碧云天生产的Western溶液套装(封闭液、洗涤液、一抗和二抗稀释液)，是一种包含了Western Blot实验过程中常用的封闭液、洗涤液、一抗和二抗稀释液的溶液套装。
本产品中的一抗稀释液(Primary Antibody Dilution Buffer for Western Blot) 可以用于Western时一抗(primary antibody)的稀释和配制。其主要有效成分为经过反复优化的适量BSA、适当的去垢剂和一抗稳定试剂等，一方面能有效减少一抗的非特异性结合，另一方面能有效提升稀释后一抗的稳定保存时间。使用本Western一抗稀释液稀释和配制的一抗可以在4℃保存和使用不少于六个月，可以反复多次用于Western，节约您宝贵的抗体。
本产品中的Western封闭液(Blocking Buffer for Western Blot) 可以用于Western时转移了蛋白样品的PVDF膜或NC膜的封闭。其主要有效成分为经过反复优化的适量BSA和适当的去垢剂等，一方面能有效封闭膜上的蛋白结合位点，另一方面能有效减少后续一抗和二抗的非特异性结合。使用本Western封闭液封闭后，可以减小后续的一抗或二抗和膜的非特异性结合，降低背景，增强信噪比。
本产品中的Western洗涤液(10X)可以用于Western时一抗或二抗孵育后的洗涤。适当的洗涤可以降低背景，增强信噪比。
本产品中的Western二抗稀释液(Secondary Antibody Dilution Buffer for Western Blot) 可以用于Western时二抗(secondary antibody)的稀释。其主要有效成分为经过反复优化的适量BSA、适当的去垢剂和二抗稳定试剂等，一方面能有效减少二抗的非特异性结合，另一方面能有效提升稀释后二抗的稳定保存时间。经本Western二抗稀释液稀释的二抗可以在1-2周内重复使用3-5次。
按照每次Western blot需要封闭液10ml、一抗稀释液10ml、二抗稀释液10ml、洗涤液10ml+30ml+30ml+10ml=80ml，约100ml计算，一个包装的本试剂盒，大约可以进行10次Western Blot检测。
包装清单：

保存条件：
4℃保存，一年有效。长期不适用可以-20℃保存。
注意事项：
取放PVDF膜和NC膜应使用平头镊子，并仅轻轻夹取其边角，操作过程须避免膜表面产生划痕、折痕或压痕等痕迹。
PVDF膜一经浸润和活化，需一直保持湿润，根据Western进行到的具体步骤可放置于western转模液或洗涤液等适当溶液中，否则可能会产生难以封闭的异常背景。
为了能使抗体可以反复多次使用，建议尽量在4℃进行一抗和蛋白膜的结合反应，以减缓一抗的衰减速度。
通常在室温封闭60分钟即可。如果对于一些背景非常高的抗体，可以4℃封闭过夜。
本Western洗涤液(10X)配制成Western洗涤液(1X)后，宜4℃保存，并在1-2个月内用完，如果室温保存，宜在1-2周内用完。
本Western二抗稀释液经过滤除菌处理，使用过程中应尽量避免细菌污染。一旦启用后建议在一个月内用完，如果发现有沉淀或细菌污染请弃用。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：
1.Western一抗稀释液
a.参考所用的一抗的说明，以及样品中目的蛋白的含量，按照适当比例例如1：1000、1：500等比例稀释一抗。一抗稀释后即可直接用于Western。一次Western结束后，可以回收稀释的一抗，4℃保存，以用于下次的Western。
2.Western封闭液
a.完成转膜后，用Western洗涤液洗涤蛋白酶1-2分钟。加入Western封闭液，封闭60分钟，然后进行一抗孵育等后续操作。
3.Western洗涤液(10X)
a.取一瓶Western洗涤液(10X)，倒入到一洁净的量筒中，加入蒸馏水混匀并定容到1升后即为Western洗涤液(1X)，并可以用于Western的洗涤。没有用完的洗涤液可以室温保存，通常1-2周内是可以正常使用的。如果发现洗涤液出现浑浊、沉淀等异常现象，宜废弃。
b.在一抗或二抗孵育结束后，加入少量Western洗涤液(1X)，使之能盖住蛋白膜，在摇床上洗涤5分钟后，吸尽洗涤液，再加入新的洗涤液洗涤。共洗涤3次，每次5分钟。然后进行后续的操作。如果按照上述洗涤条件Western结果背景仍然较高，可以适当延长洗涤时间，并增加洗涤次数。通常，延长洗涤时间或增加洗涤次数不会对Western结果产生负面影响。
4.Western二抗稀释液
a.参考所用的二抗的使用说明，以及一抗的质量和样品中目的蛋白的含量，按照适当比例例如1：1000、1：500等比例稀释二抗。二抗稀释后即可直接用于Western。一次Western结束后，可以回收稀释的二抗，4℃保存，以用于下次的Western，通常在1-2周内可以重复使用3-5次。
b.详细的Western操作可以参考我们相关网页：http://www.beyotime.com/support/western.htm
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