碧云天的的去乙酰化酶抑制剂混合物(Deacetylase Inhibitor Cocktail, 100X)是一种用于维持组蛋白和其它非组蛋白乙酰化状态的去乙酰化酶抑制剂混合物(40μM Trichostatin A, 1mM EX-527, 400mM nicotinamide and 200mM sodium butyrate in 70% DMSO)。
细胞或组织等提取物中含有许多内源性的蛋白酶、磷酸酶、去乙酰化酶等,容易导致提取物中的蛋白降解或去修饰,从而影响后续的蛋白检测。因此在提取物中添加适当的蛋白酶、磷酸酶、去乙酰化酶等抑制剂是防止蛋白降解和去修饰的有效方法。为更好地检测细胞内蛋白的乙酰化水平,可在细胞培养液中添加去乙酰化酶抑制剂一段时间后再收集细胞。本去乙酰化酶抑制剂混合物可以有效抑制各类去乙酰化酶(包括class I/II/III HDAC)对蛋白的去乙酰化作用,保持蛋白乙酰化状态。
本去乙酰化酶抑制剂混合物含40μM Trichostatin A, 1mM EX-527, 400mM nicotinamide 和200mM sodium butyrate,配制在含适量水的DMSO中。
本产品使用便捷,通常以1:100的比例把去乙酰化酶抑制剂混合物加入裂解液或细胞培养液中即可直接使用。
碧云天针对不同类型样品的蛋白提取,提供了不同类型的蛋白酶、磷酸酶、去乙酰化酶等抑制剂混合物以供选择,具体请参考附表1。
本产品可以有效抑制各种去乙酰化酶,包括class I/II/III去乙酰化酶等 。曲古菌素A(Trichostatin A)是class I/II 去乙酰化酶可逆抑制剂;EX-527是SIRT1的选择性可逆抑制剂,对SIRT2和 SIRT3也有一定的抑制作用;烟酰胺(nicotinamide)是class III 去乙酰化酶(Sirtuins,即SIRT1-7)可逆抑制剂;丁酸钠(sodium butyrate)是class I/II 去乙酰化酶可逆抑制剂。各种抑制剂的具体信息请参考附表2。
蛋白酶、磷酸酶和去乙酰化酶抑制剂混合物的比较和选择请见:https://www.beyotime.com/support/lysis-inhibitor cocktail.htm。
一个包装的本产品通常足够用于500ml的裂解液或细胞培养液的配制。
包装清单:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P1113 | 去乙酰化酶抑制剂混合物(100X) | 1ml×5 |
- | 说明书 | 1份 |
保存条件:
-20℃保存,一年有效。
注意事项:
本产品可以适当分装后保存,并应在临使用前添加到裂解液等适当溶液中。
本产品中含有的去乙酰化酶抑制剂对人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
1. 本去乙酰化酶抑制剂混合物为100X的储存液,使用时按照1:100的比例加入到裂解液或培养液中(例如,1ml裂解液或培养液中加入10μl去乙酰化酶抑制剂混合物),混匀后即可使用。含有去乙酰化酶抑制剂混合物的裂解液或培养液宜现用现配,不宜配制后冻存待后续使用。
附表1. 碧云天提供的不同类型的蛋白提取用蛋白酶、磷酸酶、去乙酰化酶等抑制剂混合物:
附表2. 常用蛋白酶、磷酸酶、去乙酰化酶抑制剂的具体相关信息:
名称 | 分子量 | 目标酶家族 | 抑制类型 |
AEBSF | 239.5 | 丝氨酸蛋白酶 | 不可逆 |
Aprotinin | 6511.5 | 丝氨酸蛋白酶 | 可逆 |
Bestatin | 308.38 | 氨基肽酶 | 可逆 |
E64 | 357.4 | 半胱氨酸蛋白酶 | 不可逆 |
Leupeptin | 475.6 | 丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶 | 可逆 |
Pepstatin A | 685.9 | 天冬氨酸蛋白酶 | 可逆 |
EDTA | 372.24 | 金属蛋白酶 | 可逆 |
Phenanthroline | 198.22 | 金属蛋白酶 | 可逆 |
Phosphoramidon | 587.5 | 金属蛋白酶 | 可逆 |
Sodium fluoride | 41.99 | 酸性磷酸酶 | 可逆 |
Sodium pyrophosphate | 221.9 | 丝氨酸/苏氨酸磷酸酶 | 不可逆 |
β-glycerophosphate | 306.11 | 丝氨酸/苏氨酸磷酸酶 | 可逆 |
Imidazole | 68.2 | 碱性磷酸酶 | 可逆 |
Sodium molybdate | 205.9 | 酸性磷酸酶 | 不可逆 |
Sodium tartrate dihydrate | 230.1 | 酸性磷酸酶 | 可逆 |
Sodium orthovanadate | 183.91 | 碱性和酪氨酸磷酸酶 | 可逆 |
(-)-p-Bromotetramisole oxalate | 373.22 | 碱性磷酸酶 | 不可逆 |
Cantharidin | 196.20 | 蛋白磷酸酶2A | 可逆 |
Microcystin-LR | 995.17 | 蛋白磷酸酶1和蛋白磷酸酶2A | 可逆 |
Calyculin A | 1009.17 | 蛋白磷酸酶1和蛋白磷酸酶2A | 可逆 |
Trichostatin A | 302.37 | class I/II HDAC | 可逆 |
EX-527 | 248.71 | SIRT1 over SIRT2 & SIRT3 | 可逆 |
Nicotinamide | 122.12 | class III HDAC | 可逆 |
Sodium butyrate | 110.09 | class I/II HDAC | 可逆 |