化学信息：
| 化学名 | 1-tert-butyl-3-(4-chlorophenyl)pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-4-amine |
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| 简称 | PP2 | |
| 别名 |
AG1879, AG-1879, AG 1879, PP2 cpd, Src family kinase inhibitor PP2 |
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| 中文名 | N/A | |
| 化学式 | C15H16ClN5 | |
| 分子量 | 301.77 | |
| CAS号 | 172889-27-9 | |
| 纯度 | 98% | |
| 溶剂/溶解度 |
Water<1mg/ml; DMSO60mg/ml; Ethanol2mg/ml |
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| 溶液配制 | 5mg加入1.66ml DMSO，或者每3.02mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SC1234-10mM用DMSO配制。 |
生物信息：
| 产品描述 | PP2是一种Src家族激酶抑制剂，有效抑制Lck/Fyn，无细胞试验中IC50为4nM/5nM，作用于EGFR效果低100倍左右，对ZAP-70、JAK2和PKA没有活性。 | ||||
| 信号通路 | Angiogenesis | ||||
| 靶点 | LCK | Fyn | EGFR | JAK2 | ZAP70 |
| IC50 | 4nM | 5nM | 480nM | >50μM | >100μM |
| 体外研究 | PP2(5μM)作用于NIH3T3 和NIH-RET/PTC3细胞裂解液，抑制体内RET/PTC1肿瘤蛋白的磷酸化和信号。PP2(5μM)作用于转化RET/PTC1的NIH3T3成纤维细胞和携带自发性RET/PTC1重排的两种人类甲状腺乳头状癌细胞系TPC1和FB2，抑制血清非依赖性的生长。PP2(5μM)抑制TPC1细胞I型胶原基质入侵。PP2通过结合到分子的与ATP结合结构域不重叠的某一区域，而抑制Src。PP2(20μM)抑制40-50% HT29细胞生长，处理1小时，该浓度降低Src活性，并维持抑制35% Src活性达2天。PP2(100mM)作用于HT29细胞，降低Src活性，这种作用具有剂量依赖性。PP2(1mM-100mM) 抑制人类结肠癌细胞(HT29、SW480和PMCO1)，肝癌细胞(PLC/PRF/5、KYN-2、Li7和HepG2)和乳腺癌细胞(MCF-7、MDA-MB-468和BT-474)生长，这种作用具有剂量依赖性。PP2(20μM)显著促进大部分癌细胞(HT29、SW480、PMCO1、PLC/PRF/5、KYN-2、Li7、MCF-7和MDA-MB-468)聚合，这种作用具有E-钙粘蛋白依赖性。PP2(20μM)作用于癌细胞，增强E-钙粘蛋白表达，且强促进E-钙粘蛋白与肌动蛋白细胞骨架的关联。PP2(20μM)作用于HT29细胞，增强α-catenin、β-catenin和γ-catenin表达，而作用于PLC/PRF/5和MCF-7细胞，α-catenin的总蛋白水平没有改变，但β-catenin和γ-catenin水平稍微增长。PP2抑制两种宫颈癌细胞(HeLa和SiHa)增殖，这种作用具有时间和剂量依赖性。PP2(10μM)作用于HeLa和SiHa细胞，下调pSrc-Y416、pEGFR-Y845和-Y1173表达水平。PP2(10μM)通过上调HeLa和SiHa细胞的p21(Cip1)和p27(Kip1)，及下调HeLa细胞的cyclin A和细胞周期蛋白依赖性激酶-2,-4(Cdk-2,-4)的表达和下调SiHa细胞的cyclin B和Cdk-2表达，可以调节细胞周期停滞。 | ||||
| 体内研究 | PP2每天按5mg/kg剂量处理脾脏接种HT29细胞的SCID小鼠，与对照组相比，降低原代肿瘤的生长率。PP2每天按5mg/kg剂量处理脾脏接种HT29细胞的SCID小鼠，与对照组相比，显著降低了相对肝重和肝转移量。PP2按1.5mg/kg剂量腹腔注射处理局灶性脑缺血损伤的大鼠，降低约50%梗死面积。PP2按1.5mg/kg剂量腹腔处理局灶性脑缺血损伤的大鼠，与对照组相比，具有更好的神经功能评分。 | ||||
| 临床实验 | N/A | ||||
| 特征 | N/A | ||||
相关实验数据(此数据来自于公开文献，碧云天并不保证其有效性)：
| 酶活性检测实验 | |
| 方法 | 使用适当的质粒瞬时转染亚融合的HEK293细胞，然后溶解在裂解液中。使用所需的抗体进行蛋白免疫沉淀，使用蛋白A琼脂糖珠回收免疫复合物，使用激酶缓冲液洗涤5次，在有PP2或空白对照存在时，在含200μM聚(L-谷氨酸-L-酪氨酸)(聚-GT)，2.5μCi[γ-32P]ATP和未标记的ATP(终浓度为20μM)的激酶缓冲液中室温下温育20分钟。样品点样在Whatman 3MM纸上，使用1%正磷酸洗涤五次。使用β-闪烁计数器测量32P摄入率。使用谷胱甘肽琼脂糖凝胶纯化来自HEK293细胞裂解液中的谷胱甘肽-S-转移酶(GST)-RET/酪氨酸激酶(TK)。 |
| 细胞实验 | |
| 细胞系 | HT29、SW480、PMCO1、PLC/PRF/5、KYN-2、Li7、HepG2、MCF-7、MDA-MB-468和BT-474细胞系 |
| 浓度 | ~100μM |
| 处理时间 | 2天 |
| 方法 | 使用体外毒理学检测试剂盒测定细胞活力。在实验第0天，细胞接种在96孔板中。实验第1天，使用浓度不断增加的PP2 (1μM、10μM和100μM)处理细胞2天。末期时，通过比色法，根据MTT裂解，通过活细胞中线粒体脱氢酶，形成甲臜，测评细胞增殖。使用10种实验浓度，重复进行此实验三次。 |
| 动物实验 | |
| 动物模型 | 脾脏接种HT29细胞的SCID小鼠 |
| 配制 | 1% DMSO |
| 剂量 | 5mg/kg/day |
| 给药方式 | 腹腔注射 |
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| SC1234-10mM | PP2 (Src抑制剂) | 10mM×0.2ml |
| SC1234-5mg | PP2 (Src抑制剂) | 5mg |
| SC1234-25mg | PP2 (Src抑制剂) | 25mg |
| — | 说明书 | 1份 |
保存条件：
-20℃保存，至少一年有效。5mg和25mg包装也可室温保存，至少6个月有效。如果溶于非DMSO溶剂，建议分装后-80℃保存，预计6个月内有效。
