碧云天生产的内源性过氧化物酶封闭液(Endogenous Peroxidase Blocking Buffer)主要用于免疫组化
(Immunohistochemistry,IHC)、免疫细胞化学染色(Immunocytochemistry, ICC)以及原位杂交(In situ hybridization, ISH)时组织或细胞内源性过氧化物酶的封闭。
内源性过氧化物酶广泛存在于一些细胞和组织中,包括血红细胞、肾脏和肝脏组织等。从而导致利用过氧化物酶的方法进行样品检测时会出现较高的背景,甚至出现假阳性结果。因此,细胞或组织样品等在染色前宜使用适当的过氧化物酶封闭液进行封闭,以消除内源性过氧化物酶的干扰。
碧云天生产的内源性过氧化物酶封闭液的组分经过反复测试和优化,封闭效果良好,能有效降低染色背景并且不会减弱特异性的信号,在许多情况下对于内源性过氧化物酶的封闭效果优于常规的过氧化氢溶液(参考图1)。
图1. 内源性过氧化物酶封闭液对于过氧化物酶的封闭效果及比较。把HRP标记的二抗按照1:50、1:100、1:200、1:500、1:1000、和1:2000稀释后滴1微升至硝酸纤维素膜上(依次为上排第1-4个点和下排第1和第2个点),干燥后,用不同的封闭液进行封闭,然后用DAB显色液进行显色。上图中可见对照组(control)可以检测到1:2000稀释的点,而竞争产品(Competitor)和常规过氧化氢(H2O2)封闭后都可以检测到1:1000稀释的点,而碧云天的封闭液基本上只能检测到1:500稀释的点。请重点关注上排第3和第4个点以及下排第一个点,可以明显看出碧云天的封闭液优于竞争产品和常规的过氧化氢封闭液。
碧云天生产的内源性过氧化物酶封闭液使用便捷,可以直接使用,无须配制或稀释。
一个包装的本产品按照每个样品需要使用100微升封闭液计算,共可以用于1000个样品。
包装清单:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P0100A | 内源性过氧化物酶封闭液 | 100ml |
— | 说明书 | 1份 |
保存条件:
4℃保存,至少一年有效。
注意事项:
如果使用本产品后仍然有一定的染色背景存在,可以尝试使用碧云天的内源性过氧化物酶强力封闭液(P0100B)。
对于使用过氧化物酶检测系统有困难的一些特殊情况,可以考虑尝试使用碱性磷酸酶检测系统。
本产品不含剧毒的甲醇,但还是对人体有刺激性,请注意适当防护。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
1. 用于免疫组化(IHC)和免疫细胞化学染色(ICC):
a. 对于进行免疫组化(IHC)和免疫细胞化学染色(ICC)的样品,先使用免疫染色洗涤液(P0106/P0106C/P0106L)或具有细胞膜通透功能的液体洗涤样品3-5min。
b. 吸净洗涤液,滴加适量的内源性过氧化物酶封闭液使其完全覆盖样品,室温孵育5-10min或者37℃孵育2-5min。
c. 去除内源性过氧化物酶封闭液,用洗涤液或PBS等其它适当溶液洗涤样品2-3次,每次1-3分钟。随后即可进行封闭和一抗孵育等后续步骤。
2. 用于原位杂交(In situ hybridization, ISH):
a. 在进行探针杂交前,滴加适量的内源性过氧化物酶封闭液使其完全覆盖样品,室温孵育5-10min或者37℃孵育2-5min。
b. 去除封闭液,用原位杂交的洗涤液洗涤2-3次,每次2-5分钟。随后即可进行杂交等后续步骤。
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