碧云天生产的RNA/DNA/蛋白抽提试剂盒(RNA/DNA/Protein Isolation Kit),也称RNA/DNA/蛋白共抽提试剂盒(RNA/DNA/Protein Co-isolation Kit)或RNA/DNA/蛋白共提取试剂盒(RNA/DNA/Protein Co-extraction Kit),是一种简单、方便、快速地从培养的动物细胞或组织、植物、酵母、细菌或病毒等单个样品中分步分别提取RNA、基因组DNA和蛋白质的试剂盒。本试剂盒特别适合用于比较珍贵的样品,可以实现一个样品同时用于RNA、DNA和蛋白的抽提。本试剂盒不仅适用于少量样品的提取,还可用于大量不同样品的同时处理,特别适合同一个样品中RNA、DNA和蛋白质后续的同步检测。
本试剂盒操作简单,使用便捷。本试剂盒操作简单快速,仅需约1小时即可完成RNA、DNA和蛋白质的提取。本试剂盒基于特殊裂解液多组分分离的原理,分步提取同一个样品的RNA、DNA和蛋白质。在样品中加入裂解液后进行裂解或匀浆,使细胞或组织充分裂解,加入氯仿混匀并离心后分为三层,包括上层无色水相(含RNA),中间相(含DNA和蛋白质)和下层红色有机相(含DNA和蛋白质)。RNA溶于水相中,取出水相后用异丙醇沉淀即可获得纯化的RNA;用无水乙醇沉淀中间相和下层红色有机相的可溶物,可获得纯化的DNA;进一步用异丙醇沉淀有机相,可获得纯化的蛋白质。这些沉淀通过洗涤去除其它杂质成分后可用于后续的实验[1-2]。
本试剂盒采用高品质抽提试剂。本试剂盒提供的特殊裂解液可以有效抑制RNA的降解,保持样品中RNA的完整性;既可用于小量样品(例如5-100mg组织或20-500万个细胞),也适用于大量样品(例如大于1g的组织或超过一千万的细胞)。通常,每一百万细胞可抽提得到5-15μg RNA,每毫克组织可抽提得到1-10μg RNA。
本试剂盒抽提所得的RNA、DNA和蛋白质纯度高,用途广泛。抽提所得的总RNA无蛋白、DNA污染,溶于DEPC水或不含RNase的超纯水后的A260/280值为1.8-2.0,可直接用于RT-PCR、cDNA克隆、纯化mRNA、Northern blot、Dot blot、体外翻译、以及RNase protection assay等实验,也可以用于基因表达芯片分析、高通量测序(High-throughput sequencing)等对RNA质量要求较高的实验;抽提所得的DNA适用于Southern杂交、基因组DNA的PCR扩增、基因组DNA的甲基化等修饰分析及基因组DNA文库的构建等实验;提取的蛋白可用于SDS-PAGE、Western blot、免疫沉淀等分析。
本试剂盒小包装和中包装分别可以抽提25个或100个6孔板中的细胞样品或10-80mg的组织样品。
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
R0019S-1 | 裂解液 | 25ml |
R0019S-2 | 洗涤液I | 22ml (第一次使用前需加入44ml无水乙醇) |
R0019S-3 | 洗涤液II | 66ml |
R0019S-4 | 洗涤液III | 7.5ml (第一次使用前需加入112.5ml无水乙醇) |
R0019S-5 | DNA溶解液 | 15ml |
R0019S-6 | 蛋白溶解液 | 5ml |
— | 说明书 | 1份 |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
R0019M-1 | 裂解液 | 100ml |
R0019M-2 | 洗涤液I | 88ml (第一次使用前需加入176ml无水乙醇) |
R0019M-3 | 洗涤液II | 260ml |
R0019M-4 | 洗涤液III | 30ml (第一次使用前需加入450ml无水乙醇) |
R0019M-5 | DNA溶解液 | 60ml |
R0019M-6 | 蛋白溶解液 | 20ml |
— | 说明书 | 1份 |
4ºC保存,一年有效。
注意事项:用户需自备无水异丙醇、氯仿、无水乙醇、DEPC水(R0021/ST036)或BeyoPure™ Ultrapure Water (DNase/RNase-Free, Sterile) (ST876)。
所有离心管,枪头及相关溶液都必须无RNA酶污染。耐高温器物可150℃烘烤4小时以去除RNA酶,其它器物去除RNA酶可考虑用0.01%的DEPC水浸泡过夜,然后灭菌,烘干。
使用冻存的细胞或组织抽提总RNA的效果通常比新鲜的细胞或组织差一些。因为在细胞或组织冻融过程中一些细胞或组织内的RNase会被释放出来并剪切样品。如果不能及时抽提RNA,推荐先加入适量裂解液,并裂解样品后冻存。
必须戴一次性手套操作,且尽量不要对着RNA样品呼气或说话,以防RNA酶污染。建议戴一次性口罩操作。
裂解液含有毒物质,避免接触皮肤或吸入。为防止溅入眼睛,请戴防护眼镜或使用透明保护屏。如皮肤接触裂解液,请立即用大量去垢剂和水冲洗,如仍有不适,请听取医生意见。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
Problem | Possible Causes | |
RNA | 产量低 | 样品未完全裂解。 |
提取的RNA沉淀没有完全溶解。 | ||
A260/A280 Ratio <1.65 | 样品量过少。 | |
无色水相(上层)可能被中间层污染。 | ||
降解 | 提取的RNA沉淀没有完全溶解。 | |
获取组织后,未立即处理或进行冷冻。 | ||
细胞可能被胰蛋白酶过度消化。 | ||
耗材或操作环境中可能含RNase。 | ||
DNA污染 | 用于样品均质化的裂解液过少。 | |
样品可能含有有机溶剂(乙醇、DMSO)、强缓冲液或碱性溶液。 | ||
DNA | 产量低 | 样品未完全裂解。 |
提取的DNA沉淀没有完全溶解。 | ||
降解 | 获取组织后,未立即处理或进行冷冻。 | |
样品提取前储存于-20℃,而不是-80℃。 | ||
RNA污染 | 在中间层和红色有机相(下层)中可能存在过多水相。 | |
DNA沉淀未经洗涤液II充分洗涤。 | ||
蛋白 | 产量低 | 样品未完全裂解。 |
提取的蛋白沉淀没有完全溶解。 | ||
降解 | 获取组织后,未立即处理或进行冷冻。 | |
PAGE条带变形 | 蛋白质沉淀未充分洗涤。 |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D0061 | 哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒 | 50次 |
D0063 | 基因组DNA小量抽提试剂盒(通用型,离心柱式) | 50次 |
D0065S/M | 动物基因组DNA快速抽提试剂盒(PCR分析用) | 100/500次 |
R0011 | Beyozol (总RNA抽提试剂) | 100ml |
R0016 | Trizol (总RNA抽提试剂) | 100ml |
R0017S/M | RNA/DNA抽提试剂盒 | 25/100次 |
R0018S/M | RNA/蛋白抽提试剂盒 | 25/100次 |
R0019S/M | RNA/DNA/蛋白抽提试剂盒 | 25/100次 |
R0021 | DEPC水(DNase、RNase free) | 100ml |
R0022 | DEPC水(DNase、RNase free) | 500ml |
R0024 | RNAeasy™动物RNA抽提试剂盒(离心柱式) | 12次 |
R0026 | RNAeasy™动物RNA抽提试剂盒(离心柱式) | 50次 |
R0027 | RNAeasy™动物RNA抽提试剂盒(离心柱式) | 200次 |
R0028 | RNAeasy™动物小RNA抽提试剂盒(离心柱式) | 50次 |
R0032 | RNAeasy™ Plus动物RNA抽提试剂盒(离心柱式) | 50次 |
R0035S/M/L | RNAeasy™病毒RNA抽提试剂盒(离心柱式) | 12/50/200次 |
R0046-50ml/250ml | 裂解液(RNAeasy™动物RNA抽提试剂盒用) | 50ml/250ml |
R0077S/M/L | BeyoMag™磁珠法动物RNA提取试剂盒 | 10/50/200次 |
R0081-1ml/5ml/20ml/100ml | BeyoMag™ RNA Clean Magnetic Beads (RNA纯化磁珠) | 1ml/5ml/20ml/100ml |
P0013 | Western及IP细胞裂解液 | 100ml |
P0013B | RIPA裂解液(强) | 100ml |
P0013C | RIPA裂解液(中) | 100ml |
P0013D | RIPA裂解液(弱) | 100ml |
P0013E | RIPA裂解液(强中弱套装) | 共150ml |
P0013F | NP-40裂解液 | 100ml |
P0013G | SDS裂解液 | 100ml |
P0013J | Western及IP细胞裂解液(无抑制剂) | 100ml |
P0013K | RIPA裂解液(强, 无抑制剂) | 100ml |