Western溶液套装(封闭液、洗涤液、一抗和二抗稀释液)
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产品编号 P0023
数量
¥ 373.00
产品包装:
共400ml
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使用说明
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碧云天生产的Western溶液套装(封闭液、洗涤液、一抗和二抗稀释液),是一种包含了Western Blot实验过程中常用的封闭液、洗涤液、一抗和二抗稀释液的溶液套装。
本产品中的一抗稀释液(Primary Antibody Dilution Buffer for Western Blot) 可以用于Western时一抗(primary antibody)的稀释和配制。其主要有效成分为经过反复优化的适量BSA、适当的去垢剂和一抗稳定试剂等,一方面能有效减少一抗的非特异性结合,另一方面能有效提升稀释后一抗的稳定保存时间。使用本Western一抗稀释液稀释和配制的一抗可以在4℃保存和使用不少于六个月,可以反复多次用于Western,节约您宝贵的抗体。
本产品中的Western封闭液(Blocking Buffer for Western Blot) 可以用于Western时转移了蛋白样品的PVDF膜或NC膜的封闭。其主要有效成分为经过反复优化的适量BSA和适当的去垢剂等,一方面能有效封闭膜上的蛋白结合位点,另一方面能有效减少后续一抗和二抗的非特异性结合。使用本Western封闭液封闭后,可以减小后续的一抗或二抗和膜的非特异性结合,降低背景,增强信噪比。
本产品中的Western洗涤液(10X)可以用于Western时一抗或二抗孵育后的洗涤。适当的洗涤可以降低背景,增强信噪比。
本产品中的Western二抗稀释液(Secondary Antibody Dilution Buffer for Western Blot) 可以用于Western时二抗(secondary antibody)的稀释。其主要有效成分为经过反复优化的适量BSA、适当的去垢剂和二抗稳定试剂等,一方面能有效减少二抗的非特异性结合,另一方面能有效提升稀释后二抗的稳定保存时间。经本Western二抗稀释液稀释的二抗可以在1-2周内重复使用3-5次。
按照每次Western blot需要封闭液10ml、一抗稀释液10ml、二抗稀释液10ml、洗涤液10ml+30ml+30ml+10ml=80ml,约100ml计算,一个包装的本试剂盒,大约可以进行10次Western Blot检测。
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
P0023A-100ml Western一抗稀释液 100ml
P0023B-100ml Western封闭液 100ml
P0023C3 Western洗涤液(10X) 100ml
P0023D-100ml Western二抗稀释液 100ml
说明书 1份

保存条件:
4℃保存,一年有效。长期不使用可以-20℃保存。
注意事项:
取放PVDF膜和NC膜应使用平头镊子,并仅轻轻夹取其边角,操作过程须避免膜表面产生划痕、折痕或压痕等痕迹。
PVDF膜一经浸润和活化,需一直保持湿润,根据Western进行到的具体步骤可放置于western转模液或洗涤液等适当溶液中,否则可能会产生难以封闭的异常背景。
为了能使抗体可以反复多次使用,建议尽量在4℃进行一抗和蛋白膜的结合反应,以减缓一抗的衰减速度。
通常在室温封闭60分钟即可。如果对于一些背景非常高的抗体,可以4℃封闭过夜。
本Western洗涤液(10X)配制成Western洗涤液(1X)后,宜4℃保存,并在1-2个月内用完,如果室温保存,宜在1-2周内用完。
本Western二抗稀释液经过滤除菌处理,使用过程中应尽量避免细菌污染。一旦启用后建议在一个月内用完,如果发现有沉淀或细菌污染请弃用。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1.Western一抗稀释液
a.参考所用的一抗的说明,以及样品中目的蛋白的含量,按照适当比例例如1:1000、1:500等比例稀释一抗。一抗稀释后即可直接用于Western。一次Western结束后,可以回收稀释的一抗,4℃保存,以用于下次的Western。
2.Western封闭液
a.完成转膜后,用Western洗涤液洗涤蛋白酶1-2分钟。加入Western封闭液,封闭60分钟,然后进行一抗孵育等后续操作。
3.Western洗涤液(10X)
a.取一瓶Western洗涤液(10X),倒入到一洁净的量筒中,加入蒸馏水混匀并定容到1升后即为Western洗涤液(1X),并可以用于Western的洗涤。没有用完的洗涤液可以室温保存,通常1-2周内是可以正常使用的。如果发现洗涤液出现浑浊、沉淀等异常现象,宜废弃。
b.在一抗或二抗孵育结束后,加入少量Western洗涤液(1X),使之能盖住蛋白膜,在摇床上洗涤5分钟后,吸尽洗涤液,再加入新的洗涤液洗涤。共洗涤3次,每次5分钟。然后进行后续的操作。如果按照上述洗涤条件Western结果背景仍然较高,可以适当延长洗涤时间,并增加洗涤次数。通常,延长洗涤时间或增加洗涤次数不会对Western结果产生负面影响。
4.Western二抗稀释液
a.参考所用的二抗的使用说明,以及一抗的质量和样品中目的蛋白的含量,按照适当比例例如1:1000、1:500等比例稀释二抗。二抗稀释后即可直接用于Western。一次Western结束后,可以回收稀释的二抗,4℃保存,以用于下次的Western,通常在1-2周内可以重复使用3-5次。
b.详细的Western操作可以参考我们相关网页:http://www.beyotime.com/support/western.htm
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产品编号 产品名称 包装
P0023 Western溶液套装(封闭液、洗涤液、一抗和二抗稀释液) 共400ml
P0023A-100ml Western一抗稀释液 100ml
P0023A-500ml Western一抗稀释液 500ml
P0023B-100ml Western封闭液 100ml
P0023B-500ml Western封闭液 500ml
P0023C-250ml Western洗涤液 250ml
P0023C-1L Western洗涤液 2×500ml
P0023C3 Western洗涤液(10X) 100ml
P0023C6 Western洗涤液(10X) 10×100ml
P0023D-100ml Western二抗稀释液 100ml
P0023D-500ml Western二抗稀释液 500ml
P0220 QuickBlock™封闭液(PBS) 100ml
P0222 QuickBlock™封闭液(PBSTw) 100ml
P0226 QuickBlock™封闭液(PBSTx) 100ml
P0228 QuickBlock™封闭液(TBS) 100ml
P0231 QuickBlock™封闭液(TBSTw) 100ml
P0239 QuickBlock™Western溶液套装(封闭液、洗涤液、一抗和二抗稀释液) 共400ml
P0252-100ml QuickBlock™Western封闭液 100ml
P0252-500ml QuickBlock™Western封闭液 500ml
P0256-100ml QuickBlock™Western一抗稀释液 100ml
P0256-500ml QuickBlock™Western一抗稀释液 500ml
P0258-100ml QuickBlock™Western二抗稀释液 100ml
P0258-500ml QuickBlock™Western二抗稀释液 500ml


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使用本产品的文献:
1. Jianchang Qian, Sihui Yin, Lin Ye, Zhe Wang, Sheng Shu, Zhenxin Mou, Mingjiang Xu, Nipon Chattipakorn, Zhiguo Liu, Guang Liang
J Inflamm Res. doi: 10.2147/JIR.S308353.