碧云天生产的BeyoMag™ Tosyl磁珠偶联试剂盒(BeyoMag™ Tosyl Magnetic Beads Coupling Kit),也称Tosyl磁珠偶联试剂盒、甲苯磺酰基化磁珠偶联试剂盒、甲苯磺酰基衍生化磁珠偶联试剂盒、甲苯磺酰基衍生微珠偶联试剂盒、抗体偶联试剂盒、Tosyl Derivatized Beads Coupling Kit、Toluenesulfonyl Derivatized Beads Coupling Kit、 Tosylactivated Beads Coupling Kit、Antibody Coupling Kit或Antibody Conjugation Kit,是一类采用了高质量的BeyoMag™ Tosyl Magnetic Beads (甲苯磺酰基磁珠),无需活化,可快速、高效、灵敏、特异性地与多肽、蛋白、抗体、寡聚核苷酸等生物分子共价偶联的试剂盒。本试剂盒的偶联产物,后续可以用于免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)、细胞分选、DNA-蛋白相互作用等,是医学和生命学研究中的重要载体工具。
磁分离是一种利用外部磁场对磁性材料的作用力,在保留生物活性的同时结合并分离生物分子、细胞的方法,具有吸附量大、分离速度快、效率高、可重复使用、操作简单等特点[1,2]。常规的四氧化三铁微球作为常用的磁性材料磁响应性高、生物相容性极佳,但表面未经修饰,不稳定,易发生自身的聚集和沉淀。常见的含功能基团的磁珠有Tosyl磁珠、NHS磁珠、羧基磁珠和氨基磁珠,是在磁珠的壳层结构包被有Tosyl、NHS、羧基或氨基官能团,以降低磁珠本身的聚集和沉淀;Tosyl和NHS磁珠无需活化,可以直接使用;羧基磁珠显酸性,在酸性缓冲液中通常用EDC/NHS等进行活化,而氨基磁珠显碱性,在碱性缓冲液中通常用戊二醛等进行活化。本系列试剂盒的Tosyl磁珠为甲苯磺酰基包覆的超顺磁性四氧化三铁微球的水相悬浮液,采用的先进技术使磁珠与二氧化硅或高分子材料完美结合,是一种新型功能化磁性微球。与传统磁珠相比,本系列试剂盒的Tosyl磁珠具有超顺磁性、高甲苯磺酰基密度、快速磁响应性、单分散性、分离速度快、回收率高、特异性强等多方面的优点,能便捷高效地与多种生物分子(多肽、蛋白、抗体等)进行高载量结合,也可作为良好的基础材料进行包被、吸附、化学改性等后续处理。同时,本系列试剂盒的Tosyl磁珠的二氧化硅/聚合物外壳可保护与磁珠结合的目标分子免受铁元素的负面影响。
本系列试剂盒的Tosyl磁珠与蛋白、抗体等生物分子共价偶联的基本原理如下。生物偶联是通过化学共价键结合生物分子的过程,生物偶联试剂含有具有反应活性的末端,可与特定功能基团(如伯氨基、巯基)反应。伯胺(-NH2)存在于每条多肽链的N-末端以及赖氨酸残基的侧链中。由于伯胺带正电荷,因此它通常在蛋白质的外表面,使其更易于偶联而不会改变蛋白质结构。Tosyl磁珠无需活化,只需简单地将含伯氨基或者巯基的生物配体溶解在Coupling Buffer中,20-37ºC下将生物配体与Tosyl磁珠混合,过夜或更长时间便可将生物配体共价偶联到磁珠上。本系列试剂盒进行蛋白等生物分子偶联的流程参考图1。
图1. 碧云天BeyoMag™ Tosyl磁珠偶联试剂盒(P1632/P1635/P1640)生物分子偶联流程图(以偶联蛋白为例)。
本系列试剂盒使用便捷,提供了配套试剂。本系列试剂盒提供了Tosyl磁珠偶联反应所需的相关试剂,仅需要自备抗体等待偶联的生物分子,为生物分子的偶联带来了极大的便利。同时Tosyl磁珠储存在特殊保护液中,不含甘油,配合试剂盒提供的缓冲液,可以通过磁性吸附实现快速高效的分离纯化,无需离心操作。
本系列试剂盒的Tosyl磁珠特异性强、配基密度高、结合量大。与国内外大多数的同类产品相比,本系列试剂盒的Tosyl磁珠Tosyl密度高,对带有伯氨基或巯基的生物分子具有很强的反应特异性。本系列试剂盒的Tosyl磁珠包含200nm、500nm和1µm三种粒径可供选择,每毫升磁珠悬浊液含约10mg磁珠,可反应结合不少于0.6mg IgG抗体,具体的最大结合量和生物分子的分子量大小等相关。
本系列试剂盒的Tosyl磁珠与生物分子的反应速度快。本系列试剂盒Tosyl磁珠Tosyl密度高,Tosyl磁珠能快速地与带有伯氨基或巯基的生物分子发生偶联,无需活化,节省了操作时间。
本系列试剂盒的Tosyl磁珠分散性和重悬性良好。本系列试剂盒的Tosyl磁珠进行了二氧化硅或高分子材料修饰,避免了磁珠的聚团,使磁珠具有良好的单分散性和稳定的物理化学性质,磁珠进行生物分子偶联反应时具有很好的重复性和便捷性。
本系列试剂盒的Tosyl磁珠的主要指标请参考下表:
Product Cat. No. | P1632 | P1635 | P1640 |
Product content | 10mg/ml magnetic beads in specific protective buffer | 10mg/ml magnetic beads in specific protective buffer | 10mg/ml magnetic beads in specific protective buffer |
Beads size | ~200nm | ~500nm | ~1µm |
Density of Tosyl | ~200µmol/g | ~200µmol/g | ~300µmol/g |
Type of magnetization | Superparamagnetic (no magnetic memory) |
Superparamagnetic (no magnetic memory) |
Superparamagnetic (no magnetic memory) |
Magnetic core | Fe3O4 | Fe3O4 | Fe3O4 |
Shell | SiO2 | Polymer | Polymer |
碧云天各种官能团、粒径磁珠和偶联试剂盒的差异及选择可以参考下表:
羧基磁珠 | 氨基磁珠 | NHS磁珠 | Tosyl磁珠 | |
官能团 | -COOH | -NH2 | -NHS | -Tosyl |
磁珠产品编号 | ST401/ST403/ST405 | ST412/ST415/ST418 | ST422/ST425/ST428 | ST432/ST435/ST438 |
试剂盒产品编号 | P1602/P1605/P1610 | P1612/P1615/P1620 | P1622/P1625/P1630 | P1632/P1635/P1640 |
活化要求 | EDC/NHS活化 | 戊二醛活化 | 无须活化,直接使用 | 无须活化,直接使用 |
200nm | 吸附速度稍慢,同浓度下载量较高,非特异性略强 | |||
500nm | 介于200nm和1µm之间 | |||
1µm | 吸附速度稍快,同浓度下载量稍低,非特异性略弱 |
按每次使用100μl磁珠悬液进行偶联,本系列试剂盒小包装可使用50次。
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P1632S-1 | BeyoMag™ Tosyl Magnetic Beads (200nm) | 5ml |
P1632S-2 | Coupling Buffer A | 80ml |
P1632S-3 | Coupling Buffer B | 80ml |
P1632S-4 | Buffer C | 2.5ml |
P1632S-5 | Blocking Solution | 100ml |
P1632S-6 | Protective Solution | 5ml |
— | 说明书 | 1份 |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P1635S-1 | BeyoMag™ Tosyl Magnetic Beads (500nm) | 5ml |
P1635S-2 | Coupling Buffer A | 80ml |
P1635S-3 | Coupling Buffer B | 80ml |
P1635S-4 | Buffer C | 2.5ml |
P1635S-5 | Blocking Solution | 100ml |
P1635S-6 | Protective Solution | 5ml |
— | 说明书 | 1份 |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P1640S-1 | BeyoMag™ Tosyl Magnetic Beads (1µm) | 5ml |
P1640S-2 | Coupling Buffer A | 80ml |
P1640S-3 | Coupling Buffer B | 80ml |
P1640S-4 | Buffer C | 2.5ml |
P1640S-5 | Blocking Solution | 100ml |
P1640S-6 | Protective Solution | 5ml |
— | 说明书 | 1份 |
4ºC保存,两年有效。室温保存,至少一周有效。BeyoMag™ Tosyl Magnetic Beads不能-20ºC或更低温度冷冻保存。
注意事项:如有需要,也可单独订购碧云天的各种规格的Tosyl磁珠,如BeyoMag™ Tosyl Magnetic Beads (200nm) (ST432)、BeyoMag™ Tosyl Magnetic Beads (500nm) (ST435)、BeyoMag™ Tosyl Magnetic Beads (1µm) (ST438)。
本产品-20ºC或更低温度冷冻保存会导致磁珠聚团,影响后续的正常使用。
须根据生物分子的特性选择合适的功能基团及粒径的磁珠。
本系列试剂盒Tosyl磁珠需维持pH为6-8,避免高速离心、干燥;请勿长时间将磁珠置于磁场中,否则可能会引起磁珠聚团。
本系列试剂盒Tosyl磁珠使用前要适当充分重悬,即颠倒若干次使磁珠混合均匀,充分震荡或超声使磁珠呈均匀的悬浮状态。
为保证最佳的偶联效果,偶联缓冲液不能含有Tris等带伯氨基的溶液。
蛋白稳定剂(如BSA、明胶等)会抑制蛋白/抗体与Tosyl磁珠的结合,因此在Tosyl磁珠偶联蛋白/抗体时,需要确保蛋白/抗体偶联体系中不存在含伯氨基的蛋白稳定剂。配体样品溶液中也不能含有任何蛋白、糖类或者稳定剂等,这些物质会与Tosyl磁珠发生反应从而影响配体与磁珠的反应。
如果使用真空泵等仪器吸取上清液,须注意真空泵的吸液强度,以免吸力过大而吸取到聚集的磁珠。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P1632S | BeyoMag™ Tosyl磁珠偶联试剂盒(200nm) | 50次 |
P1635S | BeyoMag™ Tosyl磁珠偶联试剂盒(500nm) | 50次 |
P1640S | BeyoMag™ Tosyl磁珠偶联试剂盒(1µm) | 50次 |
P1622S | BeyoMag™ NHS磁珠偶联试剂盒(200nm) | 50次 |
P1625S | BeyoMag™ NHS磁珠偶联试剂盒(500nm) | 50次 |
P1630S | BeyoMag™ NHS磁珠偶联试剂盒(1µm) | 50次 |
P1602S | BeyoMag™羧基磁珠偶联试剂盒(200nm) | 50次 |
P1605S | BeyoMag™羧基磁珠偶联试剂盒(500nm) | 50次 |
P1610S | BeyoMag™羧基磁珠偶联试剂盒(1µm) | 50次 |
P1612S | BeyoMag™氨基磁珠偶联试剂盒(200nm) | 50次 |
P1615S | BeyoMag™氨基磁珠偶联试剂盒(500nm) | 50次 |
P1620S | BeyoMag™氨基磁珠偶联试剂盒(1µm) | 50次 |
ST432 | BeyoMag™ Tosyl Magnetic Beads (甲苯磺酰基磁珠, 200nm) | 5ml/50ml/200ml |
ST435 | BeyoMag™ Tosyl Magnetic Beads (甲苯磺酰基磁珠, 500nm) | 5ml/50ml/200ml |
ST438 | BeyoMag™ Tosyl Magnetic Beads (甲苯磺酰基磁珠, 1µm) | 5ml/50ml/200ml |
ST422 | BeyoMag™ NHS Magnetic Beads (NHS磁珠, 200nm) | 5ml/50ml/200ml |
ST425 | BeyoMag™ NHS Magnetic Beads (NHS磁珠, 500nm) | 5ml/50ml/200ml |
ST428 | BeyoMag™ NHS Magnetic Beads (NHS磁珠, 1µm) | 5ml/50ml/200ml |
ST401 | BeyoMag™ Carboxyl Magnetic Beads (羧基磁珠, 200nm) | 5ml/50ml/200ml |
ST403 | BeyoMag™ Carboxyl Magnetic Beads (羧基磁珠, 500nm) | 5ml/50ml/200ml |
ST405 | BeyoMag™ Carboxyl Magnetic Beads (羧基磁珠, 1µm) | 5ml/50ml/200ml |
ST412 | BeyoMag™ Amine Magnetic Beads (氨基磁珠, 200nm) | 5ml/50ml/200ml |
ST415 | BeyoMag™ Amine Magnetic Beads (氨基磁珠, 500nm) | 5ml/50ml/200ml |
ST418 | BeyoMag™ Amine Magnetic Beads (氨基磁珠, 1µm) | 5ml/50ml/200ml |
ST025 | BSA (Fatty Acid & IgG Free, BioPremium) | 5g/20g/100g |
ST1083 | 硫酸铵(≥99%, Reagent grade) | 200g/1kg |
ST853 | ProClean 300(抑菌防腐剂) | 50ml/250ml/1L |
FMS012 | BeyoMag™磁分离架(12孔) | 1个/袋 |
FMS024 | BeyoMag™磁分离架(24孔) | 1个/袋 |
FMS004 | BeyoMag™磁分离架(4孔, 1.5ml/2ml, 蓝) | 1个/盒 |
FMS008 | BeyoMag™磁分离架(8孔, 1.5ml/2ml, 蓝) | 1个/盒 |
FMS016 | BeyoMag™磁分离架(16孔, 1.5ml/2ml, 蓝) | 1个/盒 |
FMS154 | BeyoMag™磁分离架(4孔, 15ml, 蓝) | 1个/盒 |
FMS504 | BeyoMag™磁分离架(4孔, 50ml, 蓝) | 1个/盒 |
FMS009 | BeyoMag™磁分离架(8孔, 1.5ml/2ml, 铝合金) | 1个/盒 |
FMS015 | BeyoMag™磁分离架(16孔, 1.5ml/2ml, 铝合金) | 1个/盒 |
FMS025 | BeyoMag™磁分离架(24孔, 1.5ml/2ml, 铝合金) | 1个/盒 |
E6673 | BeyoShaker™数字式翘板摇床 | 1套 |
E6800 | BeyoVortex™基础型旋转混匀仪 | 1套 |