碧云天生产的QuickBlock™ Western溶液套装(封闭液、洗涤液、一抗和二抗稀释液),是一种包含了Western Blot实验过程中常用的最新一代的快速高效QuickBlock™ Western封闭液、QuickBlock™ Western一抗稀释液、QuickBlock™ Western二抗稀释液及洗涤液的溶液套装。封闭液、一抗和二抗稀释液效果优于传统的同类产品,具有使用便捷、兼容性好、背景极低等优点。
本产品中的QuickBlock™ Western一抗稀释液(QuickBlock™ Primary Antibody Dilution Buffer for Western Blot) 是最新一代的高效一抗稀释液,总体效果显著优于传统的基于BSA(牛血清蛋白)、脱脂奶粉等的一抗稀释液,可以用于Western Blot (WB)时一抗的稀释和配制。QuickBlock™ Western一抗稀释液具有以下优点:a.节约一抗。用本稀释液稀释和配制的一抗可以在4℃保存和使用不少于6个月,并且可以反复多次用于Western,利于节约一抗;b.背景极低。本稀释液不含血清和白蛋白,确保极高的信噪比;c.兼容性好。本稀释液后续兼容辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase, HRP)、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase, AP)和生物素标记的二抗。本稀释液不含生物素,不会干扰基于生物素的检测;d.使用便捷。本稀释液无需添加任何额外的试剂,可以直接用于一抗的稀释。
本产品中的QuickBlock™ Western封闭液(QuickBlock™ Blocking Buffer for Western Blot) 是最新一代的快速高效Western封闭液,总体效果显著优于传统的基于BSA(牛血清蛋白)、脱脂奶粉、酪蛋白(Casein)等的封闭液及国外同类产品,主要用于Western blot (WB)实验中PVDF膜或硝酸纤维素膜(nitrocellulose membrane, NC膜)的封闭,也可以用于Western实验中一抗或二抗的稀释。QuickBlock™ Western封闭液具有以下优点:a.快速高效。使用本封闭液时,封闭时间通常仅需5-15分钟,并且和BSA、脱脂奶粉、酪蛋白等传统的Western封闭液以及国外同类的快速封闭液相比,显示出更强的信噪比;b.背景极低。本封闭液不含血清和白蛋白,确保极高的信噪比;c.兼容性好。本封闭液兼容辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase, HRP)、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase, AP)和生物素标记的二抗。本封闭液中添加了不影响HRP和AP活性的防腐剂,不会干扰HRP或AP标记二抗的检测。同时本封闭液不含生物素,不会干扰基于生物素的检测;d.使用便捷。本封闭液无需添加任何额外的试剂,可以直接用于印迹膜的封闭。关于不同封闭液的比较和选择,请参考碧云天的相关网页:http://www.beyotime.com/support/blocking-buffer.htm。
本产品中的Western洗涤液(10X)可以用于Western时一抗或二抗孵育后的洗涤。适当的洗涤可以降低背景,增强信噪比。
本产品中的QuickBlock™ Western二抗稀释液(QuickBlock™ Secondary Antibody Dilution Buffer for Western Blot) 是最新一代的高效二抗稀释液,总体效果显著优于传统的基于BSA(牛血清蛋白)、脱脂奶粉等的二抗稀释液,可以用于Western blot (WB)时二抗的稀释和配制。QuickBlock™ Western二抗稀释液具有以下优点:a.节约二抗。经本二抗稀释液稀释的二抗可以在2-3周内重复使用3-5次;b.背景极低。本稀释液不含血清和白蛋白,确保极高的信噪比;c.兼容性好。本稀释液兼容辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase, HRP) 、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase, AP)和生物素标记的二抗。本稀释液中添加了不影响HRP和AP活性的防腐剂,不会干扰HRP或AP标记二抗的检测。同时本封闭液不含生物素,不会干扰基于生物素的检测;d.使用便捷。本稀释液无需添加任何额外的试剂,可以直接用于二抗的稀释。
按照每次Western blot需要封闭液10ml、一抗稀释液10ml、二抗稀释液10ml、洗涤液10ml+30ml+30ml+10ml=80ml,约100ml计算,一个包装的本试剂盒,大约可以进行10张膜的Western Blot检测。
包装清单:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P0252-100ml | QuickBlock™ Western封闭液 | 100ml |
P0256-100ml | QuickBlock™ Western一抗稀释液 | 100ml |
P0023C3 | Western洗涤液(10X) | 100ml |
P0258-100ml | QuickBlock™ Western二抗稀释液 | 100ml |
— | 说明书 | 1份 |
保存条件:
4℃保存,一年有效。长期不适用可以-20℃保存。
注意事项:
取放PVDF膜和NC膜应使用平头镊子,并仅轻轻夹取其边角,操作过程须避免膜表面产生划痕、折痕或压痕等痕迹。
PVDF膜一经浸润和活化,需一直保持湿润,根据Western进行到的具体步骤可放置于western转模液或洗涤液等适当溶液中,否则可能会产生难以封闭的异常背景。
为了能使稀释的一抗可以反复多次使用,一抗孵育结束后稀释的一抗应立即存放在4℃,以便于后续重复使用。
通常QuickBlock™ Western封闭液用于PVDF膜及NC膜时的封闭时间为5-15分钟。对于一些背景非常高的抗体,可以尝试将封闭时间延长为30-60分钟。此外,如有特殊需要,也完全可以4℃封闭过夜。
由于没有任何一种封闭液是适用于所有实验体系的,因此对于一些特殊的实验,可能需要根据具体情况考虑使用其它更合适的封闭液。
为了能使稀释的二抗可以反复多次使用,二抗孵育结束后稀释的二抗应立即存放在4℃,以便于后续重复使用。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
1.QuickBlock™ Western一抗稀释液
a.参考所用的一抗的说明,以及样品中目的蛋白的含量,按照适当比例例如1:1000、1:500等比例稀释一抗。一抗稀释后即可直接用于Western。一次Western结束后,可以回收稀释的一抗,4℃保存,以用于下次的Western。
2.QuickBlock™ Western封闭液
a.完成转膜后,用Western洗涤液洗涤蛋白酶1-2分钟。
b.根据膜的大小,在平皿或者其它适当容器中倒入一定体积的QuickBlock™ Western封闭液,确保封闭液后续能充分覆盖膜即可。对于常规的western,一张约6.6×8.5cm的膜推荐使用约10ml左右的封闭液。
c.用平头镊夹住膜的一角,将膜放置在QuickBlock™ Western封闭液中,使封闭液完全浸没膜,置于水平摇床上封闭约10分钟(通常5-15分钟均可;经多种抗体的测试封闭10分总的效果很多时候会显著优于常规的BSA封闭1小时的效果)。
3.Western洗涤液(10X)
a.取一瓶Western洗涤液(10X),倒入到一洁净的量筒中,加入蒸馏水混匀并定容到1升后即为Western洗涤液(1X),并可以用于Western的洗涤。没有用完的洗涤液可以室温保存,通常1-2周内是可以正常使用的。如果发现洗涤液出现浑浊、沉淀等异常现象,宜废弃。
b.在一抗或二抗孵育结束后,加入少量Western洗涤液(1X),使之能盖住蛋白膜,在摇床上洗涤5分钟后,吸尽洗涤液,再加入新的洗涤液洗涤。共洗涤3次,每次5分钟。然后进行后续的操作。如果按照上述洗涤条件Western结果背景仍然较高,可以适当延长洗涤时间,并增加洗涤次数。通常,延长洗涤时间或增加洗涤次数不会对Western结果产生负面影响。
4.QuickBlock™Western二抗稀释液
a.参考所用的二抗的使用说明,以及一抗的质量和样品中目的蛋白的含量,按照适当比例例如1:1000、1:500等比例稀释二抗。二抗稀释后即可直接用于Western。一次Western结束后,可以回收稀释的二抗,4℃保存,以用于下次的Western。
b.详细的Western操作可以参考我们相关网页:http://www.beyotime.com/support/western.htm
相关产品:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P0023 | Western溶液套装(封闭液、洗涤液、一抗和二抗稀释液) | 共400ml |
P0023A-100ml | Western一抗稀释液 | 100ml |
P0023A-500ml | Western一抗稀释液 | 500ml |
P0023B-100ml | Western封闭液 | 100ml |
P0023B-500ml | Western封闭液 | 500ml |
P0023C-250ml | Western洗涤液 | 250ml |
P0023C-1L | Western洗涤液 | 2×500ml |
P0023C3 | Western洗涤液(10X) | 100ml |
P0023C6 | Western洗涤液(10X) | 10×100ml |
P0023D-100ml | Western二抗稀释液 | 100ml |
P0023D-500ml | Western二抗稀释液 | 500ml |
P0220 | QuickBlock™封闭液(PBS) | 100ml |
P0222 | QuickBlock™封闭液(PBSTw) | 100ml |
P0226 | QuickBlock™封闭液(PBSTx) | 100ml |
P0228 | QuickBlock™封闭液(TBS) | 100ml |
P0231 | QuickBlock™封闭液(TBSTw) | 100ml |
P0239 | QuickBlock™Western溶液套装(封闭液、洗涤液、一抗和二抗稀释液) | 共400ml |
P0252-100ml | QuickBlock™Western封闭液 | 100ml |
P0252-500ml | QuickBlock™Western封闭液 | 500ml |
P0256-100ml | QuickBlock™Western一抗稀释液 | 100ml |
P0256-500ml | QuickBlock™Western一抗稀释液 | 500ml |
P0258-100ml | QuickBlock™Western二抗稀释液 | 100ml |
P0258-500ml | QuickBlock™Western二抗稀释液 | 500ml |