碧云天研发生产的单线态氧检测试剂盒(SOSG) (Singlet Oxygen Assay Kit with SOSG),简称SOSG Assay Kit,是一种使用对单线态氧(Singlet oxygen)具有高度选择性的绿色荧光探针SOSG (Singlet Oxygen Sensor Green),进行快速高灵敏检测细胞内单线态氧的试剂盒。本试剂盒适用于荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪、荧光酶标仪等荧光检测系统进行检测。
活性氧(Reactive Oxygen Species, ROS)是分子氧化还原过程中的一系列中间产物,是一类化学性质活泼具有较高氧化活性的分子或离子的总称。单线态氧(Singlet oxygen, 1O2)是活性氧的一种,可通过细胞代谢、氧化还原反应、光敏化等途径产生,能够破坏生物细胞成分,如脂质、蛋白质以及核酸等,在生物学、医学、材料和化学等领域得到了广泛的关注[1]。虽然单线态氧是一种强氧化试剂,但细胞内存在的多种抗氧化酶和抗氧化剂能发挥相应的抗氧化机制而使其失活[2],因此在正常细胞中,自然产生的单线态氧以及其它ROS不会对细胞内的细胞器造成明显的损伤。
SOSG是对单线态氧高度选择性结合的探针,对羟基自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(·O2-)及一氧化氮(NO)无任何明显的反应。与单线态氧反应前,SOSG自身具有微弱的蓝色荧光,激发峰在372nm和393nm,发射峰在395nm和416nm;与单线态氧反应后,生成的SOSG内过氧化物(SOSG endoperoxide, SOSG-EP)发出类似于荧光素(Fluorescein)的绿色荧光,最大激发光波长为504nm,最大发射光波长为525nm。SOSG的化学结构及与单线态氧的反应原理参考图1 [3]。
图1.碧云天单线态氧检测试剂盒(SOSG) (S0068)中SOSG的化学结构及与单线态氧(1O2)的反应原理图。SOSG在与单线态氧反应之前,因为存在内部电子转移(Internal electron transfer)会导致荧光淬灭。当SOSG与单线态氧反应后,形成SOSG endoperoxide (SOSG-EP),内部电子转移被阻止,此时能观察到明亮的绿色荧光。注:此处结构式仅供参考。
本试剂盒组分齐全,使用便捷。本试剂盒提供单线态氧阳性对照试剂SOup可短时诱导细胞单线态氧生成。同时,本试剂盒提供Assay Buffer,使用更便捷。本试剂盒也提供了Hoechst 33342染色液,方便同时观察细胞核染色情况。使用本试剂盒检测RAW264.7细胞内单线态氧的效果参考图2和图3。
图2.碧云天单线态氧检测试剂盒(SOSG) (S0068)检测RAW264.7 (小鼠单核巨噬细胞)细胞内单线态氧的效果图。正常的RAW264.7细胞中单线态氧含量很低,细胞内无明显绿色荧光(图B、D);使用单线态氧阳性对照试剂SOup处理细胞60分钟后,细胞内绿色荧光显著增强(图F、H)。实际检测效果会因实验条件、检测仪器的不同而存在差异,图中效果仅供参考。
图3.碧云天单线态氧检测试剂盒(SOSG) (S0068)检测RAW264.7 (小鼠单核巨噬细胞)细胞内单线态氧的效果图。正常的RAW264.7细胞中单线态氧含量很低;使用单线态氧阳性对照试剂SOup处理细胞60分钟后,经流式细胞仪(图A)及酶标仪(图B)检测荧光强度显著升高。实际检测效果会因实验条件、检测仪器的不同而存在差异,图中效果仅供参考。
本试剂盒小包装,6孔板每孔检测体系的体积为1ml时,可以检测30次;96孔板每孔检测体系的体积为100μl时,可以检测300次。如果用于流式细胞仪,每个样品检测体积为0.5ml时,可以进行60次检测。
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
S0068S-1 | SOSG | 100μg |
S0068S-2 | SOup (500X) | 20μl |
S0068S-3 | Hoechst 33342 (1000X) | 35μl |
S0068S-4 | Assay Buffer | 60ml |
— | 说明书 | 1份 |
-20ºC保存,一年有效。其中SOSG、SOup (500X)和Hoechst 33342 (1000X)须避光保存。
注意事项:SOup (500X)和Hoechst 33342 (1000X)第一次使用时请适当分装后-20ºC保存,避免反复冻融。
Assay Buffer经过过滤除菌处理,在使用时须注意避免微生物污染,否则很可能严重影响染色效果。如果Assay Buffer发生浑浊等明显的微生物污染,就不能继续使用。
荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
荧光酶标仪检测时须使用适合荧光检测的黑板或白板,推荐使用碧云天BeyoGold™全黑96孔细胞培养板(平底带盖, 独立包装) (FCP966)或BeyoGold™黑色透明底96孔细胞培养板(平底带盖, 独立包装) (FCP965)。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
Samples | 1 | 10 | 100 |
SOSG (5mM) | 0.1μl | 1μl | 10μl |
Hoechst 33342 (1000X) | 0.1μl | 1μl | 10μl |
Assay Buffer | 99.8μl | 998μl | 9.98ml |
SOSG Working Solution | 100μl | 1ml | 10ml |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
S0033 | 活性氧检测试剂盒 | >100/>500次 |
S0035 | 活性氧检测试剂盒(CM-H2DCFDA) | 20-200/100-1000次 |
S0038 | 过氧化氢检测试剂盒 | 150次 |
S0060 | 超氧化物检测试剂盒 | 100次 |
S0061 | 线粒体超氧化物检测试剂盒(MitoSOX Red) | 20-200/100-1000次 |
S0063 | Dihydroethidium (超氧化物阴离子荧光探针) | 5mg |
S0064S | 超氧阴离子活性氧检测试剂盒(DHE) | 100-1000次 |
S0067-100μg | SOSG (单线态氧绿色荧光探针) | 100μg |
S0068S | 单线态氧检测试剂盒(SOSG) | 30-300次 |
S0131 | 脂质氧化(MDA)检测试剂盒 | 100/500次 |
S0043 | 脂质过氧化检测试剂盒(BODIPY 581/591 C11) | 100-1000/500-5000次 |