化学信息：
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化学名
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1-ethyl-3-[2-methoxy-4-[5-methyl-4-[[(1S)-1-pyridin-3- ylbutyl]amino]pyrimidin-2-yl]phenyl]urea
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简称
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CYT997
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别名
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Lexibulin, CYT 997, CYT-997
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中文名
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N/A
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化学式
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C24H30N6O2
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分子量
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434.53
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CAS号
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917111-44-5
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纯度
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99.6%
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溶剂/溶解度
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Water <1mg/ml; DMSO 86mg/ml; Ethanol 20mg/ml
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溶液配制
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5mg加入1.15ml DMSO，或者每4.35mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SC0051-10mM用DMSO配制。
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生物信息：
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产品描述
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CYT997(Lexibulin)作用于癌细胞系，是一种有效的microtubule(微管)聚合抑制剂，IC50为10-100nM。 Phase 2。
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信号通路
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Cytoskeletal Signaling
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靶点
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Microtubules (cancer cell lines)
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－
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IC50
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10nM-100nM
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－
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－
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体外研究
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CYT997(1μM)处理A549细胞24小时，诱导微管快速重组，包括现有的微管网络遭破坏，及一些细胞质微管蛋白在菌斑处累积，导致细胞形态发生显著变化，包括粘附细胞丢失，细胞减少。CYT997作用于16种癌细胞具有毒性，IC50为作用于HepG2细胞的9nM到作用于KHOS/NP细胞的101nM。CYT997有效作用于HCT15细胞，具有多耐药机制Pgp(MDR+)，IC50为52nM。CYT997通过抑制微管聚合，使细胞周期停在G2-M分界处，且诱导磷酸化的Bcl-2增多，也提高cyclin B1表达，caspase-3激活，以及PARP的产生。CYT997处理1小时后，引起HUVEC单层膜通透性快速且可逆的提高，IC50为~80nM。与CYT997破坏细胞微管蛋白相一致，CYT997有效抑制增殖，诱导细胞周期停滞，且诱导人骨髓细胞系(HMCLs)和原代MM细胞凋亡。
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体内研究
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CYT997口服处理大鼠的半衰期(2.5小时)比静脉注射半衰期(1.5小时)稍长，绝对口服生物有效性为50%到70%。CYT997口服处理给药携带PC3移植瘤的小鼠，与Paclitaxel相比，更有效抑制肿瘤生长，这种作用存在剂量依赖性。CYT997也有效作用于携带小鼠乳腺癌4T1细胞的同位模型，这种模型有些是抗Paclitaxel治疗的。CYT997按7.5mg/kg剂量腹腔注射给药肝转移，在第6小时显著降低血流，与CA4P按100mg/kg剂量处理的阳性对照作用程度相似。与在体外抗骨髓瘤活性一致，CYT997每天按15mg/kg剂量处理激进型系统性骨髓性白血病小鼠模型，显著延长寿命。
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临床实验
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N/A
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特征
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不同于多种其他微管蛋白靶向药剂(MTAs)，CYT997可用于口服处理，且有效作用于MDR+细胞系。
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相关实验数据(此数据来自于公开文献，碧云天并不保证其有效性)：
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酶活性检测实验
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方法
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通过传统比浊法使用牛神经元微管蛋白测定CYT997作用于微管蛋白聚合的效果，在340nM处通过测定吸光值的增高而监测微管装配。浓度不断增高的CYT997加到100μl微管蛋白/GTP/甘油中。通过试管中牛微管蛋白在PEM buffer[80nM PIPES(pH 6.9)、2mM MgCl2、0.5mM EGTA及5%甘油]中37℃下温育，然后在恒温控制下使用分光光度计测定340nM处的吸光值变化，而进行微管组装的比浊测定。
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细胞实验
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细胞系
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DU145、A549、Ramos、KHOS/NP、A375、HCT-15、HT1376、BT-20、A431、PA-1、U937、HepG2、TF-1、Baf3/TelJAK2、PC3和K562
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浓度
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溶于DMSO，终浓度为~1μM
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处理时间
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~72小时
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方法
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使用不同浓度CYT997处理细胞72小时。然后使用Alamar blue或MTT实验测定细胞增殖。MTT实验中，每孔加入5mg/ml MTT，实验板在37℃下温育6小时，然后加入溶解buffer(10% SDS，溶于0.01N HCl)，使用BMG Technologies Lumistar或Polarstar酶标仪在620nM处测定吸光值。Alamar blue实验中，每孔加入Alamar blue(10μl/每孔)，实验板在37℃下温育4小时。使用荧光酶标仪测量荧光，在544nM处测定激发光，在590nM处测定发射光。细胞周期分析中，混合细胞，使用溶于PBS的70%乙醇使细胞渗透，然后在4℃温育过夜。使用碘化丙啶(5μg/ml)在4℃下对RNase处理的样本(10μg RNase/ml，在37℃下处理20分钟)染色10分钟。通过荧光激活细胞分选(FACS)分选，使用Beckman-Coulter Quanta SC MPL系统测定细胞周期变化，使用CXP软件分析。凋亡分析中，分离细胞，然后收集。使用Vybrant凋亡检测试剂盒进行Annexin染色。细胞储存在冰上，1小时内在Beckman Coulter Quanta MPL上分析。使用双通道分析测定Annexin V-阳性细胞。
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动物实验
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动物模型
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皮下接种PC3细胞的雄性裸鼠，接种4T1细胞的雌性BALB/c小鼠
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配制
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在NMP/PEG300/盐水中配制
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剂量
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~30mg/kg/day
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给药方式
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口服饲喂，每天三次
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参考文献：
1. Burns CJ, et al. Mol Cancer Ther. 2009; 8(11):3036-3045.
2. Monaghan K, et al. Invest New Drugs. 2011; 29(2):232-238.
包装清单：
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产品编号
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产品名称
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包装
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SC0051-10mM
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CYT997 (Lexibulin) (Microtubules抑制剂)
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10mM×0.2ml
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SC0051-5mg
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CYT997 (Lexibulin) (Microtubules抑制剂)
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5mg
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SC0051-25mg
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CYT997 (Lexibulin) (Microtubules抑制剂)
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25mg
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说明书
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1份
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保存条件：
-20℃保存，至少一年有效。如果溶于非DMSO溶剂，建议分装后-80℃保存，预计6个月内有效。
注意事项：
本产品对人体有刺激性，操作时请小心，并注意适当防护以避免直接接触人体或吸入体内。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
