RPA2 Knockout HEK293T Trizol Lysate (RPA2基因敲除HEK293T细胞Trizol裂解液)是通过同时表达Cas9、目的基因sgRNA和puromycin抗性基因,并实现了目的基因CRISPR敲除的多克隆HEK293T细胞的Trizol裂解液。该细胞中目的基因的敲除已经通过T7EI法的验证。本产品可用于该目的基因敲除后其信号通路相关RNA表达的研究。
本Trizol裂解液源于可同时表达Cas9、目的基因sgRNA和puromycin抗性基因的慢病毒感染HEK293T细胞并经过puromycin筛选后获得的多克隆HEK293T细胞。制备该细胞的相应慢病毒的基因序列的关键图谱信息请参考图1。
图1. 可同时表达sgRNA、Cas9和puromycin抗性的慢病毒其基因序列的关键图谱信息。
该细胞中目的基因的敲除已经通过T7EI法的验证。
由于本细胞是通过CRISPR/Cas9技术获得的多克隆细胞,基于CRISPR/Cas9技术的特点,理论上平均有2/3的细胞发生移码突变而导致了目的基因的敲除,平均有1/3的细胞并未发生移码突变。很多情况下有约2/3的细胞发生目的基因的敲除,已经足以进行很多的目的基因的生物学功能的研究了。如果希望获得100%基因敲除的细胞,可以自行使用本产品筛选单克隆细胞,或者委托碧云天进行单克隆细胞株的筛选服务。
本Trizol裂解液用于实验时,建议同时选购无任何靶向的对照细胞Trizol裂解液Control Knockout HEK293T Trizol Lysate (L00031)或靶向GFP的对照Trizol裂解液GFP Knockout HEK293T Trizol Lysate (L00033)。
碧云天同时提供基于CRISPR/Cas9技术的RPA2基因敲除的质粒(L30540 pLenti-RPA2-sgRNA)、慢病毒(L30541 RPA2 Knockout Lentivirus)、HEK293T细胞(L30542 RPA2 Knockout HEK293T Cells)、HEK293T敲除细胞的RIPA裂解液(L30543 RPA2 Knockout HEK293T RIPA Lysate)、HEK293T敲除细胞的Trizol裂解液(L30544 RPA2 Knockout HEK293T Trizol Lysate)等产品,具体请在碧云天网站查询或在本产品网页点击相应产品。
RPA2基因的基本信息如下:
Species | Gene Symbol | Gene ID | GenBank Accession | Transcript |
Human | RPA2 | 6118 | BC001630 | NM_002946 |
About the gene | |
Official Symbol | RPA2 |
Previous Symbol | - |
Official Full Name | replication protein A2 |
Synonyms | - |
Location | 1p35.3 |
Gene Type | protein-coding gene |
Uniprot ID | P15927 |
Pathway/Library | others |
Gene Summary | This gene encodes a subunit of the heterotrimeric Replication Protein A (RPA) complex, which binds to single-stranded DNA (ssDNA), forming a nucleoprotein complex that plays an important role in DNA metabolism, being involved in DNA replication, repair, recombination, telomere maintenance, and co-ordinating the cellular response to DNA damage through activation of the ataxia telangiectasia and Rad3-related protein (ATR) kinase. The RPA complex protects single-stranded DNA from nucleases, prevents formation of secondary structures that would interfere with repair, and co-ordinates the recruitment and departure of different genome maintenance factors. The heterotrimeric complex has two different modes of ssDNA binding, a low-affinity and high-affinity mode, determined by which oligonucleotide/oligosaccharide-binding (OB) domains of the complex are utilized, and differing in the length of DNA bound. This subunit contains a single OB domain that participates in high-affinity DNA binding and also contains a winged helix domain at its carboxy terminus, which interacts with many genome maintenance protein. Post-translational modifications of the RPA complex also plays a role in co-ordinating different damage response pathways. |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
L30544 | RPA2 Knockout HEK293T Trizol Lysate | 500µl |
— | 说明书 | 1份 |
-20℃保存,至少6个月有效;-80℃保存,至少一年有效。
注意事项:碧云天拥有sgRNA序列的知识产权,如果需要sgRNA序列,请在订购后发送邮件向info@beyotime.com索取。sgRNA序列信息与本产品,未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。使用者在发表研究论文或结果时,应注明来源。
对于非目录产品的CRISPR基因敲除细胞Trizol裂解液的定制,可联系碧云天技术服务service@beyotime.com。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
L00031 | Control Knockout HEK293T Trizol Lysate | 500µl |
L00033 | GFP Knockout HEK293T Trizol Lysate | 500µl |
D7166 | BeyoRT™ cDNA第一链合成试剂盒(RNase H-) | 10次 |
D7168 | BeyoRT™ II cDNA第一链合成试剂盒(RNase H-) | 20/100/500次 |
D7170 | BeyoRT™ II cDNA合成试剂盒(with gDNA Eraser) | 20/100/500次 |
D7178 | BeyoRT™ III cDNA第一链合成试剂盒 | 20/100/500次 |
D7180 | BeyoRT™ III cDNA合成试剂盒 (with gDNA EZeraser) | 20/100/500次 |
D7182 | BeyoRT™ III cDNA第一链合成预混液(5X) | 20/100/500次 |
D7185 | BeyoRT™ III cDNA合成预混液(5X)(with gDNA EZeraser) | 20/100/500次 |
D7260 | BeyoFast™ SYBR Green qPCR Mix (2X) | 1/5/25ml |
D7262 | BeyoFast™ SYBR Green qPCR Mix (2X, Low ROX) | 1/5/25ml |
D7265 | BeyoFast™ SYBR Green qPCR Mix (2X, High ROX) | 1/5/25ml |
D7268 | BeyoFast™ SYBR Green One-Step qRT-PCR Kit | 100/500次 |
D7271 | BeyoFast™ Probe qPCR Mix (2X) | 1/5/25ml |
D7272 | BeyoFast™ Probe qPCR Mix (2X, Low ROX) | 1/5/25ml |
D7273 | BeyoFast™ Probe qPCR Mix (2X, High ROX) | 1/5/25ml |
D7277 | BeyoFast™ Probe One-Step qRT-PCR Kit | 100/500次 |
R0011 | Beyozol (总RNA抽提试剂) | 100ml |
R0016 | Trizol (总RNA抽提试剂) | 100ml |