BeyoGel™ Transfer Buffer (Powder, for Bis-Tris Gels)
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产品编号 P0755-10L
数量
¥ 258.00
产品包装:
1L 10L
产品简介
使用说明
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碧云天生产的BeyoGel™ Transfer Buffer (Powder, for Bis-Tris Gels),即BeyoGel™ Bis-Tris胶专用转膜液(Powder),是一种粉末形态的安全用于Western时湿法转膜的缓冲液。转膜液也称转印缓冲液或电转液,本转膜液专用于Bis-Tris胶,也可用于Tris-Acetate胶。

本转膜液可在转膜过程中维持中性pH环境,从而保护氨基酸侧链不受改性,防止氨基酸侧链修饰,与使用Edman化学降解法的蛋白质N-端测序技术兼容[1]。

对还原性蛋白进行转膜时,可在本转膜液中加入0.1%的碧云天P0737 BeyoGel™ Antioxidant (400X),以促进还原性蛋白向膜转移。

本转膜液由高质量的Bicine、Bis-Tris、EDTA等试剂混合而成,为粉末装,配制时无需调整pH值。如需20倍浓缩装,推荐使用碧云天BeyoGel™ Transfer Buffer (20X, for Bis-Tris Gels) (P0753)。

对于Bis-Tris胶和Tris-Acetate胶,也可以使用Tris-Glycine缓冲系统的Western转膜液(P0021AP0021B)进行转膜。

本转膜液可以回收,回收后可以再使用1-2次。

1瓶本产品可配制1L转膜液。

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
P0755-1L BeyoGel™ Transfer Buffer (Powder, for Bis-Tris Gels) 1L
P0755-10L BeyoGel™ Transfer Buffer (Powder, for Bis-Tris Gels) 1L×10
说明书 1份
保存条件:

室温保存,一年有效。

注意事项:

不推荐将还原性蛋白样品和非还原性蛋白样品一起进行转膜。对还原性蛋白进行转膜时,可在配制转膜液时加入0.1%的BeyoGel™ Antioxidant (400X) (P0737)。

含有10%乙醇或甲醇的转膜液可在印迹模块中实现单块凝胶的最佳转移效果。如果需转移2块凝胶,请将乙醇或甲醇含量增加到20%,以确保蛋白的有效转移。

本产品适用于Bis-Tris和Tris-Acetate凝胶系统的转膜液,不适用于其它凝胶系统。

如果转膜时设定的电流或电压较大,会有比较明显的产热现象,即产生所谓的焦耳热效应(Joule heating),并导致转膜液的电阻变小,最终影响转膜效率、转膜液的缓冲能力、甚至过热时导致凝胶熔化或黏附在膜上。因此建议转膜时,在转膜槽内用冰盒降温,并将转膜槽置于冰浴中。同时也可以考虑转膜液配制好后先在4℃或者冰浴预冷。

使用本产品转膜时,如果设定恒流为300mA,无论是同一个转膜槽中1或2块胶转膜,电压在开始时一般为100V左右。由于转膜过程中,转膜液温度会逐渐升高,电阻变小,所以结束时电压一般为120V左右。转膜效率和电场强度(Electric field strength, 用E表示)相关,而电场强度主要和电压及电极之间的距离相关,即E=U/d。

由于用于转膜的电源品牌和型号的不同,一方面最高电流差异较大,另一方面功率也会有较大差别。通常大功率的电源相对贵一些,也更适合用于转膜。比如Bio-Rad Powerpac Basic Power Supply的最大功率是75W,在设定恒流为400mA时,电压超过187V时就会超过电源的最大功率而出现过载保护。有些电源会自动降低电压或电流,有些则会报错并停止转膜。对于出现停止转膜的情况,需要调低电流或电压,或者选择功率更大的电源。

转膜时转膜液的温度、凝胶的参数(如数量、厚度、离子浓度、丙烯酰胺浓度等)、滤纸的厚度、同时使用的转膜槽数量、转膜液的离子浓度、转膜液的体积、转膜液使用的次数等都可能会影响电流和电压。其中一个电泳同时使用的转膜槽数量是最关键因素,如果是恒流,每增加一个转膜槽,每个槽的电流和电压都会相应减少一份。如果需要同时使用2个或以上的转膜槽,建议使用高电流的大功率电源,或者设定较低的电流或电压进行比较长时间的转膜。

转膜时,如果出现报错而停止,需要根据情况查看是否是电压或电流过载,或者是如转膜液过多或过少、转膜槽的短路或断路等异常情况。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1.请按照下表配制转膜液。
Reagent Reduced Samples Non-Reduced Samples
BeyoGel™ Transfer Buffer (Powder, for Bis-Tris Gels) 1 bottle 1 bottle
BeyoGel™ Antioxidant (400X) (P0737) 1ml -
Ethanol or Methanol 100-200ml 100-200ml
H2O To 1000ml To 1000ml
Total Volume 1000ml 1000ml
注:如果配制好的转膜液使用前能4℃预冷,转膜效果更好。没有用完的转膜液可在常温或4℃保存,通常两周内可以正常使用。当转膜液颜色变为浅棕色或黄褐色时,应该丢弃。 2.转膜条件:300mA恒流或100V恒压1小时(推荐使用外置冰浴)即可很好地完成转膜。对于小分子量蛋白,可以适当减少转膜时间;同样对于大分子量蛋白,可以适当增加转膜时间。本转膜液也适合于快速转膜,如500mA恒流15分钟即可。 3.详细的Western操作可以参考碧云天相关网页:http://www.beyotime.com/support/western.htm
参考文献:
1.Chang E, Pourmal S, Zhou C, Kumar R, Teplova M, Pavletich NP, Marians KJ, Erdjument-Bromage H. J Biomol Tech. 2016. 27(2):61-74.
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