碧云天的蛋白酶抑制剂混合物(His-Tag蛋白纯化用, 100X) (Protease inhibitor cocktail for purification of His-tagged proteins, 100X) 是一种用于His-Tag蛋白纯化的蛋白酶抑制剂混合物(100mM AEBSF, 5mM Bestatin, 1.5mM E64, 2mM Pepstatin A and 0.2mM Phosphoramidon in DMSO)。
细胞或组织提取物中含有许多内源性的蛋白酶、磷酸酶等，容易导致提取物中的蛋白降解或去修饰，从而影响后续的蛋白检测。因此在提取物中添加适当的蛋白酶、磷酸酶等抑制剂是防止蛋白降解和去修饰的有效方法。
本产品为经优化和测试的用于His-Tag蛋白纯化的蛋白酶抑制剂混合物，包含了广谱的丝氨酸、半胱氨酸和酸性蛋白酶抑制剂、以及氨基肽酶抑制剂。具体组分与Sigma及Millipore同类产品的比较见表1。
表1. 碧云天蛋白酶抑制剂混合物(His-Tag蛋白纯化用, 100X)与Sigma及Millipore同类产品的比较：

本蛋白酶抑制剂混合物含100mM AEBSF, 5mM Bestatin, 1.5mM E64, 2mM Pepstatin A, 0.2mM Phosphoramidon (参考表1)，配制在高纯度DMSO中。
本产品使用便捷，通常以1:100的比例把蛋白酶抑制剂混合物(His-Tag蛋白纯化用, 100X)加入裂解液中，即可用于His-Tag蛋白纯化，并有效抑制蛋白降解。
不同类型的蛋白提取物中含有不同类型的蛋白酶。例如，哺乳动物细胞提取物中通常含有高丰度的丝氨酸蛋白酶，细菌细胞提取物通常含有较多的丝氨酸蛋白酶和金属蛋白酶，哺乳动物组织提取物中主要含有丝氨酸、半胱氨酸和金属蛋白酶，植物提取物中常含有大量的丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶，还有一些含有天冬氨酸蛋白酶。为此碧云天针对不同类型样品的蛋白提取，提供了不同类型的蛋白酶、磷酸酶等抑制剂混合物以供选择，具体请参考附表1。
本产品可以有效抑制His-Tag蛋白纯化中的各种蛋白酶活性，如丝氨酸蛋白酶、氨基肽酶、半胱氨酸蛋白酶、苏氨酸和天冬氨酸蛋白酶、金属蛋白酶等。其中AEBSF是一种水溶性的丝氨酸蛋白酶不可逆抑制剂，其抑制常数与PMSF和DFP的抑制常数相似，可以有效抑制胰蛋白酶(trypsin)、糜蛋白酶(chymotrypsin)、纤溶酶(plasmin)、激肽释放酶(kallikrein)和凝血酶(thrombin)等蛋白酶，作为PMSF和DFP的替代物，AEBSF的毒性更低、水溶性和水溶液稳定性更好。Bestatin是氨基肽酶可逆抑制剂；E64是半胱氨酸蛋白酶不可逆抑制剂；Pepstatin A是天冬氨酸蛋白酶可逆抑制剂；Phosphoramidon是金属蛋白酶的可逆抑制剂。各种抑制剂的具体信息请参考附表2。
蛋白酶、磷酸酶和去乙酰化酶抑制剂混合物的比较和选择请见：https://www.beyotime.com/support/lysis-inhibitor cocktail.htm。
一个包装的本产品通常足够用于500ml裂解液的配制。
包装清单：

保存条件：
-20℃保存，一年有效。4℃保存，一个月有效；室温保存，一周有效。
注意事项：
本产品可以适当分装后保存，并应在临使用前添加到裂解液等适当溶液中。
本产品中含有的蛋白酶抑制剂对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：
1. 本蛋白酶抑制剂混合物为100X的储存液，使用时按照1:100的比例加入到裂解液中(例如，1ml裂解液中加入10μl蛋白酶抑制剂混合物)，混匀后即可使用。含有蛋白酶抑制剂混合物的裂解液宜现用现配，不宜配制后冻存待后续使用。待所需的抑制剂添加完毕并混匀后，就可以开始His-Tag蛋白的纯化。

附表1. 碧云天提供的不同类型的蛋白提取用蛋白酶、磷酸酶、去乙酰化酶等抑制剂混合物：

附表2. 常用蛋白酶、磷酸酶、去乙酰化酶抑制剂的具体相关信息：