体外研究 | Nutlin-3有效抑制MDM2-p53相互作用，IC50为180nM，导致p53通路激活。Nutlin-3处理含野生型p53的细胞，如HCT116、RKO和SJSA-1，诱导MDM2和p21表达，且具有有效的抗增殖活性，IC50为~1.5μM，但是作用于含突变型p53的细胞系SW480和MDA-MB-435没有效果。10μM Nutlin-3处理SJSA-1细胞48小时，显著诱导caspase依赖的细胞凋亡，凋亡达~45%。虽然Nutlin-3也抑制人皮肤(1043SK)和小鼠胚胎(NIH/3T3)的生长和活力，IC50分别为2.2μM和1.3μM，10μM Nutlin-3处理一周后仍保留细胞活力，而3μM Nutlin-3处理SJSA-1细胞后，细胞则无活力。Nutlin-3不诱导p53在关键丝氨酸残基的磷酸化，在特定DNA结合序列没有区别，且与基因毒性药物Doxorubicin和Etoposide诱导的磷酸化p53相比，使p53靶点基因转活，说明p53在关键丝氨酸残基的磷酸化对转录激活和凋亡是非必需的。虽然与MDM2相比，Nutlin-3与MDMX结合的效率低一点，Nutlin-3作用于视网膜母细胞瘤细胞(Weri1)，能抑制MDMX-p53相互作用，且诱导p53通路，IC50为0.7μM。30μM Nutlin-3作用于无野生型p53的细胞，也扰乱内源性p73-HDM2相互作用，且增强p73稳定性和促凋亡活性，导致细胞生长受抑制和诱导凋亡。 | ||||
| 体内研究 | Nutlin-3按200mg/kg剂量口服处理，每天两次，持续3周，显著抑制SJAS-1移植瘤生长，抑制达90%，而Doxorubicin抑制81%肿瘤生长。 | ||||
| 临床实验 | N/A | ||||
| 特征 | N/A | ||||
相关实验数据(此数据来自于公开文献，碧云天并不保证其有效性)：
| 酶活性检测实验 | |
| 方法 | 在Biacore S51上进行竞争性实验。衍生一系列S传感器芯片CM5，用于固定PentaHis抗体，为了捕获 His-标记的p53。捕获的水平为~200反应单位(1反应单位对应于1pg蛋白/mm2)。MDM2蛋白浓度一直维持在300nM。Nutlin-3溶于DMSO，浓度为10mM，然后进一步稀释，在每个MDM2实验样本中产生系列浓度的Nutlin-3。在电泳缓冲液(10mM Hepes、0.15M NaCl、2% DMSO)中25℃下进行实验。在Nutlin-3存在时，计算MDM2-p53结合情况，作为结合百分数，使用Microsoft Excel计算IC50。 |
| 细胞实验 | |
| 细胞系 | HCT116, RKO, SJSA-1, SW480, MDA-MB-435 |
| 浓度 | 溶于DMSO，终浓度为~30μM |
| 处理时间 | 8、24和48小时 |
| 方法 | 使用不同浓度Nutlin-3处理细胞8, 24和48小时。通过实时PCR分析p21和MDM2基因转录水平，通过Western Blotting分析蛋白水平。通过MTT实验测定细胞活力。通过末端脱氧核苷酸转移酶调节的脱氧尿苷三磷酸缺口末端标记法(TUNEL)染色，使用流式细胞仪和荧光显微镜测定细胞凋亡。 |
| 动物实验 | |
| 动物模型 | 皮下注射SJSA-1细胞的雌性无胸腺Nu/Nu-nuBR裸鼠 |
| 配制 | 在2% Klucel，0.5% Tween-80配制中配制 |
| 剂量 | 200mg/kg |
| 给药方式 | 口服处理，每天两次 |
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| SC4350-10mM | NUTLIN 3 (Mdm2拮抗剂) | 10mM×0.2ml |
| SC4350-5mg | NUTLIN 3 (Mdm2拮抗剂) | 5mg |
| SC4350-25mg | NUTLIN 3 (Mdm2拮抗剂) | 25mg |
| — | 说明书 | 1份 |
保存条件：
-20℃保存，至少一年有效。5mg和25mg包装也可室温保存，至少6个月有效。如果溶于非DMSO溶剂，建议分装后-80℃保存，预计6个月内有效。
