碧云天生产的双色SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X) (Dual Color SDS-PAGE Protein Sample Loading Buffer, 5X),是一种使用蓝色和红色染料、5倍浓缩的蛋白上样缓冲液。
本产品含有SDS和DTT,可以用于常规的SDS-PAGE蛋白样品的上样。
除了染料不同外,本产品与以溴酚蓝为染料的常规SDS-PAGE蛋白上样缓冲液效果一致。
用于常规的SDS-PAGE电泳时,本产品中蓝色染料的迁移率与溴酚蓝一致,红色染料的迁移速度和蓝色染料相近。Tris-Gly电泳体系中,在SDS-PAGE的胶浓度低于15%时,红色染料的迁移速度微快于蓝色染料,胶浓度高于15%时,红色染料的迁移速度微慢于蓝色染料。
本产品可以用于转膜后的泳道示踪:本双色SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X)中含特殊的红色染料,该红色染料可随蛋白转印到PVDF或NC等印迹膜上,从而可以用于泳道位置的指示,便于剪膜等操作。使用本产品的电泳及转膜效果参见图1。
图1. 双色SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X)用于BeyoGel™ Plus PAGE预制胶(Tris-Gly, 12%, 10孔) (P0458S)的电泳后的凝胶图(Gel after electrophoresis)、转膜后PVDF膜图(Blot)和转膜后凝胶图(Gel after transfer)。
包装清单:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P0285-2ml | 双色SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X) | 1ml×2 |
P0285-15ml | 双色SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X) | 15ml |
— | 说明书 | 1份 |
保存条件:
-20℃保存,至少一年有效。
注意事项:
本产品中含少量DTT,有轻微刺激性气味,但不含剧毒的巯基乙醇。
本产品必须完全溶解后再使用。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
1.在室温或不超过37℃的水浴中溶解双色SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X)。水浴溶解后立即室温存放,尽量避免长时间置于水浴中。使用完毕后置于-20℃保存。
2.按照每4微升蛋白样品加入1微升双色SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X)的比例,混合蛋白样品和双色蛋白上样缓冲液(5X)。注:本产品稀释至1X后也可以直接用于细胞或组织样品的裂解。
3.100℃或沸水浴加热3-5分钟,以充分变性蛋白。
注意:如果起始时细胞或组织的用量较大,基因组DNA含量较高,煮沸3-5分钟后有可能仍然比较粘稠或者有粘稠状的半透明物体。此时需要再煮沸5-10分钟或者加入适量稀释成1X的双色蛋白上样缓冲液后再煮沸3-5分钟。充分煮沸后一方面可以使结合在基因组DNA上的蛋白充分释放,同时可导致基因组DNA的部分断裂从而使粘稠感消失,这样就不会影响后续的上样操作了。适当超声或使用1ml注射器反复抽吸也可以打断基因组DNA从而使粘稠感消失。
4.冷却到室温后,直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可。
5.通常电泳至红色或蓝色染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。
相关产品:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P0015 | SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X) | 2ml |
P0015L | SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X) | 15ml |
P0015A | SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X) | 10ml |
P0015B | SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(2X) | 5ml |
P0015F | SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(6X) | 2ml |
P0016 | 非变性PAGE蛋白上样缓冲液(5X) | 2ml |
P0016N | 非变性非还原性蛋白上样缓冲液(5X) | 2ml |
P0283-2ml | 红色SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X) | 2ml |
P0283-15ml | 红色SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X) | 15ml |
P0285-2ml | 双色SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X) | 2ml |
P0285-15ml | 双色SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X) | 15ml |