化学信息：
| 化学名 | 1-tert-butyl-3-(4-methylphenyl)pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-4-amine |
|
| 简称 | PP1 | |
| 别名 |
PP 1, PP-1 |
|
| 中文名 | N/A | |
| 化学式 | C16H19N5 | |
| 分子量 | 281.36 | |
| CAS号 | 172889-26-8 | |
| 纯度 | 98% | |
| 溶剂/溶解度 |
Water<1mg/ml; DMSO4mg/ml; Ethanol<1mg/ml |
|
| 溶液配制 | 5mg加入1.78ml DMSO，或者每2.81mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SC1225-10mM用DMSO配制。 |
生物信息：
| 产品描述 | PP1是一种有效的Src选择性抑制剂，作用于Lck/Fyn时，IC50为5nM/6nM。 | ||||
| 信号通路 | Angiogenesis | ||||
| 靶点 | LCK | Fyn | Kit | EGFR | Bcr-Abl |
| IC50 | 5nM | 6nM | ~75nM | 250nM | 1μM |
| 体外研究 | PP1是一种纳摩尔级的Lck和FynT抑制剂，作用于T细胞，抑制anti-CD3诱导的蛋白-酪氨酸激酶活性，IC50为0.5μM，作用于Lck和FynT选择性比ZAP-70高，且与非T细胞依赖性的12-豆蔻酸-13-乙酸佛波醇/IL-2诱导的T细胞增殖相比，PP1优先抑制T细胞受体依赖性的anti-CD3诱导的T细胞增殖(IC50为0.5μM)。PP1(1μM)选择性抑制IL-2基因的诱导，但不抑制粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子或IL-2受体基因。PP1也抑制Src(IC50为170nM)和Hck(IC50,20nM)。PP1抑制A-431表皮生长因子受体自磷酸化(IC50为0.25μM)效果低50-100倍。PP1也抑制Kit和Bcr-Abl 酪氨酸激酶，IC50分别为75nM和1μM。PP1完全废除响应SCF的M07e细胞增殖，IC50为0.5-1μM。PP1(1μM) 作用于完整细胞，抑制SCF诱导的c-Kit自磷酸化，且抑制MAPK和Akt的活化。PP1抑制肥大细胞疾病中发现的c-Kit组成性突变激活形式(D814V和D814Y)的活性，作用于表达突变型c-Kit的大鼠嗜碱性的白血病细胞系RBL-2H3，并触发细胞凋亡。PP1作用于表达Bcr-Abl的FDCP1细胞，降低转录因子5和MAPK的信号转导和激活，且促发凋亡。 | ||||
| 体内研究 | N/A | ||||
| 临床实验 | N/A | ||||
| 特征 | N/A | ||||
相关实验数据(此数据来自于公开文献，碧云天并不保证其有效性)：
| 酶活性检测实验 | |
| 方法 | 使用1×PBS按1:20稀释 酸处理过的烯醇化酶，然后按100ml再分装到Nunc96孔高蛋白结合实验板中。然后吸除实验孔，使用0.5%牛血清，1×PBS在37℃下抑制1小时，然后每孔使用300ml 1×PBS洗涤5次。Lck的来源是LSTRA细胞，或使用牛痘表达系统表达Lck的HeLa细胞。FynT通过牛痘表达系统在HeLa细胞中表达。细胞(12.5×106ml)在裂解缓冲液(20mM Tris，pH 8.0，150mM NaCl，0.5% Nonidet P-40和23胰蛋白酶抑制单位/ml抑肽酶)中裂解，裂解物在Eppendorf管中通过14000cpm转速下在4℃环境中离心14分钟而澄清。澄清的裂解物与合适的10μg/ml anti-激酶抗体在4℃下温育2小时。蛋白A琼脂糖珠添加到250μl/ml抗体/裂解物的混合物中，在4℃下温育30分钟。琼脂糖珠在1ml裂解缓冲液洗涤两次，然后在1ml激酶缓冲液(25mM HEPES，3mM MnCl2，5mM MgCl2和100μM原钒酸钠)中再洗涤两次，然后再悬浮在50%(w/v)激酶缓冲液中。25μl琼脂糖珠悬浮液添加到烯醇化酶包被的96孔高蛋白结合板的每孔中，与适当浓度的化合物和[γ-32P]ATP(每孔25μl 200μCi/ml溶液，溶于激酶缓冲液)一起。孔中添加含10mM ATP的60μl沸腾的2×溶解缓冲液，终止反应。孔中移除30μl样品，煮沸5分钟，并在7.5% SDS-聚丙烯酰胺凝胶上跑胶。随后干燥凝胶，使用Kodak X-AR胶片处理。为了定量分析采用分子动力学激光扫描仪进行胶片扫描，测定主要的底物带的光密度，烯醇化酶p46。为了测量化合物抗Lck的活性，使用50mM EDTA，1mM ATP在Skatron收集器上洗涤实验板两轮。然后每孔加入100μl闪烁液，使用micro-β-counter测量32P摄入率。 |
| 细胞实验 | |
| 细胞系 | N/A |
| 浓度 | N/A |
| 处理时间 | N/A |
| 方法 | N/A |
| 动物实验 | |
| 动物模型 | N/A |
| 配制 | N/A |
| 剂量 | N/A |
| 给药方式 | N/A |
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| SC1225-10mM | PP1 (Src抑制剂) | 10mM×0.2ml |
| SC1225-5mg | PP1 (Src抑制剂) | 5mg |
| SC1225-25mg | PP1 (Src抑制剂) | 25mg |
| — | 说明书 | 1份 |
保存条件：
-20℃保存，至少一年有效。5mg和25mg包装也可室温保存，至少6个月有效。如果溶于非DMSO溶剂，建议分装后-80℃保存，预计6个月内有效。
