碧云天的BeyoMag™磁珠法血液RNA抽提试剂盒,即BeyoMag™ Blood RNA Isolation Kit with Magnetic Beads,是一种使用新型核酸纯化介质包被的磁珠,从血液中安全、快速、便捷、稳定、高效、高质量地抽提总RNA的试剂盒。抽提获得的RNA包含大分子量RNA和小RNA(<200nt),也常被称为总RNA(Total RNA),可以用于各种常规分子生物学和生化检测等用途。
本试剂盒抽提得到的RNA可用于反转录、RT-PCR、qPCR、Northern、点杂交(Dot Blot)、纯化mRNA、体外翻译、RNase protection assay、cDNA克隆等下游实验;也可用于基因表达芯片分析(Microarray)、高通量测序(High throughput sequencing)等对RNA质量要求较高的情况。
RNA按照长度可以分为长链RNA (Long RNA)和小RNA (Small RNA),长链RNA通常大于200nt,而小RNA通常小于200nt。长链RNA按照是否编码蛋白或多肽可以分为长链非编码RNA (Long noncoding RNA, lncRNA)和mRNA。小RNA主要包括非编码的5.8S rRNA (Ribosomal RNA)、5S rRNA、tRNA (Transfer RNA)、microRNA (miRNA)、siRNA (Small interfering RNA)、piRNA (Piwi-associated small RNA)、tsRNA (tRNA-derived small RNA)、srRNA (Small rDNA-derived RNA)等[1]。
本试剂盒抽提RNA的基本流程如图1所示。样品在裂解液中迅速裂解,释放出总RNA,然后让RNA特异性地结合到磁珠上,再通过3次洗涤充分去除非特异性结合的蛋白、盐等杂质,最后用洗脱液将高纯度的RNA洗脱下来。
图1. BeyoMag™磁珠法血液RNA抽提试剂盒(R0093)抽提RNA流程示意图。
本试剂盒使用安全。本试剂盒通过特殊的磁珠纯化介质进行RNA分离纯化,能有效避免传统的TRIzol LS法抽提时使用的酚、氯仿等有毒有害有机试剂。
本试剂盒使用快速、便捷。本试剂盒无需使用红细胞裂解液去除无核的红细胞,避免RNA降解;采用磁珠纯化,无需繁琐的RNA沉淀步骤,抽提操作过程仅15-20分钟。相比于传统的TRIzol LS抽提法,本试剂盒的操作流程显著简化,缩短了抽提时间,降低了RNA被降解的风险。和国外同类柱纯化产品相比,所需操作步骤和操作时间基本一致。
本试剂盒抽提得到的RNA得率高、纯度高。纯的RNA其A260/A280约为2.0,但在很多仪器上测定时会高于2.0,低于1.9通常认为有蛋白、DNA或者酚等的污染;纯的RNA其A260/A230约为2.0左右或者略高,低于1.9通常认为有碳水化合物、胍盐、多肽或酚等的污染。本试剂盒效果经反复测试,抽提得到的RNA的A260/A280通常为2.0-2.2,A260/A230通常为1.9-2.1。本产品对于小鼠血液样品的抽提效果如图2所示。
图2. BeyoMag™磁珠法血液RNA抽提试剂盒(R0093)和RNAeasy™血液RNA抽提试剂盒(离心柱式) (R0091)抽提新鲜小鼠血液RNA的效果对比。样品为100μl新鲜小鼠全血,洗脱液用量均为50μl。均取8μl洗脱的样品经与2μl BeyoRed DNA上样缓冲液(6X) (D0072)混合后,在1.2%琼脂糖凝胶中电泳约30分钟后拍照。实际抽提效果会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异,本图仅供参考。
本试剂盒适用于新鲜、冻存、经EDTA、肝素等抗凝处理或经过RNALater™血液RNA稳定保存液(R0116)保存的血液RNA的抽提,推荐的血液样品量为100-200μl,本试剂盒小、中和大包装可分别用于10、50和200个样品的RNA抽提。
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
R0093S-1 | BeyoMag™ RNA磁珠 | 0.2ml |
R0093S-2 | 裂解液 | 6ml |
R0093S-3 | 结合液(首次使用前加3.5ml无水乙醇) | 2.5ml (+3.5ml) |
R0093S-4 | 洗涤液I | 6ml |
R0093S-5 | 洗涤液II (首次使用前加9ml无水乙醇) | 3.6ml (+9ml) |
R0093S-6 | 洗脱液 | 1ml |
R0093S-7 | DNase | 20μl |
R0093S-8 | Reaction Buffer (10X) | 100µl |
— | 说明书 | 1份 |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
R0093M-1 | BeyoMag™ RNA磁珠 | 1ml |
R0093M-2 | 裂解液 | 30ml |
R0093M-3 | 结合液(首次使用前加17.5ml无水乙醇) | 12.5ml (+17.5ml) |
R0093M-4 | 洗涤液I | 32ml |
R0093M-5 | 洗涤液II (首次使用前加45ml无水乙醇) | 18ml (+45ml) |
R0093M-6 | 洗脱液 | 5ml |
R0093M-7 | DNase | 100μl |
R0093M-8 | Reaction Buffer (10X) | 500µl |
— | 说明书 | 1份 |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
R0093L-1 | BeyoMag™ RNA磁珠 | 4ml |
R0093L-2 | 裂解液 | 120ml |
R0093L-3 | 结合液(首次使用前加70ml无水乙醇) | 50ml (+70ml) |
R0093L-4 | 洗涤液I | 125ml |
R0093L-5 | 洗涤液II (首次使用前各加90ml无水乙醇) | 36ml (+90ml), ×2 |
R0093L-6 | 洗脱液 | 20ml |
R0093L-7 | DNase | 400μl |
R0093L-8 | Reaction Buffer (10X) | 2ml |
— | 说明书 | 1份 |
除DNase和Reaction Buffer (10X)以外,室温保存,一年有效。DNase和Reaction Buffer (10X) -20ºC保存,一年有效。其中BeyoMag™ RNA磁珠长期不使用时,可以4ºC保存,4ºC可以保存更长时间。
注意事项:首次使用前,结合液和洗涤液II按照说明书或瓶标上的指示加入相应量的无水乙醇,混匀,并在瓶上做好标记。
需自备磁分离装置,推荐使用碧云天的1.5/2ml磁分离架(FMS004、FMS008、FMS009、FMS012、FMS016、FMS017、FMS024、FMS025)。
血液样品推荐使用RNALater™血液RNA稳定保存液(R0116)进行保存以保持RNA的完整性。
如果不使用试剂盒提供的DNase进行处理,本试剂盒抽提得到的RNA会含有少量的DNA。后续如进行某些对DNA残留较敏感的实验时,需要在使用说明中步骤4后,在磁珠中加入适量DNase进行消化,具体请参考使用说明。
建议使用推荐的血液量用于RNA的抽提,否则可能导致BeyoMag™ RNA磁珠聚集而使基因组DNA消化不充分。如果基因组DNA消化不充分,可以加大DNase的用量或延长孵育时间。DNase如果需要加大,可以考虑订购碧云天的RNase-free的DNase I (D7073/D7076)。
本试剂盒提供的所有试剂和耗材都是RNase-free,操作时应小心,避免被污染。所有自行准备的试剂和耗材也都应是RNase-free。如果可能有RNase污染,可考虑用0.01%的DEPC水浸泡过夜,然后高温高压灭菌并烘干。操作时应避免对着样品或所使用的试剂盒耗材呼气或说话,以防RNase污染。建议戴一次性口罩操作。
对于操作环境中RNA酶的去除,推荐使用碧云天生产的RNase and DNase Away (R0123)以去除实验桌面上或其它接触面上的RNase。
本试剂盒所有操作均在室温进行,操作时无需冰浴。所有离心也均在室温进行。
废液收集管在一次抽提中需多次使用,切勿中途丢弃。
结合液、洗涤液中含有乙醇,使用后须旋紧瓶盖以防挥发,并须按照易燃试剂的相关规范进行存放和使用。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
R0011 | Beyozol (总RNA抽提试剂) | 100ml |
R0016 | Trizol (总RNA抽提试剂) | 100ml |
R0021 | DEPC水(DNase、RNase free) | 100ml |
R0022 | DEPC水(DNase、RNase free) | 500ml |
R0024 | RNAeasy™动物RNA抽提试剂盒(离心柱式) | 12次 |
R0026 | RNAeasy™动物RNA抽提试剂盒(离心柱式) | 50次 |
R0027 | RNAeasy™动物RNA抽提试剂盒(离心柱式) | 200次 |
R0035 | BeyoMag™磁珠法动物总RNA抽提试剂盒 | 50次 |
R0091S | RNAeasy™血液RNA抽提试剂盒(离心柱式) | 12次 |
R0091M | RNAeasy™血液RNA抽提试剂盒(离心柱式) | 50次 |
R0091L | RNAeasy™血液RNA抽提试剂盒(离心柱式) | 200次 |
R0093S | BeyoMag™磁珠法血液RNA抽提试剂盒 | 10次 |
R0093M | BeyoMag™磁珠法血液RNA抽提试剂盒 | 50次 |
R0093L | BeyoMag™磁珠法血液RNA抽提试剂盒 | 200次 |
R0095S | BeyoMag™磁珠法血液mRNA抽提试剂盒 | 50次 |
R0095M | BeyoMag™磁珠法血液mRNA抽提试剂盒 | 200次 |
R0095L | BeyoMag™磁珠法血液mRNA抽提试剂盒 | 1000次 |
R0116 | RNALater™血液RNA稳定保存液 | 100ml/500ml |
R0123 | RNase and DNase Away | 250ml |
R0125 | RNase, DNase and DNA Away | 250ml |
R0127 | RNase, DNase, RNA and DNA Away | 250ml |
ST036 | DEPC | 10g |