化学信息：
| 化学名 | 6-chloro-2,3,4,9-tetrahydro-1H-carbazole-1-carboxamide |
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| 简称 | EX 527 | |
| 别名 |
EX-527; EX527 cpd; Selisistat; SEN0014196; SIRT1 Inhibitor III; HY-15452 |
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| 中文名 | － | |
| 化学式 | C13H13ClN2O | |
| 分子量 | 248.71 | |
| CAS号 | 49843-98-3 | |
| 纯度 | 100.0% | |
| 溶剂/溶解度 |
Water <1mg/ml; DMSO 50mg/ml; Ethanol 18mg/ml |
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| 溶液配制 | 5mg加入2.01ml DMSO，或者每2.49mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SC0281-10mM用DMSO配制。 |
生物信息：
| 产品描述 | EX 527 (Selisistat)是一种有效的，选择性SIRT1抑制剂，无细胞试验中IC50为38nM，比作用于SIRT2和SIRT3选择性高200倍以上。Phase 2。 | ||||
| 信号通路 | Epigenetics; DNA Damage | ||||
| 靶点 | SIRT1 | － | － | － | － |
| IC50 | 38nM | － | － | － | － |
| 体外研究 | EX 527有效抑制SIRT1去乙酰化酶活性，IC50为38nM，这种作用存在浓度依赖性，而抑制SIRT2和SIRT3时，效果低很多，IC50分别为19.6μM和48.7μM。EX 527浓度高达100μM时也不抑制SIRT4-7和I/II类 HDAC活性。1μM EX-527单独作用于NCI-H460细胞，不能检测p53在lysine 382位点的乙酰化作用。EX-527作用于受遗传毒性试剂Etoposide、Adriamycin、Hydroxyurea和H2O2影响的NCI-H460细胞，人类乳腺上皮细胞，U-2 OS和MCF-7细胞，显著提高乙酰化p53的量。但是EX 527在p53控制的基因表达、细胞存活或细胞增殖方面没有检测效果。EX 527在0.1%血清而不是10%血清中处理7天，作用于HCT116细胞，显著提高细胞数，提高达90%，说明在无细胞因子的情况下，SirT1是细胞增殖的显著调节器。EX 527作用于INS-1E细胞，废除白藜芦醇对葡萄糖的反应的影响，且抑制白藜芦醇诱导的Glut2、葡萄糖激酶、Pdx-1和Tfam的上调，因为EX 527和白藜芦醇作用于SIRT1脱乙酰基酶活性的作用是相反的。 | ||||
| 体内研究 | EX 527按10μg剂量作用于大鼠，通过抑制下丘脑SIRT1活性而提高下丘脑乙酰化-p53水平。EX 527和Ghrelin联用处理，通过降低pAMPK水平，提高ACC水平及废除转录因子FoxO1、pCREB和Bsx，以及下丘脑弓状核中的神经肽NPY和AgRP的更高水平表达，而显著减弱生长素的促进食欲功效。 | ||||
| 临床实验 | N/A | ||||
| 特征 | 与其他SIRT1抑制剂相比，EX 527有效性、特定性和稳定性更高，且毒性更低。 | ||||
相关实验数据(此数据来自于公开文献，碧云天并不保证其有效性)：
| 酶活性检测实验 | |
| 方法 | 在pDEST27 Gateway载体中使用FuGENE-6使293T细胞短暂转染GST标记的人SIRT1。48小时后，用50mM Tris pH 8.0，120mM NaCl，1mM EDTA和0.5% Nonidet P-40溶解细胞，加入完整Mini蛋白酶抑制剂片。使用谷胱甘肽-琼脂糖凝胶珠从溶解物中纯化GST-SIRT1，然后在以上buffer中进行冲洗。在EX 527 (48pM到100μM)存在时，使用30ng GST-SIRT1进行脱乙酰反应。使用Fluor de Lys试剂盒，使用包含p53的379到382残基，且在lysine 382位点乙酰化的荧光肽，测定脱乙酰作用。使乙酰化赖氨酸残基与一部分aminomethylcoumarin进行耦合。SIRT1使肽段脱乙酰化，随后加入蛋白水解显影剂，释放荧光aminomethylcoumarin。酶和170μM NAD+及100μM p53荧光肽在37℃下温育45分钟，随后在显影剂中温育15分钟。分别在460nM处测定荧光值，用相对荧光单位表示酶活性。 |
| 细胞实验 | |
| 细胞系 | NCI-H460、MCF-7、U-2 OS和HMEC |
| 浓度 | 溶于DMSO，终浓度为1μM |
| 处理时间 | 48或72h |
| 方法 | 测定细胞活力，用EX 527处理细胞48小时。通过细胞Titer-Glo荧光实验测定细胞活力，测定全部ATP水平，作为细胞数的一个指数。在Luminoskan Ascent读数仪上测定荧光值。测定增殖实验中，在培养基中加入EX 527，然后立即加入0.5μCi/ml[14C]胸甘。在Microbeta液体闪烁计数器上测量，在48小时(测定HMEC)或72小时(测定NCI-H460、MCF-7和U-2 OS细胞)测定实验板。在Cytostar-T组织培养板上通过接近闪烁体而测定渗透到细胞的胸甘。 |
| 动物实验 | |
| 动物模型 | 雄性Sprague-Dawley大鼠 |
| 配制 | 溶于DMSO，总体积为5μl |
| 剂量 | 5μg |
| 给药方式 | 脑室内注射 |
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| SC0281-10mM | EX 527 (Selisistat) (SIRT1抑制剂) | 10mM×0.2ml |
| SC0281-5mg | EX 527 (Selisistat) (SIRT1抑制剂) | 5mg |
| SC0281-25mg | EX 527 (Selisistat) (SIRT1抑制剂) | 25mg |
| — | 说明书 | 1份 |
保存条件：
-20℃保存，至少一年有效。5mg和25mg包装也可室温保存，至少6个月有效。如果溶于非DMSO溶剂，建议分装后-80℃保存，预计6个月内有效。
注意事项：
本产品对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
